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Artículo de método

Modelo de rata despierta de ictus isquémico con complicaciones neuropsiquiátricas durante una observación de siete días

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DOI:

10.3791/69194

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19 de diciembre de 2025

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En este artículo

Resumen

Se propone el nuevo modelo de ictus isquémico focal en ratas despiertas. Esto se logró inyectando un émbolo aéreo en la arteria carótida interna de las ratas. El desarrollo del ictus isquémico focal se confirmó mediante tinción cerebral con cloruro de trifeniltetrazolio, pruebas funcionales y evaluación de parámetros fisiológicos.

Resumen

El modelo traslacional del ictus experimental en ratas inducido por una embolia gaseosa fue creado para aclarar las características del desarrollo del ictus y evaluar el efecto neuroprotector de nuevos remedios y fármacos probados. El protocolo, que consume moderadamente tiempo y trabajo, permite observar la dinámica de la muerte neuronal rápida en animales despiertos, proporcionando una oportunidad única para evaluar la fase aguda del ictus, incluido el delirio, así como para monitorizar alteraciones autonómicas como cambios en la presión arterial, la temperatura corporal y el volumen mínimo respiratorio. El aire atmosférico (100 μL) se administró mediante infusión mediante un catéter vascular colocado retrogradamente en la arteria carótida común a través de la arteria carótida externa, utilizando una bomba de infusión. Veinticuatro horas después de la embolización, los animales presentan déficits conductuales, motores y diferencias histopatológicas estereotipadas. Al séptimo día del experimento, se observó una mejora significativa en el estado neurológico, y los resultados de las pruebas conductuales se acercaron a los valores de los controles. Al mismo tiempo, se observa una transición de infiltración neutrofílica a macrófaga en la lesión isquémica. El modelo propuesto puede utilizarse en estudios preclínicos, ya que reproduce las complicaciones neuropsiquiátricas del periodo posterior al ictus, junto con los correspondientes cambios fisiológicos, funcionales e histopatológicos.

Introducción

El objetivo de esta investigación fue desarrollar un modelo de ictus isquémico cerebral focal en ratas despiertas y lograr la aproximación más cercana posible de este modelo a los aspectos clínicos del ictus isquémico en humanos. Como demostró la investigación de Söyland et al., el 62,6 % de los pacientes presentaron síntomas significativos de ictus isquémico en estado de vigilia, mientras que solo el 19 % experimentó un ictus aldespertar 1. Por consiguiente, la aparición de un estado de vigilia durante la embolización de las artérias cerebrales en animales es de gran interés. Los modelos clásicos empleados par....

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Protocolo

El estudio se llevó a cabo conforme a los procedimientos operativos estándar del laboratorio y fue aprobado por la Comisión Bioética del Comité Institucional de Cuidado y Uso Animal de la Rama del Instituto Shemyakin-Ovchinnikov de Química Bioorgánica de la Academia de Ciencias de Rusia (Protocolo nº 1016/25, de fecha 17 de enero de 2025). En este estudio se utilizaron 28 ratas machos de Sprague-Dawley (SD), de entre 10 y 12 semanas, con un peso corporal medio de 301 g y un estado microbiológico de Libre de Patógenos Específicos (SPF). Los reactivos y el equipo utilizado se enumeran en la Tabla de Materiales.

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Resultados

Supervivencia y condición general
Inmediatamente después de la administración de la burbuja de aire, todas las ratas mostraron un estado alterado y un temblor pronunciado durante varios segundos, seguido de la suspensión de toda actividad motora y pérdida de conciencia durante 1-2 minutos. Algunos animales perdieron el apoyo en las patas durante 10-15 minutos tras recuperar la conciencia.

La tasa de supervivencia de los animales 3 horas des.......

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Discusión

La MCAO es un método común para modelar el ictus isquémico focal en ratas, que se logra mediante la formación de trombos, espasmo local de la arteria cerebral media y oclusión temporal por el filamento2. El objetivo de estos modelos es (1) lograr la apoptosis focal del tejido neuralcerebral 16 con volumen y área de lesiónestandarizados 17, (2) monitorizar el déficit neurológico de los animales durante 2-7 días

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este estudio fue apoyado por la Fundación Rusa de Ciencias, proyecto nº 25-15-00037.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Jeringuilla de 3 componentes con aguja de 2 mL  LEIKO52322223G
Bomba de infusión Aladdin SingleInstrumentos de Precisión MundialAL-1000
CiprofloxacinaPharmavet3897744Disolución al 5% de ciprofloxacina
Sistema informatizado PowerLab 8/35 ADInstruments3508-1090
DezinApteka.ru0,5% de bigluconato de clorhexidina en etanol al 70%
Termómetro digitalB.Well Swiss AGLOTE 0413
Medidor de fuerza de agarre con dinamómetro electrónicoBioMed Easy Technologies007231024415MC01
Kit ELISA para la proteína B que se une al calcio S100 (S100B)CLOUD-CLONE CORP. (CCC)SEA567Ra48T
Línea de pescaDiámetro 0,9 mm
Sistema de anestesia gaseosaUGO BASILE 21100
Software estadístico GraphPadPrismav.10
Director de agujas ranuradasFisher ScientificNº de catálogo 11-0012,7 cm
HeparinaEndopharm. Planta Endocrina de Moscú30122
ImageJInstitutos Nacionales de Salud y el Laboratorio de Instrumentación Óptica y Computacional
Jeringuilla de insulinaProductos hospitalarios SFM1603030,5 mL, U-100, 30G
Catéter intravenosoKD MedicalG24
Isoflurano (Isoflurina)Vetpharma100 mL, 1000 mg/kg
Inmovilizador de animales de laboratorio para animales de laboratorioCiencia AbiertaAE1001-R1
Microscopio ópticoZEISSAxio Scope.A1
Portaobjetos de microscopía ópticaTermo Científica15442933
Microtubos de polietileno de grado médicoScientific Commodities Inc.BB31695-PE/4Diámetro interior 0,76 mm
Toallitas médicas estériles con gasasNueva vida 45x29 CM
MicrotuboSARSEDT AG & Co. KGS0443781,5 mL
Micropipeta Eppendorf Research PlusEppendorf200 y micro; L
Portaobjetos de microscopioFisher Scientific11562203
Pinzas microquirúrgicas (curvas)Planta de Instrumentos Médicos de KazánF0106
Pinzas microquirúrgicas (rectas)Ciencias de la Vida RWDF11029-11
Láminas de microtomoTermo Científica3052835MX35 Premier+
Sistema de MultiacondicionamientoSistemas TSE131202-10
Formalina amortiguada en neutroHem1072024pH 6,8-7,2 
Sutura quirúrgica no absorbible LavsanLintex2022-01
Tijeras oftalmológicas para iridictomíaCM InstrumenteAJ-410-05
Concentrador de oxígenoArmadosYYT327009607F-3L
Amortiguador de fosfatoAMRESCO2120C462
Puntas de PiptteServicebio200 y micro; L
Ratasobtenido del Vivero de Animales de Laboratorio " Pushchino" (www.spf-animals.ru), Instituto Shemyakin-Ovchinnikov de Química Bioorgánica de la Academia de Ciencias de Rusia.
Centrífuga multifuncional de laboratorio refrigeradoEppendorf5804 R
Rota-Rod Rotamex-5 INSTRUMENTOS COLUMBUS210426
Tijeras METZENBAUM Instrumento MedstandartMT-H-256
Material de sutura quirúrgicaREPROMED114/0042011124Kaproag 4/0
Mesa quirúrgicaVetKormTorgVETBOT STL-1, TD00472
TelazolZoetis67291350 mg/mL de tiletamina y 50 mg/mL de zolazepam en 5 mL
Cloruro de trifeniltetrazolioDia-MTTC1809
XilazinaNITA-FARM1512% de xilazina hidrocloruro en 50 mL

Referencias

  1. Søyland, M. H., Tveiten, A., Eltoft, A., Øygarden, H., Varmdal, T., Indredavik, B., et al. Wake-up stroke and unknown-onset stroke: Occurrence and characteristics from the nationwide Norwegian Stroke Register. Eur Stroke J. 7 (2), 143-150 (2022).
  2. Li, Y., Zhang, J.

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