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DOI: 10.3791/67451-v
Sophia Sartorius1, Luca Bramè1,2, Jutta Proba1, Anton Gauert1, Nadine Olk1, Juan Lazaro1, Angelika Eggert1, Cornelia Eckert1, Anja H. Hagemann1,2
1Charité-Universitätsmedizin Berlin, Klinik für Pädiatrie m.S. Onkologie/Hämatologie, 2German Cancer Consortium (DKTK), partner site Berlin, and German Cancer Research Center (DKFZ)
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este protocolo proporciona instrucciones paso a paso para generar y solucionar problemas de xenoinjertos de leucemia linfoblástica aguda (LLA) humana a partir de líneas celulares y material fresco del paciente en embriones de pez cebra inmunosuprimidos transitoriamente, junto con pautas para la evaluación de la respuesta a los medicamentos mediante citometría de flujo. La tubería experimental también se puede adaptar para tumores sólidos.
Hemos desarrollado un flujo de trabajo rápido de siete días para probar cómo responden las células tumorales a los medicamentos en el uso de embriones de pez cebra. Al estar cerca de la oncología pediátrica, tenemos acceso a muestras de cáncer raro, y comenzamos con la leucemia precursora de células B, pero ahora estamos adoptando el protocolo para tumores pediátricos sólidos para ver si el ensayo también funcionaría en un entorno clínico. Podemos cultivar con éxito células de leucemia derivadas de pacientes en embriones de pez cebra, lo que los convierte en un excelente modelo preclínico.
Sin embargo, la farmacocinética puede ser complicada, ya que algunos fármacos tienen dificultades para cruzar las barreras biológicas y, por lo tanto, nos aseguramos de probar la penetración antes de comenzar los experimentos. Nuestro enfoque es único porque bloquea la diferenciación de las células inmunitarias innatas, lo que ayuda a las células de injerto de leucemia a sobrevivir mejor. Además, estamos utilizando la citometría de flujo para medir la viabilidad y la proliferación de células individuales en células de injerto en grupos de 10 peces huéspedes.
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