Modelo de rata de remodelación cardíaca derecha y arritmia mediante bandas de la arteria pulmonar

Este proyecto tiene como objetivo provocar un remodelado cardíaco severo del lado derecho para evaluar si el perfil inflamatorio miocárdico inducido se asocia con la susceptibilidad a las arritmias cardíacas. La flexión del tracto de la arteria pulmonar conduce con éxito a la insuficiencia cardíaca derecha y a cambios fisiológicos responsables del desarrollo de trastornos del ritmo cardíaco, incluida la fibrilación auricular o FA. La mayoría de los modelos in vivo disponibles de inflamación inducida involucran un estado inflamatorio sistémico genético o inducido por fármacos. A diferencia del conocido modelo de cardiopatía del lado izquierdo por infarto de miocardio o constricción aórtica, faltaba una prueba de concepto para estudiar las arritmias y la inflamación localizadas específicamente en el lado derecho del corazón.

Los estudios clínicos y fundamentales recientes convergieron para designar la inflamación como un denominador común importante de la mayoría de los factores de riesgo de FA. Además, la fisiopatología de la FA en la insuficiencia cardíaca derecha es poco conocida. Nuestro enfoque ayuda a caracterizar el papel de la inflamación en el desarrollo de FA en la insuficiencia cardíaca derecha En comparación con la insuficiencia cardíaca derecha inducida experimentalmente por fármacos, incluido el abordaje de la monocrogalina, que conduce a la inflamación pulmonar, nuestros métodos ayudaron a centrarse en la inflamación asociada a la insuficiencia cardíaca derecha para estudiar las arritmias auriculares y ventriculares.

Nuestros hallazgos ayudarán a comprender y describir mejor los mecanismos que orquestan la asociación entre la insuficiencia cardíaca derecha y la activación de la inflamación, que conduce a la fibrilación auricular. Para comenzar, desafila la punta y dobla la aguja de calibre 19 en un ángulo de 90 a 110 grados con pinzas. Después de anestesiar a la rata, intubarla con un tubo endotraqueal.

Para iniciar una toracotomía del lado izquierdo, con pinzas afiladas, perfore un pequeño orificio en la línea medioclavicular del músculo ubicado entre la tercera y la cuarta costilla, y complete el orificio con pinzas con puntas romas. Introduzca las pinzas curvas en la abertura y deslícelas a lo largo de la pared interior izquierda del músculo entre las dos costillas para levantar ligeramente la pared torácica izquierda y evitar tocar los pulmones mientras corta el músculo. Utilice las pinzas introducidas como guía para hacer una incisión longitudinalmente a lo largo de las costillas, aproximadamente un centímetro, con unas tijeras de iris.

Expanda la incisión intercostal a uno o dos centímetros a la izquierda de la rata con unas tijeras de punta redonda. Vuelva a colocar sus retractores debajo de las costillas para mantener la herida abierta. Observe la parte inferior del timo y una porción del lóbulo izquierdo del pulmón.

Separe los lóbulos del timo mediante una disección roma con fórceps. Diseccionar la capa delgada del pericardio y el tejido adiposo adherido sin tocar la membrana pleural. Sostenga el pulmón del lado izquierdo con una gasa húmeda.

A continuación, exponer la porción superior del corazón, la aurícula izquierda, el tronco pulmonar y el arco aórtico. Ahora, inserte las pinzas curvas en una posición cerrada en el espacio entre la orejuela auricular izquierda y el tronco pulmonar para llegar al otro lado del vaso. Visualice la punta de las pinzas a través de la membrana conjuntiva cranealmente al tronco pulmonar.

Con una segunda pinza, disecciona la punta y perfora con cuidado la membrana para crear una pequeña abertura. Ligeramente abiertos, los fórceps curvos se colocan debajo del tronco pulmonar para agarrar un hilo de seda 5 0. Retraiga las pinzas para llevar el hilo de un lado al otro del tronco pulmonar.

A continuación, realice la constricción del tronco pulmonar practicando primero un nudo doble suelto de la seda 5 0 cerca de la arteria. Inserte la aguja de calibre 19 a lo largo del vaso y debajo del hilo. A continuación, aprieta el primer nudo y fíjalo con un segundo nudo simple antes de retirar la aguja de calibre 19.

Realiza un último nudo simple y corta el hilo de seda 5 0 restante a una distancia de 0,5 a un centímetro del nudo. Para cerrar la caja torácica, realice un patrón de punto de cruz con un hilo de sutura sintético absorbible 5 0. Aplique unas gotas de solución salina al 0,9% sobre el área de la herida.

A continuación, comprima cada lado de la pared torácica para eliminar las burbujas de aire y restablecer la presión torácica negativa. Vuelva a colocar los músculos pectorales y limpie la solución salina restante con una gasa estéril. Con una jeringa, aplique un bloque de salpicaduras de lidocaína en la superficie y el área circundante de la herida.

Cierre la piel con un hilo de sutura sintético absorbible 5 0 con una aguja en un patrón subcuticular continuo. Después de eliminar la inhalación de isoflurano, mantenga a la rata bajo ventilación mecánica con flujo de oxígeno. Gira la rata sobre su lado derecho o posición ventral para facilitar la respiración.

Una vez que la rata comience a moverse por sí sola, transfiérala de la almohadilla térmica a una nueva jaula estéril para su recuperación. Durante el período postoperatorio, coloque la jaula sobre una almohadilla térmica para mantener la temperatura corporal y monitorear a la rata. Después de la cirugía PAB y del período de recuperación postoperatoria, colocar a la rata anestesiada en un sistema de adquisición de imágenes para ecocardiografía transtorácica.

Utilice el mapeo de colores en una vista bidimensional del eje corto paraesternal colocando la sonda 12S a la altura de la válvula aórtica. Haga clic en el botón Doppler color de la máquina de eco para visualizar el patrón de flujo sanguíneo que cruza el área de PAB en el tronco pulmonar. Realice un doppler de onda continua en la vista bidimensional del eje corto paraesternal para registrar las propiedades del flujo sanguíneo que cruza el área de PAB, incluida la velocidad máxima y el gradiente de presión media.

Aplique una vista bidimensional apical de cuatro cámaras colocando la sonda 12S a la altura del ápice del corazón. Demostrar el agrandamiento de la aurícula derecha, o AR, y del ventrículo derecho, o VD, después de la cirugía, y determinar la dimensión horizontal de la AR al final de la sístole cardíaca. Aplique el mapeo de color en una vista bidimensional apical de cuatro cámaras para revelar la regurgitación tricuspídea debido a PAB mediante la adquisición de bucles de cine en la máquina de eco.

Para estudiar la excursión sistólica del plano del anillo tricuspídeo, se realizó una ecocardiografía en modo M en la vista apical de cuatro cámaras cruzando la conjunción del anillo tricúspide y la pared lateral del VD. Utilice la imagen Doppler tisular en la vista apical de cuatro cámaras a nivel de la conjunción del anillo tricúspide y la pared lateral del VD para la medición de la contractilidad sistólica de la pared lateral del VD para evaluar el rendimiento sistólico del VD. Registre el flujo transtricuspídeo diastólico utilizando Doppler de onda pulsada en la vista apical de cuatro cámaras para estudiar la velocidad máxima en la onda de llenado temprana, la onda de llenado auricular y la relación entre la onda de llenado temprana y la onda de llenado auricular.

Realizar ecocardiografía en modo M en la vista del eje largo paraesternal a nivel de la válvula aórtica. Mida el tracto de salida del VD al final de la diástole cardíaca y la dimensión de la aurícula izquierda al final de la sístole cardíaca. Utilizando los siguientes conjuntos de umbrales de simulación, aplique una ráfaga de voltaje equivalente a cuatro veces el voltaje umbral para evaluar la vulnerabilidad a la fibrilación auricular.

Identificar y cuantificar la aparición de taquiritmias cardíacas, incluida la fibrilación auricular o el aleteo auricular, después de cada estallido. En comparación con el grupo simulado, las ratas PAB mostraron una velocidad máxima de la arteria pulmonar y un gradiente medio significativamente más altos, lo que confirma un aumento de la presión de la arteria pulmonar. El aumento del grosor del VD y la dilatación de la AR se confirmaron mediante ecocardiografía y análisis histológico post-PAB.

La presión sistólica del VD aumentó significativamente y la tasa de contractilidad del VD disminuyó en las ratas PAB en comparación con las simuladas. La PAB indujo un aumento significativo en el diámetro de la aurícula derecha, mientras que el diámetro de la aurícula izquierda permaneció sin cambios. Se observó un mal funcionamiento de la válvula tricúspide que conduce a regurgitación en ratas PAPA, caracterizado por fuga de sangre a la AR durante la sístole.

El intervalo RR y la duración de la onda P aumentaron significativamente en las ratas PAB en comparación con las simuladas, lo que indica una alteración de la frecuencia cardíaca y la conducción auricular. El intervalo QT se prolongó significativamente en las ratas PAPA, lo que sugiere una alteración de la contractilidad ventricular. Las ratas PAB mostraron una inducibilidad y duración de la fibrilación auricular significativamente mayores en comparación con las ratas simuladas.