Name: Un modelo de quemaduras porcinas para investigar el proceso de curación en heridas por quemaduras de múltiples profundidades (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-02-23T13:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 49 s
Description: Aprende a desarrollar un modelo de quemaduras porcinas multigrado usando cerdos minipig Yucatán. Este protocolo estandarizado permite estudiar la cicatrización de heridas con alta reproducibilidad y seguimiento a largo plazo.

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<meta charset="utf8"></head><body>Modelo de Quemaduras de Yucatán Minipig para el Análisis de Quemaduras de Múltiples Profundidades

<table><tbody><tr><td>pinza de tejido Adson</td><td>Jarit</td><td>130-234</td><td></td></tr><tr><td>Cuentas de aluminio</td><td>Lab Armor</td><td>42370-002</td><td>Lab Armor Beads&nbsp;</td></tr><tr><td>Clorhidrato de buprenorfina</td><td>Ranbaxy Pharmaceuticals</td><td>NDC: 12469-0757-01</td><td>Buprenex Carprofeno inyectable</td></tr><tr><td></td><td>Pfizer</td><td>NADA 141-199</td><td>Rymadyl 50 mg / ml inyectable&nbsp;</td></tr><tr><td>Bloque cilíndrico de latón</td><td>Hecho a mano</td><td>N/A</td><td>Dibujo de ingeniería incluido en el manuscrito</td></tr><tr><td>Pluma dermográfica</td><td>McKesson</td><td>Marcador de piel quirúrgico Estéril</td><td></td></tr><tr><td>Desechable #15 Bisturíes quirúrgicos</td><td>Medline</td><td>MDS15315</td><td>Hojas de bisturí Parche de</td></tr><tr><td>fentanilo</td><td>Mylan</td><td>NDC:60505-7082</td><td>Fentanilo Sistema transdérmico</td></tr><tr><td>Isoflurano&nbsp;</td><td>Piramal</td><td>NDC:66794-013-25</td><td>Isoflurano, USP</td></tr><tr><td>McPherson Pinzas de coagulación bipolar</td><td>Bovie</td><td>A842</td><td>Punzones</td></tr><tr><td>de biopsia surtidos Miltex reutilizables y esterilizables en autoclave (3,4 y 5 mm)</td><td>Integra</td><td>33-38</td><td>Punzones de biopsia: tamaño para adaptarse al estudio Gasa</td></tr><tr><td>no tejida</td><td>Starryshine</td><td>GZNW22</td><td>2 x 2" no tejida de 4 capas almohadillas de gasa médica</td></tr><tr><td>Povidona Yodada</td><td>Betadine</td><td>NDC:0034-9200-88</td><td>Exfoliante quirúrgico 7.5%&nbsp;</td></tr><tr><td>Solución estéril isotónica de cloruro de sodio 0.9%</td><td>Aqualite System</td><td>RL-2095</td><td>Solución salina estéril</td></tr><tr><td>Tinta para tatuajes</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>Black - 2 oz - #9053</td><td></td></tr><tr><td>Rotulador de tatuajes</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>Special Electric Tattoo Marker</td><td></td></tr><tr><td>Aguja de tatuaje</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>1310251</td><td>Tattoo Aguja de 5 puntos</td></tr><tr><td>Tegaderm Apósito de película transparente</td><td>3M</td><td>1.628</td><td>Apósito adhesivo transparente grande</td></tr><tr><td>Placa calefactora con control</td><td>de temperatura Cole-Parmer</td><td>03407-11</td><td>StableTemp agitador de placa calefactora</td></tr><tr><td>Termómetro</td><td>American Scientific</td><td>U14295</td><td>Termómetro de mercurio</td></tr><tr><td>de tubo Clorhidrato de</td> <td>tiletamina y zolazepamZoetis</td><td>NDC: 54771-9050</td> Tintura de <td>telazol</td></tr><tr><td>de benjuí en aerosol</td><td>Smith& Nephew</td><td>407000</td><td>Spray de capa adhesiva</td></tr><tr><td>Triple Pomada antibiótica</td><td>Fougera</td><td>NDC 0168-0012-31</td><td>Pomada antibiótica</td></tr><tr><td>triple Stockinette tubular</td><td>Medline</td><td>NONNET02</td><td>Curad Medline Redes elásticas sin látex</td></tr><tr><td>Manta térmica</td><td>3M</td><td>Bair Hugger 750 unidad</td><td></td>de calentamiento</tr><tr><td>Xeroform Tira de gasa oclusiva</td><td>Covidien</td><td>8884433301</td><td>Apósitos para heridas de vaselina Xeroform</td></tr><tr><td>Xilacina</td><td>Vetone</td><td>NDC:13985-704-10</td><td>AnaSed LA</td></tr><tr><td>Yucat&agrave; n minicerdos (hembra, 30 kg)</td><td>Sinclair Bio Resources</td><td>N/A Pigmentación</td><td>completa&nbsp;</td></tr></tbody></table>

un modelo de quemaduras porcinas para investigar el proceso de curación en heridas por quemaduras de múltiples profundidades

A Swine Burn Model for Investigating the Healing Process in Multiple Depth Burn Wounds

La Figura 2A, B muestra los resultados de múltiples quemaduras en el dorso de un minicerdo de Yucatán. Las heridas (I) y (VII) son heridas de control (37 °C). Heridas de segundo grado (II; III y VIII) se presentan con enrojecimiento intenso y ampollas. Por el contrario, las heridas de tercer grado (IV; V; y VI) son pálidos e indurados a la palpación. Cabe señalar que la herida VIII parece intermedia entre el segundo y el tercer grado: para el propósito de un estudio en curso, aumentamos el tiempo de contacto a 45 s a 65 grados. En la figura 2C se muestra el aspecto de las heridas tras la escarotomía en el día 3 del postoperatorio. Se realizó una ampolla en las heridas de segundo grado, y se realizó una escisión "en bloque" del tejido quemado indurado en las heridas de tercer grado, con el fin de crear un lecho de herida viable para la cicatrización secundaria. Se realizó una cauterización mínima del plexo dérmico si el sangrado no se detuvo espontáneamente. Las figuras 2D-F muestran el aspecto de las heridas en los momentos posteriores (semana 2, semana 3 y semana 7, respectivamente).
Los resultados histológicos se muestran en la Figura 3 (H&amp;E, 5,5x y 20x). La piel de control (Figura 3A,B) muestra una epidermis intacta (bracket azul), incluyendo un estrato córneo (flecha azul) adherido al resto del tejido cutáneo. La dermis muestra eosinofilia homogénea de color rosa pálido (colágeno y fibras elásticas - asterisco rojo). Las quemaduras de segundo grado (Figura 3D,E) revelan pérdida del estrato córneo en comparación con los controles (plano de escisión, correspondiente a las ampollas). La dermis superficial muestra eosinofilia más fuerte y fisuras/fracturas dentro de las estructuras dérmicas (flechas azules). Se conservan los vasos sanguíneos profundos (flecha roja). Las quemaduras de tercer grado (Figura 3G,H) muestran lesiones extensas con eosinofilia aumentada de la dermis así como fracturas dérmicas severas (flechas azules), llegando desde la dermis profunda hasta la hipodermis (vacuidad de los adipocitos, asterisco verde). Por último, la tinción tricrómica (Figura 3C, F, I) permite una mejor evaluación del tejido conectivo. Utiliza las diferencias en la tinción del colágeno desnaturalizado por calor para mostrar la profundidad de la quemadura. La figura 3C muestra claramente las características azules en la dermis intacta de la biopsia de la herida de control con la capa epidérmica superior. Esto contrasta con la quemadura de segundo grado (Figura 3F), donde la pérdida de epitelio se acompaña de desnaturalización del colágeno en la capa superior de la dermis (asterisco blanco). Por último, la herida de tercer grado (Figura 3I) muestra la pérdida de la capa epidérmica con una extensa mancha roja (flecha amarilla) de la capa dérmica, lo que indica una desnaturalización completa del colágeno en esta capa de la piel.
<img alt="Diagrama de experimento del modelo de lesiones por quemaduras; Bloque de latón calentado para inducción controlada de lesiones térmicas." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Figura 1: Posicionamiento de la sala de operaciones, configuración del dispositivo de quemado y diseño del estudio. El animal es anestesiado, intubado, ventilado y colocado en decúbito supino. El bloque de latón se coloca en el recipiente precalentado lleno de perlas de aluminio +/- agua. Un termómetro se coloca en el centro del bloque de latón para permitir el control de la temperatura central. La temperatura deseada depende de la profundidad de combustión deseada de acuerdo con el diseño del estudio. Para provocar quemaduras de espesor parcial, se recomienda un contacto de 30 s a 65 °C sin presión añadida. Para quemaduras de tercer grado, se recomienda un contacto de 30 s a 93 °C sin presión añadida. Las quemaduras de segundo y tercer grado deben ser aleatorias para evitar sesgos debidos al grosor diferencial de la piel. La ubicación de la herida pretatuada permite un fácil seguimiento de cada herida aleatorizada durante el seguimiento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Tabla de progresión de la cicatrización de heridas, diagrama de biopsias de piel circulares en diferentes tonos de piel a lo largo del tiempo." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Figura 2: Resultados representativos de los aspectos de la herida después de quemaduras aleatorias de múltiples profundidades en un Minipig de Yucatán. (A) El procedimiento de tatuaje se realiza colocándolo en la ubicación de los 8 puntos de la herida. Cada ubicación está numerada para facilitar el monitoreo. (B) Aspecto de las heridas después de la creación de la quemadura. Las heridas I y VII son controles, y las heridas II, III y VIII son heridas de espesor parcial. Las heridas IV, V y VI son heridas de tercer grado. (C) Aspecto de las heridas después de la escarotomía de las heridas de tercer grado en POD3. También se realizó una ampolla en las heridas de espesor parcial. (D) Aspecto de la cicatrización de la herida en POD14 que muestra un lecho limpio de las heridas de tercer grado (II y V), e islas de reepitelización de los apéndices de la piel en las heridas de espesor parcial (III, IV, VI, VII, VIII). (E) Aspecto del proceso de cicatrización de la herida en POD21 que muestra contractura de los lechos de la herida de tercer grado y reepitelización adicional en las heridas de segundo grado. (F) Aspecto de las heridas en POD49 que muestra contractura avanzada en las heridas de tercer grado y epitelización subtotal de las heridas de espesor parcial con hiperpigmentación postinflamatoria importante. Tenga en cuenta que las heridas mostradas pueden presentar cicatrices en el sitio de la biopsia. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Histología de la cicatrización de heridas por quemaduras: control, quemaduras de 2º y 3º grado. Muestras de tejido teñido, análisis." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Figura 3: Resultados histológicos. Resultados representativos del aspecto histológico de las heridas [Microscopía óptica 10x (A,C,D,F,G,I) y 20x (B,E,H); hematoxilina y eosina (A,B,D,E,G,H); Tricrómico de Masson (C,F,I)]. La piel control (A,B) muestra una epidermis intacta (bracket negro), incluyendo un estrato córneo (flecha negra) adherido al resto del tejido cutáneo. La dermis muestra eosinofilia homogénea de color rosa pálido (colágeno y fibras elásticas - asterisco rojo). La tinción tricrómica (C) revela el aspecto normal de la capa epidérmica y del tejido conectivo y de las fibras de colágeno dérmico. Las quemaduras de segundo grado (D,E) revelan pérdida del estrato córneo en comparación con los controles (plano de escisión, extirpado durante la blisterectomía). La dermis superficial muestra eosinofilia más fuerte y fisuras/fracturas dentro de las estructuras dérmicas (flechas azules). Se conservan los vasos sanguíneos profundos (flecha roja). El tricrómico (F) revela pérdida del epitelio, acompañada de desnaturalización del colágeno en la capa superior de la dermis (flecha amarilla). Las quemaduras de tercer grado (E,F) muestran lesiones extensas con aumento de eosinofilia de la dermis tan largas como fracturas dérmicas severas (flechas azules), llegando desde la dermis profunda hasta la hipodermis (vacuidad de los adipocitos, asterisco verde) y extensa tinción roja (I, flecha amarilla) de la capa dérmica con tricrómico, lo que indica una desnaturalización completa del colágeno. Barras de escala: A, D, G, 500 μm; B, E, H, 100 μm; C,F,I, 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Equilibrio estático; penetración del termómetro; diagrama, configuración, resultado; Experimento de expansión térmica." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> Figura 4: Dibujo de ingeniería del bloque de latón utilizado para la creación de heridas por quemaduras. (A) Ilustración que muestra las dimensiones del bloque de latón que se utilizó para construir el bloque. Un diámetro de 40 mm permite heridas de tamaño óptimo mientras que permite diseñar 8 heridas en un minicerdo Yucatán de 20-30 kg. (B) Diagrama que muestra el aspecto final del bloque de latón con un túnel central que permite que el termómetro mida la temperatura central del bloque. (C) Imagen que destaca el bloque de latón calentado a 65 °C, según lo mostrado por el termómetro de mercurio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Un modelo de quemaduras porcinas para investigar el proceso de curación en heridas por quemaduras de múltiples profundidades

Burn wound healing is a complex and long process. Despite extensive experience, plastic surgeons and specialized teams in burn centers still face ...

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Investigación

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Medicine

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