Name: Avances en el perfil metabólico de esferoides tumorales cerebrales tridimensionales para la detección de fármacos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-05T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Aprende a realizar perfil metabólico en esferoides tridimensionales de glioma usando tecnología Seahorse. Este método mejora la evaluación de respuestas tumorales a fármacos y elucida mecanismos de resistencia metabólica en cáncer cerebral.

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<ol><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+multiforme+%28GBM%29%3A+An+overview+of+current+therapies+and+mechanisms+of+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma multiforme (GBM): An overview of current therapies and mechanisms of resistance.</a> Pharmacol Res. 171, 105780(2021).</li>
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<li>Rybkowska, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+changes+between+monolayer+%282D%29+and+three-dimensional+%283D%29+culture+conditions+in+human+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells+derived+from+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The metabolic changes between monolayer (2D) and three-dimensional (3D) culture conditions in human mesenchymal stem/stromal cells derived from adipose tissue.</a> Cells. 12 (1), 178(2023).</li>
<li>Białkowska, K., Komorowski, P., Bryszewska, M., Miłowska, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spheroids+as+a+type+of+three-dimensional+cell+cultures-examples+of+methods+of+preparation+and+the+most+important+application%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spheroids as a type of three-dimensional cell cultures-examples of methods of preparation and the most important application.</a> Int J Mol Sci. 21 (17), 6225(2020).</li>
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<li>Renner, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fully+automated+high-throughput+workflow+for+3D-based+chemical+screening+in+human+midbrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A fully automated high-throughput workflow for 3D-based chemical screening in human midbrain organoids.</a> Elife. 9, e52904(2020).</li>
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<li>Dominijanni, A. J., Devarasetty, M., Forsythe, S. D., Votanopoulos, K. I., Soker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+assays+in+three-dimensional+hydrogels%3A+A+comparative+study+of+accuracy%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">Cell viability assays in three-dimensional hydrogels: A comparative study of accuracy.</a> Tissue Eng Part C Methods. 27 (7), 401-410 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Plato de 10 cm</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga de 15 ml</td><td>Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de centrífuga de 50 ml</td><td>Corning</td><td>430828</td><td></td></tr><tr><td>Calceína, AM</td><td>Invitrogen</td><td>C1430</td><td></td></tr><tr><td>Condesa 3</td><td>Termo Fisher</td><td></td><td>Contador automático de células</td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Gibco</td><td>A5669701</td><td></td></tr><tr><td>Armonía 5.2</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Software de imágenes</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Solarbio</td><td>C0031</td><td></td></tr><tr><td>MEM EBSS Medio</td><td>HyClone</td><td>SH30024.01</td><td></td></tr><tr><td>Opereta CLS</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Sistema de análisis de imágenes de alto contenido</td></tr><tr><td>PBS</td><td>HyClone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Bromhidrato de lisina poli-D</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P7280</td><td></td></tr><tr><td>Placas de 96 pocillos de fijación ultrabaja de fondo redondo</td><td>Corning</td><td>4515</td><td></td></tr><tr><td>Software de escritorio Seahorse Wave</td><td>Agilent</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Caballito de mar XFe96</td><td>Agilent</td><td></td><td>Máquina de pruebas metabólicas extracorpóreas</td></tr><tr><td>Sorvall ST8R</td><td>Termo Fisher</td><td></td><td>Centrífuga</td></tr><tr><td>TRIPSINA 0,25% EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>Línea celular U87MG</td><td>Infraestructura nacional de recursos celulares</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solución de glucosa XF 1.0 M, 50 ml</td><td>Agilent</td><td>103577-100</td><td></td></tr><tr><td>Solución de piruvato XF 100 mM, 50 ml</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>Solución de glutamina XF 200 mM, 50 ml</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Solución calibrante XF 500 mL&nbsp;</td><td>Agilent</td><td>100840-000</td><td></td></tr><tr><td>Kit de prueba de esfuerzo XF Cell Mito</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td></td></tr><tr><td>Medio XF DMEM, pH 7,4, 500 ml</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>XFe96/XF Pro Matriz de sondas de detección de flujo</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr><tr><td>Placas de ensayo metabólicas XFe96/XF Pro Fluxpak</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr></tbody></table>

avances en el perfil metabólico de esferoides tumorales cerebrales tridimensionales para la detección de fármacos

Advancements in the Metabolic Profiling of Three-Dimensional Brain Tumor Spheroids for Drug Screening

Los tres pasos más críticos en el proceso de detección del metabolismo energético de los esferoides celulares 3D son el cultivo de esferoides celulares 3D, el proceso de transferencia de esferoides y la obtención de imágenes y cuantificación de esferoides después de la detección (Figura 1). Además, observar el estado de los esferoides celulares es muy importante. Cuando los experimentos se realizaron de acuerdo con los procedimientos experimentales mencionados anteriormente, los esferoides s...

Avances en el perfil metabólico de esferoides tumorales cerebrales tridimensionales para la detección de fármacos

Brain tumors, especially gliomas, are challenging to treat because of their aggressive nature, complex tumor microenvironment, and resistance to ...

advancements-metabolic-profiling-three-dimensional-brain-tumor

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

La invasión de los tejidos normales circundantes es una característica definitoria de los tumores malignos. Proporcionamos aquí un ensayo de microplaca simple y semiautomatizado de invasión en una biomatriz 3D natural que se ha ejemplificado con una serie de modelos de cánceres humanos avanzados.

Tumor Ensayo tridimensional (3D) esferoide Invasion

Los xenoinjertos derivados del paciente de glioblastoma multiforme pueden miniaturizarse en microtumores vivos utilizando un sistema de cultivo de biogel humano en 3D. Este ensayo tumoral 3D de tipo in vivo es adecuado para las pruebas de respuesta a fármacos y la elaboración de perfiles moleculares, incluido el análisis cinómico.

Generación de microtumores Uso Humano 3D Biogel sistema de cultivo y las células de glioblastoma derivados de los pacientes para Kinomic de perfiles y pruebas de respuesta a los fármacos

Aquí, se describe un método para la preparación de la cultura de co de 3 dimensiones (3D) esferoide de células de cáncer de páncreas y fibroblastos, seguidos por la medida de las funciones metabólicas utilizando un analizador de flujo extracelular.

Preparación y análisis metabólico de 3 dimensiones del esferoide co-cultivos de células de cáncer de páncreas y fibroblastos

En una amplia variedad de indicaciones de enfermedad, modelos más fisiológico relevantes están siendo programas de descubrimiento de drogas desarrollado e implementado en. El nuevo sistema del modelo aquí descrito muestra tumor cómo tridimensional de esferoides pueden ser cultivados y defendidos en un sistema de base de placa de alto rendimiento 1536-bien buscar nuevos medicamentos de Oncología.

Generación de esferoides tumorales tridimensional de alto rendimiento para la detección de drogas

Tomografía de coherencia óptica (OCT), una tecnología de imagen tridimensional, fue utilizada para monitorear y caracterizar la cinética de crecimiento de esferoides multicelulares tumor. Cuantificación volumétrica precisa de esferoides tumorales usando un voxel contando el enfoque y la detección de tejido libre de etiqueta muerto en esferoides basado en contraste intrínseco atenuación óptica, fueron demostrados.

Longitudinal control morfológico y fisiológico de esferoides tumorales tridimensional mediante tomografía de coherencia óptica

Los efectos de los inhibidores migratorios en la migración de células cancerosas de glioma en ensayos de invasión tridimensionales (3D) utilizando un inhibidor de la histona deacetilasa (HDAC) se caracterizan por una microscopía confocal de alta resolución.

Caracterización de los efectos de los inhibidores migratorios en la invasión de esferoides de tumores 3D por microscopía confocal de alta resolución

Aquí, describimos un ensayo de invasión fácil de usar para el glioblastoma. Este ensayo es adecuado para células similares al glioblastoma similares a un tallo. También se describe una macro de Fiji para cuantificar fácilmente la invasión, la migración y la proliferación.

Un modelo de esferoides 3D para Glioblastoma

Estos protocolos ayudarán a los usuarios a sondear el metabolismo energético mitocondrial en esferoides derivados de líneas celulares de cáncer 3D utilizando el análisis de flujo extracelular Seahorse.

Explorando el metabolismo energético mitocondrial de esferoides de microtissue 3D individuales utilizando el análisis de flujo extracelular

El presente protocolo describe la generación de modelos de cultivo tumoral 3D a partir de células cancerosas primarias y la evaluación de su sensibilidad a los fármacos mediante ensayos de viabilidad celular y exámenes microscópicos.

Establecimiento de esferoides tridimensionales a partir de muestras tumorales derivadas de pacientes y evaluación de su sensibilidad a los fármacos

Este artículo demuestra un método estandarizado para construir esferoides tumorales tridimensionales. También se describe una estrategia para la observación de esferoides y el análisis de aprendizaje profundo basado en imágenes utilizando un sistema automatizado de imágenes.

Generación de esferoides tumorales 3D para estudios de evaluación de fármacos

Aprende a realizar perfil metabólico en esferoides tridimensionales de glioma usando tecnología Seahorse. Este método mejora la evaluación de respuestas tumorales a fármacos y elucida mecanismos de resistencia metabólica en cáncer cerebral.

Avances en el perfil metabólico de esferoides tumorales cerebrales tridimensionales para la detección de fármacos

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