Name: Imagen espectroscópica de superresolución de moléculas de ADN usando contraste intrínseco (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-06T13:25:00.000+00:00
Duration: 9 min 19 s
Description: Aprende a realizar imagen espectroscópica de superresolución de moléculas de ADN sin marcadores fluorescentes. Este método preserva las propiedades moleculares nativas y evita artefactos del etiquetado.

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<ol><li>Ellis, R. J., Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Join+the+crowd%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Join the crowd.</a> Nature. 425 (6953), 27-28 (2003).</li>
<li>Hell, S. W., Wichmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breaking+the+diffraction+resolution+limit+by+stimulated+emission%3A+stimulated+emission-depletion+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Lett%22%5BJournal%5D)">Breaking the diffraction resolution limit by stimulated emission: stimulated emission-depletion fluorescence microscopy.</a> Opt Lett. 19 (11), 780(1994).</li>
<li>Rust, M. J., Bates, M., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sub-diffraction-limit+imaging+by+stochastic+optical+reconstruction+microscopy+%28STORM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Sub-diffraction-limit imaging by stochastic optical reconstruction microscopy (STORM).</a> Nat Methods. 3 (10), 793-796 (2006).</li>
<li>Betzig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+intracellular+fluorescent+proteins+at+nanometer+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Imaging intracellular fluorescent proteins at nanometer resolution.</a> Science. 313 (5793), 1642-1645 (2006).</li>
<li>Gustafsson, M. G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+structured-illumination+microscopy%3A+wide-field+fluorescence+imaging+with+theoretically+unlimited+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Nonlinear structured-illumination microscopy: wide-field fluorescence imaging with theoretically unlimited resolution.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (37), 13081-13086 (2005).</li>
<li>Hell, S. W., Kroug, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ground-state-depletion+fluorescence+microscopy%3A+a+concept+for+breaking+the+diffraction+resolution+limit%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Phys+B%22%5BJournal%5D)">Ground-state-depletion fluorescence microscopy: a concept for breaking the diffraction resolution limit.</a> Appl Phys B. 60 (5), 495-497 (1995).</li>
<li>Fölling, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+nanoscopy+by+ground-state+depletion+and+single-molecule+return%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fluorescence nanoscopy by ground-state depletion and single-molecule return.</a> Nat Methods. 5 (11), 943-945 (2008).</li>
<li>Ricci, M., Manzo, C., García-Parajo, M. F., Lakadamyali, M., Cosma, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+fibers+are+formed+by+heterogeneous+groups+of+nucleosomes+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Chromatin fibers are formed by heterogeneous groups of nucleosomes in vivo.</a> Cell. 160 (6), 1145-1158 (2015).</li>
<li>Bintu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+chromatin+tracing+reveals+domains+and+cooperative+interactions+in+single+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Super-resolution chromatin tracing reveals domains and cooperative interactions in single cells.</a> Science. 362 (6413), eaau1783(2018).</li>
<li>Matsuda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Condensed+mitotic+chromosome+structure+at+nanometer+resolution+using+PALM+and+EGFP-histones%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Condensed mitotic chromosome structure at nanometer resolution using PALM and EGFP-histones.</a> PLoS One. 5 (9), e12768(2010).</li>
<li>Bohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+microscopy+reveals+expression-dependent+parameters+of+chromatin+nanostructure%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Localization microscopy reveals expression-dependent parameters of chromatin nanostructure.</a> Biophys J. 99 (5), 1358-1367 (2010).</li>
<li>Acosta, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-color+single-molecule+localization+microscopy+in+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Light+Sci+Appl%22%5BJournal%5D)">Three-color single-molecule localization microscopy in chromatin.</a> Light Sci Appl. 14, 7(2025).</li>
<li>Almassalha, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+imaging+of+the+native%2C+living+cellular+nanoarchitecture+using+partial-wave+spectroscopic+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Label-free imaging of the native, living cellular nanoarchitecture using partial-wave spectroscopic microscopy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 113 (42), E6372-E6381 (2016).</li>
<li>Beerman, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+analogs+of+the+DNA+minor+groove+binder+Hoechst+33258+on+topoisomerase+II+and+I+mediated+activities%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Effects of analogs of the DNA minor groove binder Hoechst 33258 on topoisomerase II and I mediated activities.</a> Biochim Biophys Acta. 1131 (1), 53-61 (1992).</li>
<li>Cadet, J., Anselmino, C., Douki, T., Voituriez, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+trends+in+photobiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Photochem+Photobiol+B%22%5BJournal%5D)">New trends in photobiology.</a> J Photochem Photobiol B. 15 (4), 277-298 (1992).</li>
<li>Dong, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superresolution+intrinsic+fluorescence+imaging+of+chromatin+utilizing+native%2C+unmodified+nucleic+acids+for+contrast%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Superresolution intrinsic fluorescence imaging of chromatin utilizing native, unmodified nucleic acids for contrast.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 113 (35), 9716-9721 (2016).</li>
<li>Vayá, I., Gustavsson, T., Miannay, F., Douki, T., Markovitsi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+of+natural+DNA%3A+from+the+femtosecond+to+the+nanosecond+time+scales%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Fluorescence of natural DNA: from the femtosecond to the nanosecond time scales.</a> J Am Chem Soc. 132 (34), 11834-11835 (2010).</li>
<li>Anders, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+fluorescence+at+room+temperature+excited+by+means+of+a+dye+laser%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Phys+Lett%22%5BJournal%5D)">DNA fluorescence at room temperature excited by means of a dye laser.</a> Chem Phys Lett. 81 (2), 270-272 (1981).</li>
<li>Plessow, R., Brockhinke, A., Eimer, W., Kohse-Höinghaus, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+time-+and+wavelength-resolved+fluorescence+of+oligonucleotides%3A+a+systematic+investigation+using+a+novel+picosecond+laser+approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Phys+Chem+B%22%5BJournal%5D)">Intrinsic time- and wavelength-resolved fluorescence of oligonucleotides: a systematic investigation using a novel picosecond laser approach.</a> J Phys Chem B. 104 (15), 3695-3704 (2000).</li>
<li>Takaya, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((UV+excitation+of+single+DNA+and+RNA+strands+produces+high+yields+of+exciplex+states+between+two+stacked+bases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">UV excitation of single DNA and RNA strands produces high yields of exciplex states between two stacked bases.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (30), 10285-10290 (2008).</li>
<li>Bancaud, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fractal+model+for+nuclear+organization%3A+current+evidence+and+biological+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">A fractal model for nuclear organization: current evidence and biological implications.</a> Nucleic Acids Res. 40 (18), 8783-8792 (2012).</li>
<li>Daban, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+concentration+of+DNA+in+condensed+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">High concentration of DNA in condensed chromatin.</a> Biochem Cell Biol. 81 (3), 91-99 (2003).</li>
<li>Bohrmann, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concentration+evaluation+of+chromatin+in+unstained+resin-embedded+sections+by+means+of+low-dose+ratio-contrast+imaging+in+STEM%5BTitle%5D)+AND+%22Ultramicroscopy%22%5BJournal%5D)">Concentration evaluation of chromatin in unstained resin-embedded sections by means of low-dose ratio-contrast imaging in STEM.</a> Ultramicroscopy. 49 (1-4), 235-251 (1993).</li>
<li>Dong, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stochastic+fluorescence+switching+of+nucleic+acids+under+visible+light+illumination%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Stochastic fluorescence switching of nucleic acids under visible light illumination.</a> Opt Express. 25 (7), 7929-7944 (2017).</li>
<li>Gong, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+spectroscopic+intrinsic-contrast+photon-localization+optical+nanoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+SPIE%22%5BJournal%5D)">DNA spectroscopic intrinsic-contrast photon-localization optical nanoscopy.</a> Proc SPIE. 13326, 133260F(2025).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+DNA+spectroscopic+photon-localization+nanoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Optica+Biophotonic+Congress%22%5BJournal%5D)">Label-free DNA spectroscopic photon-localization nanoscopy.</a> Optica Biophotonic Congress. , (2025).</li>
<li>Eshein, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sub-10-nm+imaging+of+nucleic+acids+using+spectroscopic+intrinsic-contrast+photon-localization+optical+nanoscopy+%28SICLON%29%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Lett%22%5BJournal%5D)">Sub-10-nm imaging of nucleic acids using spectroscopic intrinsic-contrast photon-localization optical nanoscopy (SICLON).</a> Opt Lett. 43 (23), 5817-5820 (2018).</li>
<li>Song, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monolithic+dual-wedge+prism-based+spectroscopic+single-molecule+localization+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nanophotonics%22%5BJournal%5D)">Monolithic dual-wedge prism-based spectroscopic single-molecule localization microscopy.</a> Nanophotonics. 11 (8), 1527-1535 (2022).</li>
<li>Song, K. H., Sun, C., Zhang, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+strategy+for+a+dual-wedge+prism+imaging+spectrometer+in+spectroscopic+nanoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Sci+Instrum%22%5BJournal%5D)">Design strategy for a dual-wedge prism imaging spectrometer in spectroscopic nanoscopy.</a> Rev Sci Instrum. 94 (2), 023702(2023).</li>
<li>Yeo, W. H., Sun, C., Zhang, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physically+informed+Monte+Carlo+simulation+of+dual-wedge+prism-based+spectroscopic+single-molecule+localization+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Physically informed Monte Carlo simulation of dual-wedge prism-based spectroscopic single-molecule localization microscopy.</a> J Biomed Opt. 29 (S1), S11501(2023).</li>
<li>Davis, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RainbowSTORM%3A+an+open-source+ImageJ+plug-in+for+spectroscopic+single-molecule+localization+microscopy+%28sSMLM%29+data+analysis+and+image+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">RainbowSTORM: an open-source ImageJ plug-in for spectroscopic single-molecule localization microscopy (sSMLM) data analysis and image reconstruction.</a> Bioinformatics. 36 (19), 4972-4974 (2020).</li>
<li>Davis, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDavis%2C+JL+%22RainbowSTORM+v2+%28MATLAB+app%29%22">RainbowSTORM v2 (MATLAB app)</a>. , https://github.com/FOIL-NU/sSMLM-protocol (2020).</li>
<li>Brenner, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implementation+and+calibration+of+spectroscopic+single-molecule+localization+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Methods%22%5BJournal%5D)">Implementation and calibration of spectroscopic single-molecule localization microscopy.</a> BMC Methods. 2 (1), 2(2025).</li>
<li>sSMLM for DNA intrinsic fluorescence (Python scripts). , Backman Lab. 
 <a target="_blank" href="https://github.com/BackmanLab/sSMLM-for-DNA-intrinsic-fluorescence">https://github.com/BackmanLab/sSMLM-for-DNA-intrinsic-fluorescence</a> (2025).</li>
<li>N-STORM protocol. , Molecular Vista. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.mvi-inc.com/wp-content/uploads/N-STORM+Protocol.pdf">https://www.mvi-inc.com/wp-content/uploads/N-STORM+Protocol.pdf</a> (2014).</li>
<li>Abdelsayed, V., Boukhatem, H., Olivier, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+buffer+for+repeatable+multicolor+STORM%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Photonics%22%5BJournal%5D)">An optimized buffer for repeatable multicolor STORM.</a> ACS Photonics. 9 (12), 3926-3934 (2022).</li>
<li>Zumbusch, A., Holtom, G. R., Xie, X. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+vibrational+imaging+by+coherent+anti-Stokes+Raman+scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Rev+Lett%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional vibrational imaging by coherent anti-Stokes Raman scattering.</a> Phys Rev Lett. 82 (20), 4142(1999).</li>
<li>Benninger, R. K. P., Piston, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two%E2%80%90photon+excitation+microscopy+for+the+study+of+living+cells+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Two‐photon excitation microscopy for the study of living cells and tissues.</a> Curr Protoc Cell Biol. 59 (1), 4-11 (2013).</li>
<li>Zhang, C., Zhang, D., Cheng, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coherent+Raman+scattering+microscopy+in+biology+and+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rev+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Coherent Raman scattering microscopy in biology and medicine.</a> Ann Rev Biomed Eng. 17 (1), 415-445 (2015).</li>
<li>Song, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SNR+enhanced+high-speed+two-photon+microscopy+using+a+pulse+picker+and+time+gating+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">SNR enhanced high-speed two-photon microscopy using a pulse picker and time gating detection.</a> Sci Rep. 13 (1), 14244(2023).</li>
<li>Luu, P., Fraser, S. E., Schneider, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+double+the+fun+with+two-photon+excitation+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Comm+Biol%22%5BJournal%5D)">More than double the fun with two-photon excitation microscopy.</a> Comm Biol. 7 (1), 364(2024).</li>
<li>Van de Linde, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+stochastic+optical+reconstruction+microscopy+with+standard+fluorescent+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Direct stochastic optical reconstruction microscopy with standard fluorescent probes.</a> Nat Protoc. 6 (7), 991-1009 (2011).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+progress+on+the+luminescence+of+biomacromolecules%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mater+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Research progress on the luminescence of biomacromolecules.</a> J Mater Sci Technol. 76, 60-75 (2021).</li>
<li>Varejão, N., Reverter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+intrinsic+fluorescence+to+measure+protein+stability+upon+thermal+and+chemical+denaturation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Using intrinsic fluorescence to measure protein stability upon thermal and chemical denaturation.</a> Methods Mol Biol. 2581, 229-241 (2023).</li>
<li>Sindrewicz, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+tryptophan+fluorescence+spectroscopy+reliably+determines+galectin-ligand+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Intrinsic tryptophan fluorescence spectroscopy reliably determines galectin-ligand interactions.</a> Sci Rep. 9 (1), 11851(2019).</li>
<li>Ho, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+identification+of+pathogenic+bacteria+using+Raman+spectroscopy+and+deep+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Rapid identification of pathogenic bacteria using Raman spectroscopy and deep learning.</a> Nat Commun. 10 (1), 4927(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Filtro de emisión de 488 nm para imagen</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>ET525/50M</td><td></td></tr><tr><td>Filtro pasa banda de 532 nm para calibración</td><td>Thorlabs</td><td>FL532-3</td><td></td></tr><tr><td>Filtro de emisión de 532 nm para imagen</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>ET620/60M</td><td></td></tr><tr><td>Filtro pasa banda de 580 nm para calibración</td><td>Thorlabs</td><td>FB580-10</td><td></td></tr><tr><td>Filtro pasa banda de 633 nm para calibración</td><td>Thorlabs</td><td>FL632.8-3</td><td></td></tr><tr><td>Filtro pasa banda de 680 nm para calibración</td><td>Thorlabs</td><td>FB680-10</td><td></td></tr><tr><td>Filtro pasa banda de 750 nm para calibración</td><td>Thorlabs</td><td>FB750-10</td><td></td></tr><tr><td>Beta-mercaptoetanol &nbsp;</td><td>Sigma</td><td>M6250</td><td></td></tr><tr><td>Búfer de imagen BME</td><td>NA</td><td>NA</td><td>7 & mu; L GLOX, 7 y mu; L Beta-mercaptoetanol y 690 & mu; Tampón de L glucosa</td></tr><tr><td>Catalasa de hígado bovino</td><td>Sigma</td><td>C100</td><td></td></tr><tr><td>DABCO (1,4-di-azobiciclo-(2.2.2.)-octanaje)</td><td>Sigma</td><td>D27802</td><td></td></tr><tr><td>Búfer de imagen DABCO</td><td>NA</td><td>NA</td><td>65 mM DABCO+30 mM Sulfito de sodio + 30 mM DTT 1 M&nbsp; en el ADNasa, agua desionizada libre de ARNasa. El sulfito de sodio debe disolverse en PBS 10 y 5 veces; a 1 M antes de crear el buffer de imagen.</td></tr><tr><td>Deplex de ADN para SMLM espectroscópico</td><td>IDT</td><td>NA</td><td>20 pares de bases de doble hilo GC_alter, GC_conti, AT_alter y AT_conti. Por ejemplo, GC_alter tiene ambas hebras de 5' - GCGCGCGCGCGCGCGCGCGC - 3'; GC_conti tiene una hebra de 5' - GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG - 3' y el otro como 5' - CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC - 3' Todas las muestras están en el estándar HPLC.</td></tr><tr><td>ADN oligonucleótido/ADN de doble cadena</td><td>IDT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Oligos de ADN para SMLM espectroscópico</td><td>IDT</td><td>NA</td><td>20 bases de A, G, C, T; cadena de corriente alterna monohilo de 40 bases (A1C1, A5C5, A10C10, A20C20); &nbsp; Guanina monohilo de 5, 8, 12 y 16 bases. Por ejemplo, A10C10 es 5'- AAAAAAAAAACCCCC CCCCCAAAAAAAAA AACCCCCCCCCCCC - 3' Todas las muestras están en el estándar HPLC.</td></tr><tr><td>Agua Destilada Libre de DNasa/RNasa</td><td>Invitrogen</td><td>10977015</td><td></td></tr><tr><td>DTT (DL-Ditiotreitol)</td><td>Sigma</td><td>43816</td><td></td></tr><tr><td>GLOX</td><td>NA</td><td>NA</td><td>14 mg de glucosa oxidasa, 50 y mu; L catalasa (17 mg/ml) + 200 y mu; El buffer L A, que es de 10 mM Tris (pH 8,0) y 50 mM NaCl.&nbsp;</td></tr><tr><td>Buffer de glucosa</td><td>NA</td><td>NA</td><td>50 mM de Tris (pH 8,0), 50 mM de NaCl y 10% de glucosa.</td></tr><tr><td>Glucosa oxidasa</td><td>sigma</td><td>G7141</td><td></td></tr><tr><td>Glucosa, polvo</td><td>Thermo Fisher</td><td>15023021</td><td></td></tr><tr><td>PBS (10X)</td><td>Thermo Fisher</td><td>J62036. K3</td><td></td></tr><tr><td>PBS (1X)</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio</td><td>Thermo Fisher</td><td>424290010</td><td></td></tr><tr><td>Sulfito de sodio y nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S0505</td><td></td></tr><tr><td>Tris (1M) pH 8,0</td><td>Invitrogen</td><td>AM9856</td><td></td></tr></tbody></table>

imagen espectroscópica de superresolución de moléculas de adn usando contraste intrínseco

Spectroscopic Super-resolution Imaging of DNA Molecules using Intrinsic Contrast

Imagen espectroscópica de superresolución de moléculas de ADN usando contraste intrínseco

Super-resolution imaging has revolutionized biological research by revealing structural details at the nanoscale. Most optical super-resolution methods ...

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Una instrucción detallada se describe en cómo construir una muy inclinada de barrido microscopio de azulejo (HIST) y su uso para la proyección de imagen de una sola molécula.

Una guía para crear un altamente inclinado barrido microscopio de azulejo para la proyección de imagen de una sola molécula campo de visión extendida

3D multicolor DNA FISH representa una herramienta para visualizar múltiples loci genómicos dentro de núcleos conservados 3D, definiendo inequívocamente sus interacciones recíprocas y localización dentro del espacio nuclear a un solo nivel de célula. Aquí, se describe un protocolo paso a paso para un amplio espectro de células primarias humanas.

Herramienta 3D Multicolor DNA FISH para estudiar la arquitectura nuclear en células primarias humanas

El presente protocolo describe un método que mide las densidades absolutas de ADN dentro de los núcleos celulares adherentes utilizando la teselación de Voronoi de datos de microscopía de localización de una sola molécula, volumen conocido, tamaño del genoma y etapa del ciclo celular.

Mapeo de la densidad absoluta de ADN en núcleos celulares mediante microscopía de localización de una sola molécula

Este protocolo demuestra la realización de un ensayo de una sola molécula para la visualización en vivo del desenrollado del ADN por helicasa CMG. Describe (1) la preparación de un sustrato de ADN, (2) la purificación de la helicasa CMG de Drosophila melanogaster marcada con fluorescencia, (3) la preparación de una celda de flujo microfluídica para la microscopía de fluorescencia de reflexión interna total (TIRF) y (4) el ensayo de desenrollado de ADN de una sola molécula.

Visualización en tiempo real de una sola molécula del desenrollado del ADN mediante CMG Helicase

Este protocolo describe el procedimiento para realizar la microscopía de localización profunda de molécula única (SMLM) de célula entera utilizando un microscopio confocal de disco giratorio con reasignación óptica de fotones, permitiendo así la obtención de imágenes DNA-PAINT sin necesidad de óptica personalizada ni iluminación compleja.

Imagen de superresolución de célula completa mediante DNA-PAINT en un disco confocal giratorio con reasignación óptica de fotones

"ADN electrónico" sensores, reagentless, biosensores electroquímicos que funcionan bien, incluso cuando son desafiados directamente en la sangre y otras matrices complejas, se han adaptado a la detección de una amplia gama de ácidos nucleicos, proteínas y los analitos de moléculas pequeñas. Aquí se presenta un procedimiento general para la fabricación y el uso de este tipo de sensores.

Fabricación de ADN electroquímico biosensores para la detección Reagentless de ácidos nucleicos, proteínas y moléculas pequeñas

Aprende a realizar imagen espectroscópica de superresolución de moléculas de ADN sin marcadores fluorescentes. Este método preserva las propiedades moleculares nativas y evita artefactos del etiquetado.

Imagen espectroscópica de superresolución de moléculas de ADN usando contraste intrínseco

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