Contraste dynamique amélioré imagerie par résonance magnétique d'un modèle orthotopique cancer du pancréas de souris

Résumé

L’objectif de ce protocole est d’appliquer l’imagerie par résonance magnétique améliorée par contraste dynamique (DCE-MRI) pour les xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques chez la souris. DCE-MRI est une méthode non invasive pour analyser la microvascularisation dans un tissu cible, et utile pour évaluer la réponse vasculaire dans une tumeur après une nouvelle thérapie.

Résumé

L’imagerie par résonance magnétique améliorée par contraste dynamique (DCE-MRI) a été utilisée de manière limitée pour les xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques en raison d’artefacts de mouvements respiratoires sévères dans la région abdominale. Les modèles de tumeurs orthotopiques offrent des avantages par rapport aux modèles sous-cutanés, car ils peuvent refléter le microenvironnement tumoral primaire affectant l’approvisionnement en sang, la néovascularisation et l’invasion des cellules tumorales. Nous avons récemment établi un protocole d’IRM-DCE de xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques dans des modèles murins en sécurisant les tumeurs avec une planche en plastique pliée orthogonalement pour empêcher le transfert de mouvement de la région thoracique pendant l’imagerie. La pression exercée par cette planche a été localisée sur la région abdominale et n’a pas entraîné de difficulté respiratoire chez les animaux. Cet article démontre la procédure détaillée de modélisation orthotopique de la tumeur pancréatique à l’aide de petits animaux et de l’IRM-DCE-des xénogreffes tumorales. La méthode de quantification des paramètres pharmacocinétiques dans l’IRM-DCE est également introduite. La procédure décrite dans cet article aidera les chercheurs à appliquer l’IRM-DCE à des modèles murins de cancer gastro-intestinal orthotopique.

Introduction

L'objectif global de cette méthode consiste à appliquer un contraste amélioré imagerie par résonance magnétique dynamique (DCE-MRI) pour des xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques chez la souris. DCE-MRI est une méthode non invasive pour évaluer microvascularisation dans un tissu cible en contrôlant la variation de contraste MR sur une certaine période de temps après l'injection. DCE-MRI a été utilisée pour diagnostiquer des tumeurs malignes et pour évaluer la réponse de la tumeur à divers traitements ^4.1. Quantitative DCE-MRI a présenté une reproductibilité élevée ^5. Pour quantifier les paramètres pharmacocinétiques d'un....

Protocole

Toutes les procédures ont été approuvées par le soin et l'utilisation des animaux Commission institutionnelle à l'Université d'Alabama à Birmingham.

Modélisation 1. Orthotopique pancréatique tumeurs Souris

1. Culture des lignées cellulaires cancéreuses humaines pancréatiques-standard dans du milieu de Eagle modifié par Dulbecco (DMEM) supplémenté avec du sérum bovin fœtal à 10%. Maintenir toutes les cultures à 37 ° C dans une atmosphère humidifiée avec 5% de CO _2.
2. Utilisez 8-10 souris femelles graves semaine-vieux combinés immunodéficients. Placez les cages des animaux à 12 heures de lumière et le ....

Résultats

Des cellules tumorales pancréatiques humaines se développer avec succès dans le pancréas de souris créant une tumeur solide. La figure 1 représente des photographies de (A) un des pancréas normal où la solution de cellules tumorales est injecté, et (B) une souris représentant portant une xénogreffe de tumeur du pancréas orthotopique (MIA PACA-2 ). Tumeur est située dans le quadrant supérieur gauche de l'abdomen, à côté de la rate. Il prend habituellement 2-4 semaines pour que les tumeurs de croître .......

Discussion

Nous avons introduit les méthodes détaillées de la modélisation de tumeur pancréatique orthotopique utilisant des souris immunodéficientes, DCE-MRI des tumeurs abdominales chez la souris, et la quantification de ses paramètres cinétiques. Dans la modélisation de tumeur pancréatique orthotopique, il faut prendre soin lors de l'insertion d'une aiguille dans la queue du pancréas. En cas de succès, les cellules seront transférées à la tête du pancréas créer une petite bulle. Lors de l'application d'une carte.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
DMEM	Invitrogen	11965-118
Sérum fœtal bovin	Harlan Laboratories	BT-9501
Betadine	Purdue products	67618-153-01
5-0 Sutures Prolene	Ethicon	8720H
9.4T MR scanner	Bruker Biospin Corporation	BioSpec 94/20 USR
Gadoteridol	Bracco Diagnostics Inc	NDC 0270-1111-03
Tube micro-polyéthylène	Strategic Applications, Inc	#PE-10-25
Aiguille à pointe émoussée 30 G	Strategic Applications, Inc	89134-194
Système de surveillance et de contrôle	SA instruments, Inc	Modèle 1030	Il s’agit d’un système compatible MR pour mesurer l’indice de résistance et la température corporelle des petits animaux en même temps.
Pompe à seringue	New Era Pump Systems, Inc.	NE-1600