Name: Modelo murino de transición de enfermedad renal aguda a crónica inducida por isquemia/lesión de reperfusión renal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Aprende a establecer un modelo murino reproducible de transición de lesión renal aguda a enfermedad renal crónica mediante isquemia-reperfusión unilateral con nefrectomía contralateral diferida. Este protocolo optimiza la supervivencia y permite evaluaciones funcionales e histológicas completas.

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<ol><li>Susantitaphong, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((World+incidence+of+AKI%3A+A+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">World incidence of AKI: A meta-analysis.</a> Clin J Am Soc Nephrol. 8, 1482-1493 (2013).</li>
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<li>Coca, S. G., Singanamala, S., Parikh, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+kidney+disease+after+acute+kidney+injury%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Chronic kidney disease after acute kidney injury: a systematic review and meta-analysis.</a> Kidney Int. 81, 442-448 (2012).</li>
<li>Chawla, L. S., Eggers, P. W., Star, R. A., Kimmel, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+kidney+injury+and+chronic+kidney+disease+as+interconnected+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Acute kidney injury and chronic kidney disease as interconnected syndromes.</a> N Engl J Med. 371, 58-66 (2014).</li>
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<li>Malek, M., Nematbakhsh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+ischemia%2Freperfusion+injury%3B+from+pathophysiology+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Renal+Inj+Prev%22%5BJournal%5D)">Renal ischemia/reperfusion injury; from pathophysiology to treatment.</a> J Renal Inj Prev. 4, 20-27 (2015).</li>
<li>Le Clef, N., Verhulst, A., D'Haese, P. C., Vervaet, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+renal+ischemia-reperfusion+as+a+robust+model+for+acute+to+chronic+kidney+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Unilateral renal ischemia-reperfusion as a robust model for acute to chronic kidney injury in mice.</a> PLoS One. 11, e0152153(2016).</li>
<li>Smith, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+rat+and+mouse+models+of+bilateral+renal+ischemia+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vivo%22%5BJournal%5D)">Robust rat and mouse models of bilateral renal ischemia reperfusion injury.</a> In Vivo. 38, 1049-1057 (2024).</li>
<li>Skrypnyk, N. I., Harris, R. C., de Caestecker, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+model+of+acute+kidney+injury+and+post-injury+fibrosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion model of acute kidney injury and post-injury fibrosis in mice.</a> J Vis Exp. (78), e50495(2013).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sirtuin+5+regulates+proximal+tubule+fatty+acid+oxidation+to+protect+against+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Sirtuin 5 regulates proximal tubule fatty acid oxidation to protect against AKI.</a> JASN. 37 (1), 0163(2019).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial-derived+miR-17%7E92+promotes+angiogenesis+to+protect+against+renal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Endothelial-derived miR-17~92 promotes angiogenesis to protect against renal ischemia-reperfusion injury.</a> JASN. 32 (3), 552-563 (2021).</li>
<li>Silva Barbosa, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dicarboxylic+acid+dietary+supplementation+protects+against+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Dicarboxylic acid dietary supplementation protects against AKI.</a> JASN. 35, 135-148 (2024).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+long-chain+acyl-CoA+dehydrogenase+protects+against+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Loss of long-chain acyl-CoA dehydrogenase protects against acute kidney injury.</a> JCI Insight. 10, (2025).</li>
<li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinoic+Acid+signaling+coordinates+macrophage-dependent+injury+and+repair+after+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22JASN%22%5BJournal%5D)">Retinoic Acid signaling coordinates macrophage-dependent injury and repair after AKI.</a> JASN. 27, 495-508 (2016).</li>
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<li>Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ureteral+obstruction+as+a+model+of+renal+interstitial+fibrosis+and+obstructive+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy.</a> Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).</li>
<li>Bonventre, J. V., Yang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+pathophysiology+of+ischemic+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Cellular pathophysiology of ischemic acute kidney injury.</a> J Clin Invest. 121, 4210-4221 (2011).</li>
<li>Wei, Q., Dong, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+ischemic+acute+kidney+injury%3A+technical+notes+and+tricks%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mouse model of ischemic acute kidney injury: technical notes and tricks.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 303, F1487-F1494 (2012).</li>
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<li>Jordan, C. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+kidney+transplant+outcome+is+best+measured+by+transdermal+glomerular+filtration+rate%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Murine kidney transplant outcome is best measured by transdermal glomerular filtration rate.</a> Am J Transplant. 24, 2150-2156 (2024).</li>
<li>Scarfe, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+of+kidney+function+by+minimally+invasive+techniques+correlate+with+histological+glomerular+damage+in+SCID+mice+with+adriamycin-induced+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Measures of kidney function by minimally invasive techniques correlate with histological glomerular damage in SCID mice with adriamycin-induced nephropathy.</a> Sci Rep. 5, 13601(2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Filtro de gases anestésicos</td><td>A.M. Bickford&nbsp;</td><td>F-AIR</td><td></td></tr><tr><td>Cámara de inducción de anestesia, calentamiento</td><td>Productos de AIMS Lab</td><td>WCS8</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de recogida de sangre</td><td>BD Microtainer</td><td>365967</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Laboratorios de Descontaminación</td><td>2701</td><td></td></tr><tr><td>Ethiqa XR (buprenorfina de liberación prolongada)</td><td>Saludo Animal Fidelis</td><td>NDC 86084-100-30</td><td></td></tr><tr><td>Pomada para ojos</td><td>AKORN</td><td>NDC 17478-062-35</td><td></td></tr><tr><td>Gasas, estériles y nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>3353</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de cortar pelo para animales pequeños</td><td>WAHL</td><td>CLP-9868</td><td></td></tr><tr><td>Lámpara de calor, infrarrojo</td><td>Instrumentos Physitemp</td><td>HL-1</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de calor para circulación de agua caliente</td><td>BrainTree Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de calor/anestesia para animales pequeños, Versaflex&nbsp;</td><td>BrainTree Scientific</td><td>EZ-7150</td><td></td></tr><tr><td>Cortinados quirúrgicos que retienen el calor</td><td>Braintree Scientific</td><td>SPDR-MPS</td><td></td></tr><tr><td>Esterilizador de cuentas calientes</td><td>Simon Keller</td><td>Steri 250</td><td></td></tr><tr><td>Solución de isoflurano</td><td>Covetrus</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de clip de ligadura</td><td>¡QUÉ PUAJ!</td><td>533140</td><td></td></tr><tr><td>Clips de ligadura</td><td>¡QUÉ PUAJ!</td><td>533837</td><td></td></tr><tr><td>Microsonda para temperatura rectal y nbsp;</td><td>Fisitempo</td><td>RET-3</td><td></td></tr><tr><td>Termómetro de microsonda</td><td>Fisitempo</td><td>BAT-12</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio, óptico</td><td>Leica</td><td>DM2500</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio, escáner deslizante</td><td>Leica</td><td>Escáner de diapositivas Aperio CS2</td><td></td></tr><tr><td>Mouse (FVB/NJ)</td><td>Laboratorio Jackson</td><td>001800</td><td></td></tr><tr><td>Aguja (23G)</td><td>BD</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>Varillas de hipododio de povidona&nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>1201</td><td></td></tr><tr><td>Cuchillas de bisturí</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>10020-00</td><td></td></tr><tr><td>Empuñadura de bisturí</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>10060-13</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas quirúrgicas, no dentadas</td><td>Instrumento Quirúrgico Roboz</td><td>RS-5228</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas quirúrgicas, dentadas</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>11051-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas quirúrgicas, dentadas</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>11019-12</td><td></td></tr><tr><td>Guantes quirúrgicos</td><td>CTI</td><td>SPGF750</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras separadoras de tejido quirúrgico</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>14072-10</td><td></td></tr><tr><td>Sutura, Ácido Poliglicólico (PGA)/absorbible&nbsp; (5-0)</td><td>Dynarex</td><td>9131</td><td></td></tr><tr><td>Sutura, seda (4-0)</td><td>Oasis</td><td>MV-683-V</td><td></td></tr><tr><td>Jeringuilla (3ml)</td><td>BD</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Cortinas para toallas, estériles y nbsp;</td><td>Dynarex</td><td>4410</td><td></td></tr><tr><td>Pinza vascular aplicando pinzas</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>15057-14</td><td></td></tr><tr><td>Pinza vascular, no traumática y nbsp;</td><td>Herramientas Científicas Finas &nbsp;</td><td>18055-03</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de clip de herida</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>12020-09</td><td></td></tr><tr><td>Clips de herida</td><td>Herramientas Científicas Fines</td><td>12022-09</td><td></td></tr></tbody></table>

modelo murino de transición de enfermedad renal aguda a crónica inducida por isquemia/lesión de reperfusión renal

Mouse Model of Acute to Chronic Kidney Disease Transition Induced by Renal Ischemia/Reperfusion Injury

Modelo murino de transición de enfermedad renal aguda a crónica inducida por isquemia/lesión de reperfusión renal

Surgical transient occlusion of the renal pedicle induces renal ischemia&#8211;reperfusion injury (IRI), a widely used model for studying acute kidney ...

Nuestra investigación se centra en la lesión por isquemia-reperfusión renal, o IRI, investigando cómo impulsa el desarrollo y la progresión de la enfermedad renal crónica. Utilizamos un modelo isquémico de ERC en ratón que induce IRI renal unilateral, seguido de nefrectomía contralateral retardada para estudiar la progresión de la enfermedad. Para empezar, autoclave de todos los instrumentos quirúrgicos antes de su uso.Al realizar cirugías en varios animales, retira sangre y restos de los instrumentos entre procedimientos y luego esteriliza durante 10 a 15 segundos con un esterilizador de perlas calientes. Coloca una almohadilla térmica que circule agua en la mesa quirúrgica y coloca una lámpara infrarroja sobre el campo quirúrgico. Transfiere un ratón anestesiado a la almohadilla quirúrgica calentada.Administrar buprenorfina de liberación prolongada a 3,25 miligramos por kilogramo por vía subcutánea como analgesia. Coloca el ratón en posición prono y asegura las extremidades con cinta adhesiva para minimizar el movimiento. Luego retira el pelaje del lugar quirúrgico.Aplica pomada oftálmica en los ojos para evitar que se resece durante el procedimiento. Inserta una sonda rectal, fíjala con cinta y conéctala a un termómetro para monitorización continua. Desinfecta la zona quirúrgica alternando rondas de 10%povidona/yodo y etanol al 70% tres veces.Luego cubre la zona con una cortina estéril. Haz una incisión cutánea en la línea media de tres a cuatro centímetros que abarca el nivel del riñón y separa la piel de las capas subcutáneas. Inserta suavemente un dedo estéril enguantado entre la pared abdominal y la mesa quirúrgica y deslízate a lo largo de la pared abdominal para empujar el riñón dorsalmente hasta que sea visible a través del tejido subcutáneo.En el nivel donde se visualiza el riñón, aproximadamente un centímetro lateral a la columna vertebral en el lado izquierdo, se realiza una incisión muscular longitudinal de 1 a 1,5 centímetros. Luego exterioriza suavemente el riñón a través de la incisión dorsal. Si una membrana fina obstruye el acceso, disecciona de forma directa.Mientras estabilizas el riñón con pinzas no dentadas, disecciona de forma directa la grasa perihilar y el tejido conectivo alrededor del pedículo renal superior e inferior para crear un canal que permita la colocación de la pinza vascular. Confirma que la temperatura corporal central está entre 36,8 y 37,2 grados Celsius. Luego aplica una pinza vascular no traumática a lo largo de la arteria renal y la vena en forma de mano.Tira de la piel para cubrir el riñón y mantenerlo cerca de la temperatura corporal central. Mantener la temperatura corporal central entre 36,8 y 37,2 grados Celsius ajustando la bomba de calor y la lámpara infrarroja según sea necesario. Tras 30 minutos de isquemia, retira la pinza vascular.Después de retirar la pinza, confirma la reperfusión exitosa y devuelve el riñón a la cavidad abdominal usando un hisopo de algodón. Cierra la capa muscular con suturas absorbibles 5-0 y cierra la piel con clips para heridas. Deja que el ratón se recupere en una jaula limpia tras suspender la anestesia.Realizar nefrectomía contralateral un día antes de la extracción de tejido, que es 27 o 41 días después de la lesión de isquemia-reperfusión. Después de preparar al animal para la cirugía, como se ha demostrado anteriormente, realizar una incisión dorsal en la piel y subcutánea para exponer el riñón derecho. Crea una incisión muscular longitudinal de 1 a 1,5 centímetros, aproximadamente un centímetro lateral a la columna vertebral en el lado derecho.Mientras sostienes el riñón con pinzas no dentadas, disecciona de forma directa la grasa perihilar y el tejido conectivo para exponer el pedículo renal. Separa cuidadosamente la glándula suprarrenal del riñón dejando intacta la glándula suprarrenal. Luego liga el pedículo renal con un pequeño clip de ligadura y suturas de seda 4-0.Transecta los vasos del lado renal. Luego se corta el uréter y se quita el riñón. Cierra la incisión suturando el músculo y sujetando la piel.Las imágenes de bajo aumento de las secciones completas de riñón teñidas tricromo de Masson revelaron atrofia renal progresiva a los 28 y 42 días después de la lesión por isquemia-reperfusión renal. Además, la tinción tricroma de Masson mostró fibrosis intersticial extensa en la corteza y la médula a los 28 y 42 días después de la lesión por isquemia-reperfusión renal. Los niveles séricos de nitrógeno urea en sangre y creatinina sérica estaban significativamente elevados a los 28 y 42 días después de la lesión.La expresión de los genes marcadores de la ERC Acta 2 y Col1a1 se incrementó significativamente en los días 28 y 42 tras la lesión. Este protocolo permite a los investigadores evaluar los resultados de la cirugía renal, demostrando altas tasas de supervivencia y una mayor reproducibilidad mediante un enfoque quirúrgico dorsal. Un gran desafío en nefrología es la falta de terapias consolidadas capaces de prevenir o detener la progresión de la lesión renal aguda a la enfermedad renal crónica.Estudios futuros pueden utilizar este modelo isquémico de ERC para evaluar terapias novedosas e investigar la función génica utilizando ratones knockout dirigidos.

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Investigación

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Un modelo de gran alcance para los cuidados perioperatorios y críticos relacionados con la insuficiencia renal aguda se presenta. Utilizando todo el cuerpo hipoperfusión inducida por paro cardíaco, es posible reproducir casi los cambios histológicos y funcionales de la clínica AKI.

Arresto normotérmica cardiaca y reanimación cardiopulmonar: un modelo de ratón de la lesión por isquemia-reperfusión

Se describen modelos de lesión renal por isquemia-reperfusión inducida moderada y grave en la que los ratones se someten a pedículo renal unilateral de sujeción seguida de simultánea o en diferido nefrectomía contralateral, respectivamente. Estos modelos dan consistentemente lugar a la disfunción renal y la fibrosis después de la lesión, pero gravedad de la lesión y la supervivencia dependen de equipos de fondo, la edad y quirúrgicos ratón.

La isquemia-reperfusión modelo de lesión renal aguda y post lesión fibrosis en ratones

El modelo de ratón de lesión por reperfusión por isquemia renal descrito aquí comprende una nefrectomía derecha que proporciona tejido de control y pinzamiento del pedículo renal izquierdo para inducir isquemia que resulta en una lesión renal aguda. Este modelo utiliza un enfoque de laparotomía de línea media en el que todos los pasos se realizan a través de una incisión.

La isquemia reperfusión renal: un modelo de ratón de la lesión y regeneración

Este estudio presenta un modelo animal grande altamente reproducible de lesión renal de la isquemia-reperfusión en cerdos usando la obstrucción bilateral percutánea temporal del globo-catéter de las arterias renales por el minuto 60 y la reperfusión para 24 H.

Un modelo animal grande para la lesión renal aguda por oclusión bilateral temporal de la arteria renal

La lesión por isquemia-reperfusión renal se asocia con una alta morbilidad y mortalidad en pacientes hospitalizados. Aquí, presentamos un modelo de ratón simple y efectivo de lesión unilateral por isquemia-reperfusión renal y proporcionamos una visión general secuencial de los cambios patológicos representativos observados en el riñón.

Un modelo de ratón eficaz de lesión unilateral por isquemia-reperfusión renal

Este estudio estableció un protocolo centrado en el perfeccionamiento técnico de un modelo murino de isquemia-reperfusión renal bilateral para la investigación de la lesión renal aguda.

Perfeccionamiento técnico de un modelo murino bilateral de isquemia renal-reperfusión para la investigación de lesiones renales agudas

El grado de disfunción vascular y contribuir mecanismos fisiológicos se puede evaluar en los pacientes con enfermedad renal crónica mediante la medición de la dilatación de la arteria braquial mediada por flujo, velocidad de onda de pulso aórtica y vascular endotelial la expresión de proteínas de la célula.

Evaluación de la función vascular en pacientes con enfermedad renal crónica

A continuación se describe el procedimiento detallado de isquemia-reperfusión intestinal en ratones que produce lesiones reproducibles sin mortalidad para fomentar la estandarización de esta técnica a través del campo. Este modelo de lesión de isquemia-reperfusión intestinal puede ser utilizado para estudiar los mecanismos celulares y moleculares de la lesión y regeneración.

Modelo murino de isquemia-reperfusión intestinal Lesiones

Este artículo describe un procedimiento para la inducción de la lesión por isquemia-reperfusión de la retina por la presión intraocular elevada en los ratones. lesión de la retina por isquemia-reperfusión por la presión intraocular elevada sirve para modelar patologías humanas caracterizadas por oxígeno comprometida y la entrega de nutrientes en la retina, lo que permite a los investigadores a examinar los posibles mecanismos celulares y tratamientos para las enfermedades humanas de la unidad...

Un modelo murino de isquemia retiniana-reperfusión mediante la elevación de la presión intraocular

Este protocolo describe un work-up de riñón completo que debe ser llevado a cabo en modelos de ratón de la enfermedad glomerular. Los métodos permiten análisis funcional, estructural y mecánico de la función glomerular, que puede ser aplicado a todos los modelos de ratón de la enfermedad glomerular.

Evaluación de la función renal en modelos de ratón de la enfermedad Glomerular

Aprende a establecer un modelo murino reproducible de transición de lesión renal aguda a enfermedad renal crónica mediante isquemia-reperfusión unilateral con nefrectomía contralateral diferida. Este protocolo optimiza la supervivencia y permite evaluaciones funcionales e histológicas completas.

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