Name: Ensayo reproducible de migración de glioblastoma 3D con localización esferoide mediada por nanopartículas magnéticas bajo condiciones hipóxicas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-12T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Aprende un ensayo 3D reproducible para estudiar la migración de glioblastoma usando esferoides derivados de pacientes y nanopartículas magnéticas bajo hipoxia. Este método permite comparar el potencial invasivo entre tumores recién diagnosticados y recurrentes.

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<ol><li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+at+the+crossroads%3A+Current+understanding+and+future+therapeutic+horizons%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma at the crossroads: Current understanding and future therapeutic horizons.</a> Signal Transduct Target Ther. 10 (1), 213(2025).</li>
<li>Spitzer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+longitudinal+trajectories+of+glioblastoma+ecosystems+by+integrative+single-cell+genomics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Deciphering the longitudinal trajectories of glioblastoma ecosystems by integrative single-cell genomics.</a> Nat Genet. 57 (5), 1168-1178 (2025).</li>
<li>Dirkse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-associated+heterogeneity+in+glioblastoma+results+from+intrinsic+tumor+plasticity+shaped+by+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Stem cell-associated heterogeneity in glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment.</a> Nat Commun. 10 (1), 1787(2019).</li>
<li>Dejaegher, J., De Vleeschouwer, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDejaegher%2C+J+%22Glioblastoma%22">Glioblastoma</a>. De Vleeschouwer, S. , Brisbane (AU). (2017).</li>
<li>Restall, I., Bozek, D. A., Chesnelong, C., Weiss, S., Luchman, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-cell+imaging+assays+to+study+glioblastoma+brain+tumor+stem+cell+migration+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live-cell imaging assays to study glioblastoma brain tumor stem cell migration and invasion.</a> J Vis Exp. (138), e58152(2018).</li>
<li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+glioblastoma+cell+culture+resource%3A+Validated+cell+models+representing+all+molecular+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22EBioMedicine%22%5BJournal%5D)">The human glioblastoma cell culture resource: Validated cell models representing all molecular subtypes.</a> EBioMedicine. 2 (10), 1351-1363 (2015).</li>
<li>Paolillo, M., Comincini, S., Schinelli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+glioblastoma+models%3A+A+journey+into+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">In vitro glioblastoma models: A journey into the third dimension.</a> Cancers (Basel). 13 (10), 2449(2021).</li>
<li>Aye, K. T. N., Ferreira, J. N., Chaweewannakorn, C., Souza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+application+of+iron+oxide+nanoparticles+%28ions+and+spions%29+in+three-dimensional+cell+culture+systems%5BTitle%5D)+AND+%22SLAS+Technol%22%5BJournal%5D)">Advances in the application of iron oxide nanoparticles (ions and spions) in three-dimensional cell culture systems.</a> SLAS Technol. 29 (3), 100132(2024).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+uniform+spheroid+formation+in+384-well+plates%3A+The+effect+of+medium+evaporation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of uniform spheroid formation in 384-well plates: The effect of medium evaporation.</a> J Biomol Screen. 21 (9), 923-930 (2016).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaporation-reducing+culture+condition+increases+the+reproducibility+of+multicellular+spheroid+formation+in+microtiter+plates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Evaporation-reducing culture condition increases the reproducibility of multicellular spheroid formation in microtiter plates.</a> J Vis Exp. (121), e55403(2017).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Zanoni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3d+tumor+spheroid+models+for+in+vitro+therapeutic+screening%3A+A+systematic+approach+to+enhance+the+biological+relevance+of+data+obtained%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">3d tumor spheroid models for in vitro therapeutic screening: A systematic approach to enhance the biological relevance of data obtained.</a> Sci Rep. 6, 19103(2016).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Arganda-Carreras, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trainable+weka+segmentation%3A+A+machine+learning+tool+for+microscopy+pixel+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Trainable weka segmentation: A machine learning tool for microscopy pixel classification.</a> Bioinformatics. 33 (15), 2424-2426 (2017).</li>
<li>Sayde, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+3d+culture+of+multicellular+tumor+spheroids+in+supramolecular+hydrogel+from+cancer+stem+cells+sorted+by+sedimentation+field-flow+fractionation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Reproducible 3d culture of multicellular tumor spheroids in supramolecular hydrogel from cancer stem cells sorted by sedimentation field-flow fractionation.</a> J Chromatogr A. 1736, 465393(2024).</li>
<li>Lee, S., Lim, J., Kwak, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+of+bias+in+spheroid-based+drug+screening%3A+Fabrication+method%2C+spheroid+size%2C+and+cell+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Factors of bias in spheroid-based drug screening: Fabrication method, spheroid size, and cell viability.</a> Biomed Pharmacother. 192, 118597(2025).</li>
<li>Aisenbrey, E. A., Murphy, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+alternatives+to+matrigel%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Synthetic alternatives to matrigel.</a> Nat Rev Mater. 5 (7), 539-551 (2020).</li>
<li>Barbugian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioresponsive+hyaluronic+acid-based+hydrogel+inhibits+matrix+metalloproteinase-2+in+glioblastoma+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">Bioresponsive hyaluronic acid-based hydrogel inhibits matrix metalloproteinase-2 in glioblastoma microenvironment.</a> ChemMedChem. 20 (15), e202401040(2025).</li>
<li>Carvalho, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+high-molecular-weight+hyaluronic+acid+hydrogels+support+rapid+glioblastoma+cell+invasion+with+leader-follower+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic high-molecular-weight hyaluronic acid hydrogels support rapid glioblastoma cell invasion with leader-follower dynamics.</a> Adv Mater. 36 (50), e2404885(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>KIT DE BIOIMPRESIÓN DE 96 POCOS, TRANSPARENTE</td><td>Greiner</td><td>655840</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Invitrogen</td><td>00-4555-56</td><td>N/D</td></tr><tr><td>Suplemento B-27 (50X), suero y p-sáfia; libre sin vitamina A</td><td>Gibco</td><td>12587010</td><td>10%</td></tr><tr><td>Factor básico de crecimiento de fibroblastos, humano y p.mb.; (bFGF)</td><td>PeproTech</td><td>100-18B</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>Celldiscoverer&nbsp; 7</td><td>Zeiss</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Microplacas esferoides de Corning</td><td>Corning</td><td>CLS4515</td><td></td></tr><tr><td>Matriz de Matrigel de Corning</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>Dilución final 1:100</td></tr><tr><td>Contador Automatizado de Células Countess</td><td>Invitrogen</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-F12&nbsp; (500ml)</td><td>Thermofischer</td><td>11320-074</td><td>N/D</td></tr><tr><td>Factor de Crecimiento Epidérmico Humano (EGF)</td><td>PeproTech</td><td>AF-100-15</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>FITC Ratón Anti-Humano CD44</td><td>BD Pharmingen</td><td>555478</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Microplacas de cultivo celular de poliestireno de 96 pozos Greiner CELLSTAR con fondo en F/pozo de chimenea, y micro; Transparente, negro, TC, estéril, con tapa</td><td>Greiner</td><td>655090</td><td></td></tr><tr><td>Heparina</td><td>Thermofischer</td><td>A16198</td><td>5&micro; g/ml</td></tr><tr><td>Hoechst 33258</td><td>&nbsp; Sigma Aldrich (Merck)</td><td>861405</td><td>1&micro; g/ml</td></tr><tr><td>NanoShuttle-PL</td><td>Greiner</td><td>657841</td><td>1.5&nbsp; & micro; 1/10.000 celdas</td></tr><tr><td>Penicilina - Estreptomicina</td><td>Merck</td><td>P4333</td><td>1%</td></tr></tbody></table>

ensayo reproducible de migración de glioblastoma 3d con localización esferoide mediada por nanopartículas magnéticas bajo condiciones hipóxicas

Reproducible 3D Glioblastoma Migration Assay with Magnetic Nanoparticle Mediated Spheroid Localization Under Hypoxic Conditions

Ensayo reproducible de migración de glioblastoma 3D con localización esferoide mediada por nanopartículas magnéticas bajo condiciones hipóxicas

We describe a reproducible 3D migration assay to model the migratory and invasive potential of patient-derived glioblastoma gliomaspheres from newly ...

reproducible-3d-glioblastoma-migration-assay-with-magnetic

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

Fuente: Guyon, J., et al. Un modelo esferoide 3D para el glioblastoma. J. Vis. Exp. (2020)El video muestra la generación de un modelo esferoide tridimensional de la invasión de células tumorales. Los esferoides se forman a partir de células tumorales cerebrales humanas y se incrustan en una matriz de colágeno. Las células tumorales en la periferia esferoide adoptan un fenotipo invasivo, secretando proteasas para degradar el colágeno y avanzando para invadir la matriz circundante.

Generación de un modelo esferoide tridimensional de invasión de células tumorales

Fuente: Pericoli, G. et. al., Ensayos de inmunocitoquímica de células 3D vivas del glioma difuso de línea media pediátrico. J. Vis. Exp. (2021)Este video muestra imágenes de células vivas para observar la migración de células del glioma difuso de línea media pediátrico mediante el marcaje inmunohistoquímico con anticuerpos anti-CD44.

Imágenes basadas en inmunocitoquímica para visualizar la migración de células del glioma infantil

La invasión de los tejidos normales circundantes es una característica definitoria de los tumores malignos. Proporcionamos aquí un ensayo de microplaca simple y semiautomatizado de invasión en una biomatriz 3D natural que se ha ejemplificado con una serie de modelos de cánceres humanos avanzados.

Tumor Ensayo tridimensional (3D) esferoide Invasion

Aquí, se describe un método para la preparación de la cultura de co de 3 dimensiones (3D) esferoide de células de cáncer de páncreas y fibroblastos, seguidos por la medida de las funciones metabólicas utilizando un analizador de flujo extracelular.

Preparación y análisis metabólico de 3 dimensiones del esferoide co-cultivos de células de cáncer de páncreas y fibroblastos

Aquí, describimos la técnicas de imagen de células vivas para medir cuantitativamente la migración y la invasión de células de glioblastoma cerebral tumor con el tiempo y las condiciones de tratamiento múltiples.

Análisis de imágenes de células vivas para estudio Glioblastoma cerebral Tumor células madre migración y la invasión

Los efectos de los inhibidores migratorios en la migración de células cancerosas de glioma en ensayos de invasión tridimensionales (3D) utilizando un inhibidor de la histona deacetilasa (HDAC) se caracterizan por una microscopía confocal de alta resolución.

Caracterización de los efectos de los inhibidores migratorios en la invasión de esferoides de tumores 3D por microscopía confocal de alta resolución

La microdisección láser (LMD) es una técnica sensible y altamente reproducible que se puede utilizar para descubrir vías que median la heterogeneidad e invasión del glioma. Aquí, describimos un protocolo optimizado para aislar áreas discretas del tejido glioma usando LMD láser seguido de análisis transcriptomático.

Microdisección de captura láser de las subregiones de Glioma para la caracterización espacial y molecular de la heterogeneidad intratumoral, los oncostreams y la invasión

Aquí, describimos un ensayo de invasión fácil de usar para el glioblastoma. Este ensayo es adecuado para células similares al glioblastoma similares a un tallo. También se describe una macro de Fiji para cuantificar fácilmente la invasión, la migración y la proliferación.

Un modelo de esferoides 3D para Glioblastoma

Aquí, presentamos un ensayo de co-cultivo fácil de usar para analizar la migración de glioblastoma (GBM) en neuronas modeladas. Desarrollamos una macro en el software FiJi para una fácil cuantificación de la migración de células GBM en las neuronas, y observamos que las neuronas modifican la capacidad invasiva de las células GBM.

Co-cultivo De Glioblastoma Células Madre-como En Las Neuronas Modeladas Para Estudiar La Migración Y Las Interacciones Celulares

Aquí, establecemos una plataforma de perfiles metabólicos que integra esferoides de glioma tridimensionales (3D) y normalización basada en imágenes a través del análisis de flujo extracelular. Este enfoque permite una evaluación más precisa de las respuestas metabólicas de los tumores a los tratamientos farmacológicos y proporciona información sobre los posibles mecanismos de resistencia.

Avances en el perfil metabólico de esferoides tumorales cerebrales tridimensionales para la detección de fármacos

Aprende un ensayo 3D reproducible para estudiar la migración de glioblastoma usando esferoides derivados de pacientes y nanopartículas magnéticas bajo hipoxia. Este método permite comparar el potencial invasivo entre tumores recién diagnosticados y recurrentes.

Ensayo reproducible de migración de glioblastoma 3D con localización esferoide mediada por nanopartículas magnéticas bajo condiciones hipóxicas (Video) | JoVE Journal

Ensayo reproducible de migración de glioblastoma 3D con localización esferoide mediada por nanopartículas magnéticas bajo condiciones hipóxicas

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