Name: In vivo Las imágenes revelan el comportamiento migratorio de los leucocitos dentro de las articulaciones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-09T14:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: Aprende a realizar imágenes in vivo de articulaciones en ratones con artritis inducida por colágeno tipo II para estudiar la migración de leucocitos. Este protocolo permite visualizar la dinámica celular en tiempo real.

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<ol><li>Nourshargh, S., Alon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocyte+migration+into+inflamed+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Leukocyte migration into inflamed tissues.</a> Immunity. 41 (5), 694-707 (2014).</li>
<li>Miyabe, Y., Lian, J., Miyabe, C., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+in+rheumatic+diseases%3A+pathogenic+role+and+therapeutic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Chemokines in rheumatic diseases: pathogenic role and therapeutic implications.</a> Nat Rev Rheumatol. 15 (12), 731-746 (2019).</li>
<li>Griffith, J. W., Sokol, C. L., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+and+chemokine+receptors%3A+positioning+cells+for+host+defense+and+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Chemokines and chemokine receptors: positioning cells for host defense and immunity.</a> Annu Rev Immunol. 32, 659-702 (2014).</li>
<li>Murooka, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV-infected+T+cells+are+migratory+vehicles+for+viral+dissemination%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">HIV-infected T cells are migratory vehicles for viral dissemination.</a> Nature. 490 (7419), 283-287 (2012).</li>
<li>Mempel, T. R., Henrickson, S. E., Von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-cell+priming+by+dendritic+cells+in+lymph+nodes+occurs+in+three+distinct+phases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">T-cell priming by dendritic cells in lymph nodes occurs in three distinct phases.</a> Nature. 427 (6970), 154-159 (2004).</li>
<li>Sumen, C., Mempel, T. R., Mazo, I. B., von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+microscopy%3A+visualizing+immunity+in+context%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Intravital microscopy: visualizing immunity in context.</a> Immunity. 21 (3), 315-329 (2004).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+function+and+fate+of+neutrophils+in+sterile+injury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Visualizing the function and fate of neutrophils in sterile injury and repair.</a> Science. 358 (6359), 111-116 (2017).</li>
<li>Lammermann, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+swarms+require+LTB4+and+integrins+at+sites+of+cell+death+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neutrophil swarms require LTB4 and integrins at sites of cell death in vivo.</a> Nature. 498 (7454), 371-375 (2013).</li>
<li>Miyabe, Y., Kim, N. D., Miyabe, C., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+chemokine+control+of+neutrophil+migration+in+vivo+in+a+murine+model+of+inflammatory+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Studying chemokine control of neutrophil migration in vivo in a murine model of inflammatory arthritis.</a> Methods Enzymol. 570, 207-231 (2016).</li>
<li>Miyabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complement+C5a+receptor+is+the+key+initiator+of+neutrophil+adhesion+igniting+immune+complex-induced+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Complement C5a receptor is the key initiator of neutrophil adhesion igniting immune complex-induced arthritis.</a> Sci Immunol. 2 (7), eaaj2195(2017).</li>
<li>Sadik, C. D., Miyabe, Y., Sezin, T., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+critical+role+of+C5a+as+an+initiator+of+neutrophil-mediated+autoimmune+inflammation+of+the+joint+and+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">The critical role of C5a as an initiator of neutrophil-mediated autoimmune inflammation of the joint and skin.</a> Semin Immunol. 37, 21-29 (2018).</li>
<li>Miyabe, Y., Miyabe, C., Mani, V., Mempel, T. R., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+complement+receptor+C5aR2+transports+C5a+to+initiate+neutrophil+adhesion+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Atypical complement receptor C5aR2 transports C5a to initiate neutrophil adhesion and inflammation.</a> Sci Immunol. 4 (35), eaav5951(2019).</li>
<li>Kohl, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Igniting+the+flame+in+arthritis%3A+C5aR2+controls+endothelial+transcytosis+of+C5a%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Igniting the flame in arthritis: C5aR2 controls endothelial transcytosis of C5a.</a> Sci Immunol. 4 (35), eaax0352(2019).</li>
<li>Miyabe, Y., Miyabe, C., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LTB4+and+BLT1+in+inflammatory+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">LTB4 and BLT1 in inflammatory arthritis.</a> Semin Immunol. 33, 52-57 (2017).</li>
<li>Miyabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necessity+of+lysophosphatidic+acid+receptor+1+for+development+of+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Necessity of lysophosphatidic acid receptor 1 for development of arthritis.</a> Arthritis Rheum. 65 (8), 2037-2047 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>29 G x 1/2"</td><td>Terumo</td><td>SS-10M2913</td><td></td></tr><tr><td>0,1 M ácido acético</td><td>Fujifilm</td><td>016-18835</td><td></td></tr><tr><td>Jeringuilla plástica de 1 mL</td><td>ARRIBA</td><td>19531</td><td></td></tr><tr><td>Jeringuilla de 1 mm para grasa</td><td>Terumo</td><td>SS-01T</td><td></td></tr><tr><td>18 G x 1 1/2"</td><td>Terumo</td><td>NN-1838R</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 1/2"</td><td>Terumo</td><td>NN-2613S</td><td></td></tr><tr><td>680-250 kDa dextrán</td><td>Biotium</td><td>80135</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>invitrogen</td><td>16520-100</td><td></td></tr><tr><td>Colágeno bovino tipo II</td><td>Centro de Investigación del Colágeno</td><td>K42</td><td></td></tr><tr><td>Clay</td><td>Debika</td><td>93186</td><td></td></tr><tr><td>Un auténtico desastre' s adjuvante (CFA)</td><td>Chondrex</td><td>7001</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio confocal</td><td>Nikon</td><td>A1</td><td></td></tr><tr><td>Vidrio de cubierta</td><td>Matsunami Glass IND., Ltd</td><td>C024401</td><td></td></tr><tr><td>Pinza digital de la corredera</td><td>Mitsutoyo</td><td>500-180-30</td><td></td></tr><tr><td>Tubo Falcon (15 mL)</td><td>Corning</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Tubo Falcon (50 mL)</td><td>Corning</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo anti-ratón Ly6G conjugado con FITC</td><td>Bioleyenda</td><td>127606</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>Roboz</td><td>RS-5070</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>NAPOX</td><td>MA-48-2</td><td></td></tr><tr><td>Jeringuilla de vidrio y conector</td><td>Tsubasa Industry Co., Ltd&nbsp;</td><td>S7P</td><td></td></tr><tr><td>Grasa</td><td>Toray Dow Corning Silicona</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de cortar pelo</td><td>Wahl</td><td>WA5109</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de cortar pelo</td><td>Wahl</td><td>9966</td><td></td></tr><tr><td>Depilación cr&egrave; Yo</td><td>Kracie</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Medetomidina</td><td>Meiji</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Microtijeras</td><td>Roboz</td><td>RS-5610</td><td></td></tr><tr><td>Microtijeras</td><td>Roboz</td><td>RS-5630</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Sandoz</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Gasa húmeda</td><td>Nippon Paper Crecia Co., Ltd</td><td>S-200</td><td></td></tr><tr><td>Análisis de imágenes NIS-Elements 6.20.00</td><td>Nikon</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>PBS en tubo Falcon (50 mL)</td><td>Shimadzu Diagnostics Corporation</td><td>5913</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo anti-ratón conjugado con PE CD4</td><td>Bioleyenda</td><td>100408</td><td></td></tr><tr><td>Placa de plástico</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>Prism 10.3.1</td><td>GraphPad</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Vidrio deslizante</td><td>Muto Pure Chemicals Co., Ltd</td><td>5115</td><td></td></tr><tr><td>Alcance quirúrgico</td><td>Olimpo</td><td>VMZ</td><td></td></tr><tr><td>Enlace tisular</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Vetorphale&nbsp;</td><td>Meiji</td><td>N/A</td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo las imágenes revelan el comportamiento migratorio de los leucocitos dentro de las articulaciones

In Vivo Imaging Uncovers the Migratory Behavior of Leukocytes within the Joints

In vivo Las imágenes revelan el comportamiento migratorio de los leucocitos dentro de las articulaciones

Leukocytes are blood-borne cells derived from the bone marrow that must migrate into tissues to mediate inflammation. Controlling this migration, ...

in-vivo-imaging-uncovers-migratory-behavior-leukocytes-within

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Aquí se describe una manera no invasiva de dos fotones (2P), microscopía de enfoque para el estudio de leucocitos de recalada en la almohadilla plantar del ratón. Se discuten los aspectos técnicos de la preparación de imágenes de tejidos y caminar al lector a través de un experimento típico de la configuración inicial a la colección de ejecución y los datos.

De imagen no invasivas de Homing leucocitos y Migración In vivo</em

Se describe un protocolo de la microscopía de campo claro intravital para medir la dinámica de los neutrófilos interacciones célula endotelial durante el reclutamiento de neutrófilos en respuesta a la fuente de un quimioatrayente de neutrófilos en vivo. Rastreo de neutrófilos intraluminal, la migración y la quimiotaxis transendotelial en tejido de ratón músculo cremáster se visualizan con la fotografía de vídeo de tiempo transcurrido y el seguimiento con ImageJ.

Seguimiento de Rastreo de neutrófilos intraluminal, la migración transendotelial y la quimiotaxis de los tejidos por microscopía de vídeo intravital

Demostramos cómo realizar macrófagos RM con contraste superparamagnético ultra pequeño (USPIO) en la artritis séptica, lo que permite una inicial y...

En vivo los macrófagos de imágenes utilizando MR Agente de contraste dirigida para la Evaluación Longitudinal de Artritis séptica

Se describe un método de imagen no invasiva para distinguir las fases inflamatorias. El suministro sistémico de luminol revela zonas de inflamación aguda que dependen de la actividad MPO en neutrófilos. En contraste, la inyección de lucigenina permite la visualización de la inflamación crónica dependiente de la actividad Phox en los macrófagos.

In vivo método de imagen para distinguir la inflamación aguda y crónica

Los monocitos son reguladores clave de la inmunidad innata y desempeñan un papel crítico en la renovación del sistema fagocítico mononuclear periférico y en caso de inflamación. Este manuscrito describe el procedimiento de obtención de imágenes en tiempo real de la médula ósea calvaria del ratón para estudiar el mecanismo de movilización de monocitos.

Seguimiento de médula ósea de ratón monocitos<em&gt; En Vivo</em

Esta aplicación simplificada de la microscopía intravital de las venas del mesenterio en ratones se puede utilizar en diferentes modelos de inflamación para observar las interacciones leucocito-endotelial y plaqueta-leucocito.

Interacciones intravital microscopía de leucocitos endoteliales y plaquetas de leucocitos en mesenterial venas en ratones

Detallamos un protocolo para monitorizar el comportamiento de neutrófilos y monocitos en venas mesentéricas en estado estacionario e inflamatorio utilizando microscopía confocal intravital en ratones anestesiados.

Imaging neutrófilos y monocitos en mesentérica venas por Microscopia intravital en ratones anestesiados en Tiempo Real

El protocolo describe un novedoso modelo de cámara de ventana de fémur murino que se puede utilizar para rastrear el movimiento de las células en la médula ósea femoral in vivo. La microscopía de fluorescencia multifotónica intravital se utiliza para obtener imágenes de tres componentes de la médula ósea femoral (vasculatura, matriz de colágeno y neutrófilos) a lo largo del tiempo.

Fémur Window Cámara Modelo de<em&gt; En Vivo</em&gt; Seguimiento de la célula de la médula ósea murina

Este documento explica la aplicación de imagen fluorescente utilizando una sonda de formación de imágenes óptico activable para visualizar la actividad in vivo de las metaloproteinasas de matriz de teclas en dos modelos experimentales diferentes de inflamación.

No invasiva<em&gt; En Vivo</emHome Idiomas Ingresar a Epistemonikos Búsqueda avanzada Fluorescencia de imágenes ópticas de la actividad MMP inflamatoria utilizando un agente de imagen fluorescente activable

Aquí, mostramos cómo realizar la microscopía intravital en los ventosos post-capilares del músculo cremaestro del ratón. Comúnmente aplicados a diferentes modelos de inflamación y sepsis, particularmente los inducidos por quimioquinas y citoquinas, destacamos su relevancia en el estudio de las muscolopatías que implican una infiltración exagerada de leucocitos musculares.

Infiltración de leucocitos del músculo cremaestro en ratones evaluado por microscopía intravital

La migración de neutrófilos se basa en la remodelación rápida y continua de la membrana plasmática en respuesta al quimioatrayente y sus interacciones con el microambiente extracelular. En este trabajo se describe un procedimiento basado en Microscopía Subcelular Intravital para investigar la dinámica de la remodelación de la membrana en neutrófilos inyectados en el oído de ratones anestesiados.

Obtención de imágenes de la migración de neutrófilos en la piel del ratón para investigar la remodelación de la membrana subcelular en condiciones fisiológicas

Aprende a realizar imágenes in vivo de articulaciones en ratones con artritis inducida por colágeno tipo II para estudiar la migración de leucocitos. Este protocolo permite visualizar la dinámica celular en tiempo real.

In vivo Las imágenes revelan el comportamiento migratorio de los leucocitos dentro de las articulaciones

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