Waiting
Traitement de la connexion…

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Technieken van Sleeve Gastrectomie en Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Muizen

Published: March 20, 2017 doi: 10.3791/54905
* These authors contributed equally

Abstract

Obesitas is een groot probleem voor de volksgezondheid, met een prevalentie van 4-28% voor mannen en 6,2-36,5% voor vrouwen in Europa (2003-2008). Morbide obesitas wordt vaak geassocieerd met metabolische complicaties, zoals type 2 diabetes, hypertensie en dyslipidemie, verminderen levensverwachting en kwaliteit. Aangezien een effectieve noninvasive behandelingen bariatrische chirurgie is een waardevolle therapeutische optie voor patiënten met morbide obesitas (body mass index (BMI)> 40 kg / m 2), wat leidt tot langdurige, aanhoudende gewichtsverlies en verbeteringen in metabolische complicaties . De onderliggende cellulaire en moleculaire mechanismen behoud van de gunstige effecten van bariatrische chirurgie nog niet volledig begrepen. Vanwege de vele genetisch gemodificeerde stammen beschikbaar, het muizenmodel het meest geschikt diermodel om de moleculaire mechanismen te onderzoeken achter de pleiotrope gunstige effecten van bariatrische chirurgie. Hier, gedetailleerde we de geoptimaliseerde healthczijn methoden en chirurgische protocollen bij muizen voor de twee meest gebruikte bariatrische chirurgie: de hoes gastrectomie en de gewijzigde Roux-en-Y gastric bypass. Het ontcijferen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de therapeutische effecten van bariatrische chirurgie biedt de belofte van het identificeren van nieuwe therapeutische targets.

Introduction

De wereldwijde pandemie van obesitas en diabetes is verwoestende in ernst. Meer dan twee miljard volwassenen wereldwijd (30% van de bevolking) zijn overgewicht (BMI> 25 kg / m 2) of obesitas (BMI> 30 kg / m 2) 1. Dit kan komen samen met metabolische complicaties, zoals type 2 diabetes, hypertensie en dyslipidemie, wat leidt tot verhoogde morbiditeit en mortaliteit. Obesitas verhoogt de totale mortaliteit en het voorkomen van kanker 2. Vanwege het ontbreken van een effectieve niet-invasieve behandelingen bariatrische chirurgie is de enige optie die kan leiden tot lange-termijn aanhoudende gewichtsverlies 3, 4. Een aantal verschillende chirurgische werkwijzen ontwikkeld, maar de huls gastrectomie (SG) en Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) zijn de twee meest gebruikte procedures in de klinische praktijk. Tijdens de procedure SG, 80% van het oorspronkelijke volume van de maagverwijderd; dus deze techniek is één van de beperkende operaties die verzadiging bevordert. De RYGB is een van de beperkende-malabsorptive technieken. Tijdens RYGB wordt een kleine maagzakje (1-2% van de totale maagvolume) gemaakt en de darm wordt herschikt in een Y-vorm, die de spijsvertering en de opname van voedingsstoffen vertraagt. Deze twee technieken leiden tot significante verminderingen lichaamsgewicht en algemene verbeteringen in veelgebruikte geassocieerde comorbiditeiten (bijvoorbeeld hypertensie, type 2 diabetes, dyslipidemie en) 3, met een hogere efficiëntie gezien RYGB. De moleculaire mechanismen achter de pleiotrope gunstige effecten van de bariatrische operaties vaak niet volledig opgehelderd. Vanwege de vele genetisch gemodificeerde stammen beschikbaar, een muismodel het meest geschikt diermodel om de moleculaire mechanismen te onderzoeken.

Echter, bariatrische procedures zijn moeilijk om direct aan te passen aan kleine diermodellen en require hoge chirurgische handigheid. Terwijl SG gemakkelijk in knaagdieren kan worden uitgevoerd met een zeer goede overlevingskans, RYGB dodelijk bij muizen als gevolg van ernstige Darmobstructie 5. Verschillende gemodificeerde RYGB technieken zijn voorgesteld om dit probleem met name de oesojejunostomy 5 tegengaan. Hier presenteren we een ander alternatief: de gastrojejunostomie zonder maag uitsnijding. Deze gewijzigde RYGB reproduceert het grootste deel van de gunstige effecten waargenomen bij de mens (dwz een aanzienlijke hoeveelheid gewichtsreductie en een verbetering van glucose en lipiden homeostase).

Dit manuscript wil vatten en bespreken de technische en experimentele gegevens van SG en RYGB in muizen en deze procedures met behulp van video vergemakkelijken. Een bijzondere highlight wordt gemaakt met betrekking tot het optimaliseren van de pre- en postoperatieve zorg protocollen die de reductie van vitamine en ijzerdeficiënties mogelijk.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Dier en huisvesting: Verkrijg 8 weken oude C57BL / 6 mannelijke muizen. Op 10 weken oud, geven de C57BL / 6 muizen vrije toegang tot water en een vetrijk dieet (DIO dieet: 35% kcal uit vet, 25,8% caseïne, 1,30% minerale AIN, 1,30% vitaminen, 1,70% dicalciumfosfaat, 0,7 % calciumcarbonaat, 2,10% citraat kalium, 0,026% choline bitartraat, 8,9% sucrose, 0,384% cystine, 6,5% cellulose, 31,7% reuzel, 3,3% sojaolie, en 16,29% maltodextrine) voor 8 (SG) of 14 (RYGB) weken voor de obese operaties. Om gewichtstoename te bevorderen, geven de muizen gewijd aan de RYGB operatie (sham & RYGB) water dat 20% fructose (w / v) naast het vetrijke dieet.

Ethiek Verklaring: Alle protocol hieronder beschreven stappen volgen de richtlijnen van de ethische commissie voor Dierproeven van de Pays de la Loire onder het goedkeuringsnummer 01.953,01.

1. Algemeen Preoperatieve Voorbereiding

  1. Snel de muizen gedurende 6 uur voor de operatie. gel diet voedsel werd gegeven 3 dagen voor de operatie en uitsluitend een dag voor de operatie. Induceren anesthesie in een kamer met 5% isofluraan (0,4 l / min) en O2 (dizuurstof, 0,4 l / min). Voer een teen-snuifje test om te bevestigen dat de verdoving effectief is. Dien analgetica (0,1 mg / kg buprenorfine), antibiotica (10 mg / kg marbofloxacine), en pro-kinetiek (1 mg / kg metoclopramide) via subcutane injectie.
  2. Wijs een specifieke werkgebied voor chirurgische procedures (ver van het laboratorium verkeer en ventilatoren). Maak de chirurgische gebied met gewijd hard oppervlak ontsmettingsmiddelen. Plaats een verwarming pad op de werkruimte gebied muis homeothermie te houden tijdens de operatie. Breng een schone, absorberende onderlegger boven de verwarming pad.
  3. Scheer de buik van borstbeen tot het bekken met behulp van een elektrisch scheerapparaat. Wikkel de muis buik in gesteriliseerde plastic wrap (figuren 1A en 2A) en plaats de muis in rugligging op de verwarming padvertentie.
  4. Toepassen dierenarts zalf op de ogen te voorkomen droogheid terwijl onder verdoving. Plaats de muis in de neuskegel en anesthesie met 2% isofluraan (0,4 l / min) en O2 (0.4 L / min) te handhaven.
  5. Voor het begin van de operatie, op een steriel onderzoek toga, een wegwerp scrubs cap, een gezichtsmasker en steriele handschoenen. Open een autoclaaf gesteriliseerd pakket met een chirurgisch instrument set, die is vereist voor alle stappen van de operatie. Snij een venster in de gesteriliseerde plasticfolie en desinfecteren van de huid met 2 opeenvolgende povidonjood oplossingen.

2. Mouw Gastrectomie: Chirurgische Procedure

  1. Mediane laparotomie (Figuur 1B)
    1. Onder een binoculaire microscoop en met een scalpel, uitvoeren van een middellijn incisie van het borstbeen tot het midden van de buik naar de buikholte (niet de buikspieren niet beschadigen) openen. Bescherm de huid met een steriele kompres gedrenkt met 37 ° C zoutoplossing.
  2. Blootstelling maag (figuur 1C)
    1. Voorzichtig mobiliseren de maag met behulp van vochtige-wattenstaafjes. Bevrijd de maag van de laterale dicht bindweefsel bijlagen met behulp van bevochtigde wattenstaafjes of micro schaar.
    2. Voorzichtig, externaliseren de maag volledig en plaats een hemostatische collageen comprimeren achter de maag. Hechtdraad de pylorus en slokdarm schepen langs de grote curvatuur maag met 8,0 niet absorbeerbare hechtingen toekomst te voorkomen bloeding (figuur 1D en E). Opmerking: Hemostat gebruik kan weefselschade veroorzaken, zorg ervoor om alleen te gebruiken op weefsel dat doel te worden weggesneden.
  3. Resectie van de cardiale regio maag (fundus)
    1. Voer een gastrotomie op de anatomische lijn aanwezig is tussen de pyloric regio (corpus) en de cardiale regio maag (fundus) (Figuur 1F).
    2. Resten eten met 2 bevochtigde wattenstaafjes naar elkaar toezijde van de maag. Met behulp van micro schaar, knip de maag langs de grens tussen de fundus en het corpus van de maag (figuur 1G).
    3. Druk op een hemostatische collageen comprimeren gedurende 2 minuten in het geval van grote bloeden. Sluit de maag opening 8,0 niet absorbeerbare hechtdraden uit de gastro-oesofageale overgang naar het einde van de insnijding (Figuur 1H).
  4. Resectie van de pyloric regio maag (corpus)
    1. Voltooi de maag resectie langs de grote curvatuur teneinde ongeveer 80% van de maag (figuur 1 I) te verwijderen. Standaardiseren van de breedte van de SG 3 mm. Druk op een hemostatische collageen comprimeren gedurende 2 minuten in het geval van grote bloeden.
    2. Sluit de opening van de pylorus regio van de maag met 8,0 niet absorbeerbare hechtdraad (figuur 1J). Schud 2 bevochtigde wattenstaafjes aan elke zijde van de maag zodat de hechtdraad is lekvrij.
    3. Compleet met 8,0 niet absorbeerbare hechtdraden bij lekkage. Verwijder de hemostatische collageen kompressen en terugkeer van de maag naar de buikholte. Laat een hemostatische collageen comprimeren tegen de hechtdraad.
  5. abdominale sluiting
    1. Sluit de spierlaag van de buikwand met 5,0 niet absorbeerbare hechtingen (figuur 1K). Verminder anesthesie doordat het isofluraan concentratie tot 1%. Sluit de huid met behulp van 5,0 niet resorbeerbare hechtingen (Figuur 1L).

3. Roux-en-Y Gastric Bypass: Chirurgische Procedure

  1. mediaan laparotomie
    1. Onder een binoculaire microscoop en met een scalpel, uitvoeren van een middellijn incisie van het borstbeen tot het midden van de buik naar de buikholte (niet de buikspieren niet beschadigen) openen. Bescherm de huid met een steriele kompres gedrenkt met 37 ° C zoutoplossing (Figuur 2B).
    </ Li>
  2. Biliopancreatic ledemaat en voedings ledematen
    1. Externalize de darm (figuur 2C). Meet 8 cm van de pylorus en twee ligaturen uitvoeren van de darm met 5,0 niet absorbeerbare hechtingen (figuur 2D).
    2. Snijd de darm tussen de twee ligaturen (figuur 2E). Plaats de proximale onderdeel van de twee uiteinden in de linker kwadrant van de buik. Opmerking: Dit zal gebruikt worden als de voedings ledematen (figuur 2F).
    3. Plaats de distale onderdeel van de twee uiteinden tegenover de voedings ledematen 6 cm onder de proximale ledematen (figuur 2F).
      LET OP: Dit zal gebruikt worden als de gal ledemaat.
  3. Jejuno-jejunostomie
    1. Snijd zowel het proximale been en de darm lus met behulp van micro schaar en uitvoeren antimesenteric twee insnijdingen even lang (figuur 2G en 2H).
    2. Voer side-to-side anastomose met twee 8,0niet absorbeerbare hechtingen. Voer de dorsale zijde anastomose eerst (figuur 2I), gevolgd door de ventrale zijde anastomose (Figuur 2J).
    3. Schud 2 bevochtigde wattenstaafjes aan elke zijde van de anastomose zodat de hechtdraad is lekvrij. Compleet met 8,0 niet absorbeerbare hechtdraden bij lekkage.
  4. Gastro-jejunostomie
    1. Voorzichtig mobiliseren de maag met behulp van bevochtigde wattenstaafjes. Bevrijd de maag van de laterale dicht bindweefsel bijlagen met behulp van bevochtigde wattenstaafjes of micro schaar.
    2. Voorzichtig, externaliseren de maag volledig, het plaatsen van een re-absorbeerbare hemostatische collageen comprimeren achter de maag. Voer een ligatuur van de pylorus onder toepassing van een 5,0 niet absorbeerbare hechtdraad doorgegeven via de omentum via gebogen micro pincet (Figuur 2K en 2L).
    3. Snijd zowel de ventrale zijde van de maag, 1,5 cm van de pylorus en het distale ledematenmet behulp van micro schaar, creëren van twee insnijdingen even lang (Figuur 2M).
    4. Uitvoeren side-to-side anastomose met twee 8,0 niet absorbeerbare hechtingen. Begin met de dorsale zijde anastomose (figuur 2 N), en voer vervolgens de buikzijde anastomose (figuur 2O). Schud 2-bevochtigde wattenstaafjes aan elke zijde van de anastomose zodat de hechtdraad is lekvrij. Compleet met 8,0 niet absorbeerbare hechtdraden bij lekkage.
  5. abdominale sluiting
    1. Sluit de spierlaag van de buikwand met behulp van niet 5,0-absorbeerbare hechtdraden (Figuur 2P). Verminder de anesthesie doordat het isofluraan concentratie tot 1%. Sluit de huid met behulp van 5.0 niet absorbeerbare hechtingen (Figuur 2T) .Administer 25 ml / kg van warme zoutoplossing via subcutane injectie.

4. Algemene postoperatieve zorg

  1. stop met isofluraanen verder met een O 2 stroom van 0,8 l / min, totdat de muis volledig wakker. Laat de muis niet onbeheerd achter totdat het motorische controle, aangegeven door het dier te beginnen rond de kooi te bewegen en te kunnen staan ​​en lopen zonder te vallen herwint.
  2. Plaats de muis (slechts één muis per kooi) in een incubator onder 30 ° C temperatuuromstandigheden gedurende 5 dagen.
  3. De hoeveelheid ijzer (0,5 mg / kg / dag subcutane injectie) en vitamine (800 mg / 180 ml in water) aanvullingen in de RYGB muizen tot het einde van het protocol.
  4. Terug vrije toegang tot gel dieet (vetrijk dieet gel: 10% reuzel, 10% vloeibare suiker, 57% water) gedurende 5 dagen na de operatie. Opnieuw een stevig dieet 3 dagen na de operatie.
  5. Subcutaan injecteren buprenorfine (0,1 mg / kg, tweemaal daags, van dag 0 tot dag 3 na de operatie), meloxicam (1 mg / kg van dag 0 tot dag 3 na de operatie), metoclopramide (1 mg / kg van dag 0 tot dag 5 na operatie) en marbofloxacine (10 mg / kg van dag 0 tot dag 3 afte r chirurgie).

5. Postoperatieve metabole parameters Assessment

  1. Voedselinname meting
    1. Laat de muizen herstellen gedurende 1 week na de operatie. Het huis van de muizen één per kooi. Meet de hoeveelheid vast voedsel geplaatst in de kooi. Gewicht van de resterende eten 24 uur later. Herhaal deze stap zo lang als nodig.
  2. Orale glucose tolerantie test
    1. Snel de muizen gedurende 6 uur voor de mondelinge bolus. Oogst van een druppel bloed uit de staart tip en toe te passen op een glucose-strip ingevoegd in een glucometer om de tijd 0 bloedglucosewaarde te bepalen.
    2. Dien een orale bolus van 20% D-glucose-oplossing (2 g / kg). Meet de bloedglucosespiegel 15, 30, 60 en 120 minuten na gavage.
  3. Hemoglobinegehalte analyse
    1. Met behulp van een hematologie-systeem, meten 20 pi van vers bloed naar het hemoglobinegehalte proeven.
"> 6. Euthanasie

  1. Verdoven de muizen door intraperitoneale injectie van een xylazine / ketamine oplossing (10/80 mg / kg). Voer een cervicale dislocatie. Controleer de volledige euthanasie door ervoor te zorgen dat het hart niet klopt en de oogbol knipperreflex verloren.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Algemene voorwaarden

De gemiddelde operatieve tijd voor de SG procedure was 49,3 ± 1,5 min. Wij verwijderden 62,8 ± 5,0 mg maag, die ongeveer 80% procent van de maag voorstelt. Geen muizen stierven tijdens de operatie of gedurende de volgende zeven dagen. Een muis (7,1%) stierf op de 11e dag na de operatie als gevolg van een maag obstructie veroorzaakt door een bezoar.

De gemiddelde operatieve tijd voor de RYGB procedure was 89,1 ± 2,8 min. Het sterftecijfer was significant hoger na RYGB (sham: 25% versus RYGB: 66,6%; p = 0,038). De belangrijkste oorzaken van postoperatieve sterfgevallen anastomose lekken (n = 8), anastomotische stenose (n = 5), anaesthesie complicaties (n = 4), en postoperatieve bloeding (n = 2). We hebben ook waargenomen twee lange-termijn sterfgevallen als gevolg van gastro-intestinale anastomose stenose metchronische obstructie en ondervoeding. Zoals getoond in figuur 3, merkten wij een geleidelijke verbetering van de postoperatieve overleving gehele protocol, wat aangeeft dat chirurgische intensieve training nodig om de RYGB chirurgische techniek beheersen.

Lichaamsgewicht, voedselinname en glucose homeostase

De muizen hadden soortgelijke lichaamsgewicht voor de operatie. SG aangetoond aanzienlijk gewichtsverlies 14 dagen na de ingreep in vergelijking met placebo controle muizen (sham: -6,6% versus SG: -16,0%; p <0,01; figuur 4A). RYGB werd geassocieerd met significant gewichtsverlies van postoperatieve dagen 14 (sham: -7,9% op dag 14 na de operatie en -5,1% op dag 28 na de operatie versus RYGB: -22,9% op dag 14 na de operatie en -25,5% op dag 28 na de operatie; Figuur 4B). De dagelijkse inname van voedsel werd verminderd met 35% tijdens de 14-daagse peri od na de SG (Figuur 4C). In tegenstelling, hebben we niet zo'n anorexigenic effect tussen de sham en RYGB muizen (Figuur 4D) te observeren. Ook meldde een verbetering van de glucosetolerantie volgende SG en RYGB operaties (figuur 4E, 4F).

Gunstige effect van ijzersupplementen op RYGB geïnduceerde anemie

We hebben niet in acht nemen van een significante afname van hemoglobinemia 14 dagen na de operatie SG (gegevens niet getoond). Daarentegen werd ernstige anemie gemeten in-RYGB bediend muizen, maar het deed profiteren van specifieke ijzersupplementen (figuur 5A). Dagelijks ijzersupplementen was inderdaad cruciaal en voorkomen significante anemie 28 dagen na RYGB chirurgie (Figuur 5B).

/54905/54905fig1.jpg "/>
Figuur 1: Sleeve Gastrectomie Procedure. (A) preoperatieve voorbereiding. (B) Mediaan laparotomie. (C) Maag blootstelling. (D) pylorus vaartuig hechtdraad. (E) slokdarm vaartuig hechtdraad. (F) Initial gastrotomie. (G) resectie van de hartstreek van de maag. (H) Sluiting van de maag opening van de gastro-oesofageale overgang naar het einde van de incisie. (I) resectie van de pylorus regio van de maag. (J) Sluiting van de opening van het pyloric regio. (K) Sluiting van de spierlaag van de buikwand. (L) Sluiting van de huid. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.


Figuur 2: Roux-en-Y bypass procedure. (A) preoperatieve voorbereiding. (B) Mediaan laparotomie. (C) Externalisatie van de dunne darm. (D) Biliopancreatische en voedings ledematen ligaturen. (E) Kleine darm gedeelte tussen de ligatuur. (F) Intestinale ledemaat positionering voor de jejuno-jejunostomie. (G - H) Antimesenteric incisies van de proximale ledematen en de darm lus. (I) Dorsale side-to-side anastomose. (J) Ventraal side-to-side anastomose. (K - L) pylorus ligatuur. (M) Incisie van de ventrale zijde van de maag. (N) insnijding van de distale ledematen en dorsale side-to-side anastomose. (O) Ventraal side-to-side anastomose. (P (Q) Sluiting van de huid. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figuur 3
Figuur 3: overlevingspercentage van muizen 7 dagen na de RYGB Surgery. De data tonen het voordeel van chirurgische opleiding op het overlevingspercentage van RYGB bediende muizen. De waarden worden weergegeven als de gemiddelde waarde ± SEM. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figuur 4
Figuur 4: Effect van SG (A, C, D) en RYGB (B, D, F) met Bodyweight, dagelijkse voedselinname en glucose tolerantie. De gegevens worden weergegeven als het gemiddelde ± SEM. NS: niet significant; * P <0,05; ** P <0,01 (Mann-Whitney test, ANOVA test). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figuur 5
Figuur 5: Plasma hemoglobinegehalte na RYGB in muizen zonder (A) of (B) ijzersupplementen. De gegevens worden weergegeven als het gemiddelde ± SEM. NS: niet significant; * P <0,05 (Mann-Whitney test). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De groeiende epidemie van zwaarlijvigheid te overwinnen, de eerste bariatric chirurgische procedures ontstaan ​​in 1960 in de Verenigde Staten. Sindsdien is het aantal procedures uitgevoerd wereldwijd elk jaar nog steeds te verhogen, en vandaag, deze technieken vertegenwoordigen de beste therapeutische optie voor de behandeling van morbide obesitas 6. Van de ontwikkelde procedures, SG en RYGB zijn de twee meest populaire methoden in de klinische praktijk 4. Diermodellen, in het bijzonder knaagdieren, zijn gebruikt om de mechanismen achter de algemene verbetering gezondheidseffecten na bariatrische chirurgie ontcijferen.

De moleculaire mechanismen behoud van de gunstige metabolische effecten obese chirurgie ontcijferen, ontwikkelden we twee muismodellen van bariatrische chirurgie: de SG, die vaak wordt gedefinieerd als beperkend techniek en de RYGB, omschreven als restrictief en malabsorptive chirurgie. De realisatie van deze muis bariatrischeprocedures vereist ervaring in microchirurgie. Deze modellen zijn ontwikkeld met een technicus gespecialiseerd in dierlijke chirurgie en een menselijke viscerale chirurg. Uit ervaring, chirurgische training was noodzakelijk om meer dan 75% overleving te bereiken na RYGB. Mastering SG niet zo veel tijd vergen, en de leercurve is korter, met een sterftecijfer van ongeveer 95%. Daarentegen RYGB is een techniek complexer en vereist 6-8 weken training tot een aanvaardbaar postoperatieve overleving bereikt.

In de literatuur zijn er verschillende knaagdier bariatric procedures die eerder zijn beschreven 7, 8, 9. In deze SG techniek verwijderd we de hartstreek van de maag (ook wel de fundus), niet in de mens. Het doel was om ongeveer 80% van de maag te verwijderen. De zakgrootte van RYGB modellen in ratten varieert van <5% tot> 20% van de oorspronkelijke grootte maag. verschillende studies gebruikt muis RYGB modellen, de presentatie van ofwel een volledige behoud van de maag 10, een kleine maag zakje 5, of een totaal maag omleiding 5. In een zeer uitgebreide studie, hebben Deng Ping Yin en zijn collega's van de verschillende muismodellen van RYGB geëvalueerd en gerapporteerd dat de muizen maag niet anatomisch werd aangepast aan de oprichting van een maagzakje 5. Voor onze RYGB procedure, kiezen we ervoor om een ​​Roux-en-Y uit te voeren zonder het snijden van de maag. Als beperking, heeft ons model geen vermindering van voedselinname, die contrasteert wat waargenomen bij menselijke modellen RYGB induceren.

Het overlevingspercentage na RYGB operaties bij ratten wordt zelden genoemd door de auteurs in de literatuur, maar het lijkt ongeveer 30 tot 35% te bereiken op gemiddeld 11. In onze handen, de sterfte was voornamelijk te wijten aan naadlekkage of stenose of te laat postoperatieve gastrojejunal anastomose stenosis, wat leidt tot chronische obstructie met aanhoudende overmatig gewichtsverlies, die het welzijn van dieren in gevaar. RYGB vereist specifieke PO management, waaronder een gel voeding tijdens de eerste drie dagen na de operatie en pijnbestrijding regime. Om op lange termijn verbetering van de overleving na de operatie, we toegevoegde vitaminen postoperatief, in het bijzonder in vet oplosbare vitamines en ijzer, om bloedarmoede te voorkomen. Omgekeerd hoeft muizen niet nodig vetoplosbare vitamine suppletie na SG, aangezien het slechts een restrictieve procedure. In de voorgaande documenten heeft de auteurs beschrijven de gezondheidstoestand van geopereerde dieren tijdens de postoperatieve beloop. Want het is een grote operatie, kunnen we niet aannemen dat de systematische welzijn van de dieren in deze studies.

Tot slot, muismodellen van ofwel restrictieve (SG) of beperkende-malabsorptieve (RYGB) bariatrische ingrepen zijn haalbaar, maar vereisen microchirurgische training met een leercurve, vooral voor de RYGB procedure. keep de dieren in goede gezondheid, PO management is zeer belangrijk in de RYGB procedure, met name wat betreft pijn, maar ook qua vitaminesupplementen. Door het bereiken van een snellere, steriel chirurgie en door het gebruik van microchirurgische training, kunnen we sterk verbeteren van de postoperatieve overlevingskans. Deze modellen zijn nuttig en essentiële instrumenten om de metabole effecten van bariatrische chirurgie te begrijpen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Drugs
High Fat diet DIO diet Safe
Isoflurane Forane Baxter
Buprenorphin Buprecare Animalcare
Marbofloxacine Marbocyl Vetoquinol
Ammonium iron citrate, vitamins PP-B12 Fercobsang Vetoquinol
Vitamins A-D3-E-K-B Vita Rongeur Virbac
NaCl 0.9% NaCl 0,9%
Povidone solution Betadine Scrub Betadine
Povidone solution Betadine Solution Betadine
Carboptol 980 NF Ocrygel TVM
Name References Company Comments
Sutures
Prolene® 8.0, 6,5 mm Ethicon
Prolene® 5.0, 13 mm Ethicon
Name References Company Comments
Surgical equipments
Scissors FST
Needle holder Olsen-Hegar FST
Micro scissors Vannas FST
Micro forceps  Graefe FST
Micro forceps curved Graefe FST
Curved micro needle holder Castroviejo FST
Hemostatic collagen compress Pangen Urgo
Absorbent underpads VWR
Name References Company Comments
Specific equipments
Hematology system  Hemavet 950FS Hemavet
Glucose strips and glucometer One touch Verio Life scan
Stereo microscope MZ6 Leica 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ng, M., Fleming, T., et al. Global, regional, and national prevalence of overweight and obesity in children and adults during 1980-2013: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2013. The Lancet. 384 (9945), 766-781 (2014).
  2. Calle, E. E., Thun, M. J., Petrelli, J. M., Rodriguez, C., Heath, C. W. Body-mass index and mortality in a prospective cohort of U.S. adults. The New England Journal of Medicine. 341 (15), 1097-1105 (1999).
  3. Sjöström, L., Lindroos, A. K., et al. Lifestyle, diabetes, and cardiovascular risk factors 10 years after bariatric surgery. The New England Journal of Medicine. 351 (26), 2683-2693 (2004).
  4. Buchwald, H., Avidor, Y., et al. Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis. JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).
  5. Yin, D. P., Gao, Q., et al. Assessment of different bariatric surgeries in the treatment of obesity and insulin resistance in mice. Annals of surgery. 254 (1), 73-82 (2011).
  6. Buchwald, H., Oien, D. M. Metabolic/Bariatric Surgery Worldwide 2008. Obesity Surgery. 19 (12), 1605-1611 (2009).
  7. Liu, W., Zassoko, R., et al. Establishment of duodenojejunal bypass surgery in mice: A model designed for diabetic research. Microsurgery. 28 (3), 197-202 (2008).
  8. Lan, Z., Zassoko, R., et al. Development of techniques for gastrojejunal bypass surgery in obese mice. Microsurgery. , (2010).
  9. Schlager, A., Khalaileh, A., et al. A mouse model for sleeve gastrectomy: Applications for diabetes research. Microsurgery. 31 (1), 66-71 (2011).
  10. Troy, S., Soty, M., et al. Intestinal Gluconeogenesis Is a Key Factor for Early Metabolic Changes after Gastric Bypass but Not after Gastric Lap-Band in Mice. Cell Metabolism. 8 (3), 201-211 (2008).
  11. Seyfried, F., Lannoo, M., et al. Roux-en-Y gastric bypass in mice--surgical technique and characterisation. Obesity surgery. 22 (7), 1117-1125 (2012).

Tags

Geneeskunde bariatrische chirurgie sleeve gastrectomie Roux-en-Y gastric bypass obesitas muis
Technieken van Sleeve Gastrectomie en Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Muizen
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Ayer, A., Borel, F., Moreau, F.,More

Ayer, A., Borel, F., Moreau, F., Prieur, X., Neunlist, M., Cariou, B., Blanchard, C., Le May, C. Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice. J. Vis. Exp. (121), e54905, doi:10.3791/54905 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter