Régimen de ejercicio estructurado en hipertensión pulmonar - insuficiencia ventricular derecha en un modelo ovino

Estamos estudiando los efectos del ejercicio en la fisiopatología de la hipertensión pulmonar y la insuficiencia ventricular derecha en un modelo ovino. Los efectos del ejercicio en la insuficiencia ventricular derecha de hipertensión pulmonar están poco caracterizados debido a la tolerancia limitada y al riesgo de descompensación cardiopulmonar. Sin embargo, este protocolo permite una evaluación controlada.

Para empezar, recoge los reactivos necesarios y prepara el espacio de trabajo para el experimento. Toma tres lavados normales de suero fisiológico. Quita un mililitro de cada uno.

Y añade un mililitro de solución de heparina que contenga 1.000 unidades a cada jeringuilla. Prepara dos jeringuillas de 10 mililitros, una para residuos y otra para la recogida de sangre, y cinco jeringuillas de un mililitro para la recogida de gases en sangre. Con una jeringuilla de cinco mililitros, extrae cinco mililitros de solución de heparina que contenga 5.000 unidades de heparina para bloquear la línea ventricular o recreativa derecha.

Reconstituir dos miligramos de alteplasa con 2,2 mililitros de agua estéril para su uso si es necesario. Consigue una jeringuilla de un mililitro y una de cinco mililitros y llena ambas con suero fisiofisiológico usando una aguja calibre 20 a 22. Obtén un transductor de presión y conecta el extremo hembra del señuelo de presión con el extremo macho del señuelo.

Confirma que el extremo inferior del señuelo del transductor está tapado. Conecta el tubo a una llave de registro de tres vías y coloca una aguja Huber calibre 22. Enjuaga la línea con solución salina hipertónica hasta que el líquido salga de la aguja.

Luego ajusta la llave para que se bloquee hacia la aguja y alejándose de la tapa azul para cerrar el acceso al puño. Retira dos mililitros de solución salina normal de una bolsa de un litro y retitúyelos por dos mililitros de solución de heparina que contienen 2.000 unidades de heparina. Coloca la bolsa de suero fisiológico dentro de una bolsa de presión y luego insértala en una bolsa de acceso usando un pico intravenoso.

Cuelga la bolsa de presión aproximadamente a dos metros del suelo. Y gira la llave de paso de tres vías en la bolsa de presión para que el mango quede perpendicular al tubo. Infla la bolsa con la bomba manual hasta que el indicador de presión se ponga verde a aproximadamente 250 milímetros de mercurio.

Gira la llave de tres vías hacia la bolsa para mantener la presión. Conecta el extremo macho de la línea intravenosa con el extremo hembra del transductor. A continuación, conecta el extremo hembra del cebo del tubo de presión con el extremo macho del transductor.

Y luego acopla el extremo macho del tubo al extremo hembra del cebo del grifo de registro. Después de colocar una aguja Huber calibre 22 en el extremo macho de la llave de paso de tres vías, abre la bolsa de heparina y enjuaga la vía intravenosa hasta que la solución fisiológica heparinizada salga de la aguja hooper. Gira la llave de registro de tres vías hacia la aguja Huber para bloquearla.

Utiliza un modelo de oveja para insuficiencia pulmonar de hipertensión y RV, instrumentado con un manguito de PA y un puerto de presión para RV. Tras una semana de recuperación postoperatoria, transporta las ovejas aclimatadas en cinta a la sala de ejercicio para su prueba. Coloca un cabestro en la oveja y úsalo para guiar al animal hasta la cinta, colocándola cerca del frente con sus cuatro patas apoyadas en una pequeña jaula.

Palpa los puertos y limpia la piel con toallitas con alcohol. Usa una aguja Huber para acceder al puerto de megafonía. Después de abrir la página principal de la hoja de laboratorio, selecciona Nuevo, haz clic en configurar, selecciona dispositivos y canales.

Configura el número de canales a cuatro y renombra el canal uno al cuatro como presión del manguito PA, presión RV, presión sistólica RV y frecuencia cardíaca. Selecciona las medidas cíclicas. Ve a la fuente y selecciona el canal dos de presión de la autocaravana, medición al máximo y haz clic en OK. Repite el proceso para la frecuencia cardíaca del canal cuatro, pero cambia la medición por la frecuencia.

Para los canales uno y dos, confirma que no se selecciona ningún cálculo. Asegúrate de la orientación correcta del acceso, con el puerto PA más cerca de la cabeza y el puerto del RV más cerca de la cola. Coloca los transductores entre la oveja y el ordenador a la altura del corazón y conecta ambos transductores de presión al cable de interfaz.

Una vez que los transductores estén calibrados y ceros, haz clic start para comenzar a registrar las formas de onda de presión del manguito de RV y PA a 400 hercios. Gira la llave de registro hacia arriba para transducir la forma de onda de presión del manguito PA. Luego cierra la llave de paso hacia la oveja para cerrar la forma de onda.

Coloca un flush de heparina en la llave de paso de tres vías para la línea de autocaravana y enjuaga toda la línea hacia el puerto de la autocaravana. Tira suavemente de la jeringuilla hasta que vuelva la sangre oscura. Abre la llave de paso hacia el transductor.

Primero, usa una jeringuilla vacía de 10 mililitros para extraer 10 mililitros de sangre de la autocaravana. Luego se utiliza una jeringuilla de un mililitro para extraer entre 0,2 y 0,4 mililitros de sangre para la autocaravana como muestra. Gira el tope hacia arriba.

Tira de la pestaña azul del transductor de presión de la autocaravana para abrir la válvula y sigue limpiando hasta que la línea esté libre de sangre. Comienza la velocidad del primer ejercicio ajustando el mando de la cinta a 30, correspondiente a 0,46 metros por segundo y mantenla durante 10 minutos. Abrir periódicamente la línea del manguito del AP durante el intervalo de 10 minutos para transducir la presión del manguito PA.

Cerca del final del intervalo de 10 minutos, obtén una gasometría como se ha demostrado anteriormente. Repite el muestreo de sangre, el enjuaguamiento de la línea y los pasos de ejercicio en los ajustes de la cinta 40, 50, 30 y cero. Utiliza un mililitro de suero fisiofisiológico para inflar el manguito a 150 a 200 milímetros de mercurio.

Reduce la presión del vehículo recreativo durante unos minutos después de inflar para asegurar la tolerancia. La saturación de oxígeno venoso mixto se mantuvo relativamente estable a la velocidad máxima de la cinta de correr desde la primera hasta la octava semana. La presión sistólica del radar subió de la primera a la ocho.

La distancia recorrida durante el ejercicio aumentó de la semana uno a la octava a pesar de que la presión del manguito de la PA aumentó a aproximadamente 777 milímetros de mercurio en la semana ocho. A las velocidades seleccionadas de la cinta, la saturación de oxígeno venoso mixto disminuyó y la presión sistólica del VD aumentó a medida que aumentaba la velocidad del ejercicio. Este protocolo nos permite medir valores hemodinámicos en tiempo real mientras hacemos ejercicio.

Un desafío clave en este protocolo es mantener el acceso o el ejercicio de puertos. En particular, mantener la presión del manguito de la PA. Un parámetro que esperamos medir con más detalle en el futuro es el consumo de oxígeno durante el ejercicio y la recuperación.