Summary
Uyuşturucu maddelerin düşük alan Flor-19 (19F) saat-alan (TD) Nükleer manyetik rezonans (NMR) kullanarak Flor içeren formüle ilaç ürünleri ortalama içerik ölçer bir basit ve tahribatsız teknik burada sunulmaktadır. Tekniği uygulanan kalkınma ve uyuşturucu ilaç sektöründe imalatı.
Abstract
Burada, biz düşük alan Flor-19 (19F) saat-alan (TD) Nükleer manyetik rezonans (NMR) flüorlu uyuşturucu Gönderilerin içeriği ölçmek için formüle edilmiş uyuşturucu ürün formlarını kullanan grubumuz tarafından geliştirilen bir protokol tarif: Tablet veya kapsül. Flor, Flor eksikliği eksipientleri müdahalelerden kaçınarak sadece içeriği algıladığından bu flüorlu ilaçlara belirli bir yöntemdir. Fluorlu uyuşturucu düşük alan 19F TD-NMR yüksek-alan 19F katı hal (SS) NMR karşı kullanarak etkin içeriğin ölçme yöntemi sadelik avantajları; düşük maliyetli; ve tekniği ile tüm örnekleri olduğu gibi formları (Örneğin, tozlar, Tablet ve kapsül) kurtarılabilir tahribatsız doğası bu teknik herhangi bir laboratuvar için uygun hale.
500 mg 15 arası değişen dozlarda üç flüorlu ilaç ürünleri kullanılabilir - cinacalcet, Lansoprazol ve siprofloksasin - piyasadaki yöntemiyle test ettik. Düşük-alan 19tarafından F TD-NMR, ölçülen analizleri sonuçlarını ortalama uyuşturucu içerik için bildirilen etiket iddiaları destekledi.
Basitlik ve tekrarlanabilirlik analizi dayalı, biz İlaç sektöründe bir süreç analitik teknoloji (PAT) aracı olarak üretim tesisleri, dahil olmak üzere herhangi bir laboratuvarda bir etkisi Bu metodoloji öngörülüyor.
Introduction
İlaç endüstrisinde, uyuşturucu maddeler doz birimi formları (Örneğin, Tablet ve kapsül) içeriğini kalite kontrol ve performans yönergeleri karşılamak için etiket iddia açık Aralık içinde olmalıdır. Yüksek performanslı sıvı Kromatografi (HPLC) ilaçlar formüle formları içerik tekdüzelik ölçmek için kullanılan geleneksel analitik tekniğidir. Ancak, uzun ve yıkıcı, analiz önce uygun çözücüler kullanılarak formüle edilmiş şekliyle içine ilaç dağılması gerektiren yöntemdir. Hatta otomasyonu ile işlemi uygun analitik yöntem1,2,3gelişimine bağlı olarak örnek başına 1-3 h sürebilir. HPLC yanı sıra yakın kızılötesi (Nur) aynı amaç için ve onun uygulama uzun ve daha karmaşık4yapma veri chemometric analiz gerektiren ihtar ile PAT bir araç olarak kullanılmıştır. Her iki teknikleri, analizden sonra atılan formüle uyuşturucu yıkıcıdır.
Bu makale, biz daha önce flüorlu ilaç dozaj formları (Örneğin, Tablet ve kapsül) ortalama içeriğini ölçmek için bizim grup5 tarafından yayınlanan bir metodoloji adım adım Protokolü tarif düşük alan 19F kullanarak NMR. Yıllar içinde flüorlu uyuşturucu olarak formüle edilmiş ilaç ürünleri dünya çapında düzenleyici kurumlar tarafından onaylanmış piyasada yüzdesi 1970 yılında 2013%6%25 2 den artmıştır. Bu nedenle, formüle formları flüorlu ilaçların içeriğinin kalite kontrol için şu anda mevcut yöntemlerine göre daha basit ama daha özel yöntem geliştirmek için bir talep olduğunu düşünüyoruz.
Flor-19 (19F) onların yapılarda içeren ilaçlar kolayca 19F NMR proton7' ye kıyasla % 100 bolluk ve % 83'ü hassasiyeti nedeniyle tarafından tespit edilmeden avantajı var. Doğrudan ölçü birimi 1H TD-NMR eksipientleri ve API proton var ve ilaç ürünleri 1 kullanarak API içeriğindeki ölçmek için pratik yapma ilaç ürünün tüm bileşenleri toplam proton sinyal geliyor çünkü yararlı değil H TD-NMR. Bu nedenle, flüorlu ilaç ürünleri 19F TD-NMR kullanarak uyuşturucu içeriğini ölçme eksipientleri Flor eksikliği nedeniyle ile hiçbir girişim bir avantaja sahiptir. Fluorlu ilaç ürünleri ortalama uyuşturucu içeriğini ölçme metodolojimiz göstermek için biz farklı doz aralıkları Flor içeren üç ticari olarak formüle edilmiş ilaç ürünleri seçildi. Şekil 1 gösterir yapıları, seçilen iki yerde uyuşturucu onları - cinacalcet HCl8 ve Lansoprazol9-90 mg ve üçüncü en düşük 15 arasında değişen dozlarda kendi yapıları içinde bir trifluoromethyl (CF3) grup var -siprofloksasin HCl monohidrat10 - 500 mg dozla bir aromatik halkaya bağlı bir Flor atom içerir.
Burada, bir düşük-alan benchtop TD-NMR aleti ( 1H için 23.4 MHz ve 19F 22.0 MHz) kullanarak flüorlu ilaç ürünleri ortalama uyuşturucu içeriğini quantitate-5 geliştirdiğimiz yöntemi göstermektedir. Biz de sonuçları raporlamak için kullanılan iki yazılım paketleri (RI kalibrasyon ve Mnova yazılım) karşılaştırın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
dikkat: lütfen herhangi bir kimyasal kullanmadan önce tüm ilgili malzeme güvenlik veri sayfaları (MSDS) danışın. Uyuşturucu maddeler genel olarak zehirlidir ve uygun kişisel koruyucu ekipman (PPE; ile ele alınmalıdır Örneğin, eldiven, koruyucu gözlük, laboratuvar önlüğü, tam uzunlukta pantolon ve kapalı-toe ayakkabı), ile toz malzemeleri ağırlığında özel dikkatli olun. Bu bir başlık iyi hava akımı ile yerleştirilen bir denge denge çevresi dışında yaygınlaştırılması sağlam malzemelerden toz en aza indirmek için kullanmak için tavsiye edilir.
Not: yazılım yönergeleri RINMR, RI kalibrasyon ve Mnova özgü. Diğer yazılım paketleri ve TD-NMR satıcı aygıtlar için yönergeleri değişir.
1. hazırlık, örnekleri önceki 19 F TD-NMR ölçüm için
- tartmak örnekleri kalibrasyon (toz uyuşturucu madde veya etkin ilaç malzeme (API)) için uygun NMR tüplerde (2,5 - 3, 5-, 10-, 18-ve 25 mm OD NMR tüpler) işaretleme hattı (NMR sonda bobin yüksekliği) kadar veya yaklaşık 30 mm içinde yükseklik. Yüksekliği sondası bağlı olabilir dikkat.
Not: Cinacalcet HCl için kalibrasyon cinacalcet ticari tablet ilaç içeriğinde belirlemek için kullanmak üzere bir API örneğidir. Kilo toz yoğunluğu üzerinde bağlıdır. Cinacalcet HCl durumunda API ağırlıkları 7.2, 3.5, 1.0, 0.3, 0,1 ve 0,07 g 25-, 18-, 10-, 5-, 3-ve 2.5 mm NMR tüpler, bobin yüksekliğini sırasıyla doldururken vardır. - Tartmak formüle uyuşturucu ürün örnekleri (Tablet veya kapsül) uygun NMR tüplerde kadar işaretleme çizgi (yükseklik bobin NMR sonda için) veya yaklaşık 30 mm içinde yükseklik, yukarıda belirtildiği şekilde.
Not: 25 veya 18 mm tüpler için büyük ölçekli tablet/kapsül veya yeterli formüle uyuşturucu ürün kullanılabilir olduğunda uygundur. Daha küçük tablet/kapsül veya ne zaman yeterli formüle uyuşturucu ürün mevcuttur ama sinyal-gürültü oranı hala ölçüm için yeterli olabilir, 10 mm tüpler kullanın. Tablet doğrudan ölçmek ya da isterseniz ezmek. Onların ölçümlerde oluşabilecek değişiklikleri yok gözlenmesi gözlemlenmiştir burada, tartışma belirtildiği gibi.- Cinacalcet, hazırlama ticari tablet tartmak ne zaman yaklaşık on beş 90 mg tablet 25 mm NMR tüp (yaklaşık 9,2 g), (yaklaşık 4.2 g) elli 30 mg tablet 25 mm NMR tüp (yaklaşık 9.6 g), 18-mm NMR 22 30 mg tablet tüp ve 23 60 mg tablet 25 mm NMR tüp (yaklaşık 8,8 g).
2. NMR enstrüman ölçümü için hazırlanması
- taşıma 19 F NMR araç Tuning NMR Daimi Mıknatıs tüm ölçümler sıcaklıkta dışarı alet. Burada, 40 ° C kullanın; sıcaklık kontrol burada kullanılan 26 mm 19 F NMR sonda için kullanılabilir. Tüm ölçümler 22.0 MHz frekans 19 23-MHz (için 1 H) NMR enstrüman kullanarak F gerçekleştirmek.
- Teflon standart örnek 25 veya 26 mm NMR tüp içine yerleştirin ve mıknatıs içinde sonda içine yerleştirin. Denge için yaklaşık 5-10 dk için izin ve enstrüman 19 F. seçin ayarlamak " otomatik O1 " altında " komutları " RINMR yazılım menüde. Ölçüm en az 3 kez tekrarlayın ve O 1 parametre (frekans sapma) son değerini alın.
- Kalibrasyon 19 F 90 derece darbe
- araç kullanılabilir standart otomatik kalibrasyon sırası kullanılarak standart Teflon örnek ile F-19 için 90 derece darbe kalibre. Seçin " otomatik P90 " altında " komutları " RINMR yazılım menüde.
Not: Normalde, 90 derece nabız sık sürece araç değil gerçekleştiriyor veya sonda bir süredir kullanılmamış olan ölçülecek gerekmez. Burada kullanılan 26 mm 19 F NMR sonda ile Teflon 7,05 µs için alınan 90 derece değeri.
- araç kullanılabilir standart otomatik kalibrasyon sırası kullanılarak standart Teflon örnek ile F-19 için 90 derece darbe kalibre. Seçin " otomatik P90 " altında " komutları " RINMR yazılım menüde.
3. T 1 veya boyuna gevşeme zamanı ölçümü standart saf API örnekleri için
- daha iyi bir sinyal / gürültü oranı için 25 mm NMR tüp mıknatıs yüklü F-19 sonda içinde hazırlanan API örnek yer ve en az 10 dk. equilibrate izin
- Enstrüman el kitabı, inversiyon-kurtarma RINMR yazılım için bir Standart deney kullanarak her API örnek için talimatları T 1 dinlenme süre ölçebilir.
Not: 16 taramaları ile 0.1-µs Işınma Zamanı toplanan önerilen deneysel parametreler şunlardır; 8 veri noktaları; 90 derece nabız, yukarıda da belirttiğimiz gibi; ve 10 µs ölü bir süre F-19 26 mm soruşturma için. 8--dan 100 µs gecikmeler bir dizi s (Örneğin, 100 µs, 500 µs, 10 ms, 100 ms, 300 ms, 700 ms 1 s, 2 s, 5 s ve 8 s) ilaçlar CF 3 ve 20 üzerinden 100 µs gecikmeler için s (Örneğin 100 µs, 500 µs, 1 ms, 100 ms, 500 ms, 1 s, 5 s, 10 s, 15 s ve 20 s) için uyuşturucu olduğu aromatik halkanın bağlı bir Flor grubu ile tavsiye edilir.- İn RINMR yazılım, yük " invrec.exe " darbe sıra seçerek " yük " altında " sıra "'ı tıklatarak " açık. " tıklatarak temel parametreleri doğru değerler olup olmadığını kontrol edin " A " veya seçme " Satın alma " altında " parametreleri " menü.
- Select " komut dosyaları " altında " araçlar " menü; bir pencere çıkacaktır. Seçin " T1.ris " tab ve yeşil oku; bir pencere çıkacaktır. Uygun gecikmeler ile gecikme listesi dosyasını seçin veya tıklattıktan sonra listeyi oluşturmak " açık. " gecikme liste tatmin edici bir kez tıklayın " Tamam. "
Not: bir pencere içinde toplanan bir dosya için tüm spectra oluşturulması için bir iletişim kutusu görüntüler sipariş T 1 değerini hesaplamak için. Klasör ve dosya adları ve konumunu kadar kullanıcısınız. - Tıklayın " kurtarmak " verileri alınıyor ve otomatik olarak seçili klasördeki dosyaları için gecikmeleri tasarrufu başlatmak araç için.
Not: RIMNR yazılım T 1 gevşeme eğriler oluşturmak ve her servis talebi için T 1 dinlenme sürelerini hesaplamak. T 1 gevşeme eğrisi ve zaman sabit veya T 1 değeri . ile bir pencere açılır Cinacalcet HCl için T1 değerini 2.4 buradaydı, s.
4. Kalibrasyon örnekleri saf API ile ölçme
- yer bir kalibrasyon eğrisi oluşturmak için API ölçme örnekler kalibrasyon örnek içinde belirli bir API için mıknatıs. Örnekler en az 5 dk daha küçük tüpler için ve daha büyük tüpler için 10 dk equilibrate.
- Ücretsiz indüksiyon çürüme (FID) veya katı (90 x-90y FID) deney aleti el kitabındaki yönergeleri takip uygun parametrelerle birlikte elde etmek. RINMR yazılım, yük " solid.exe " (veya " fid.exe ") nabız sıra seçerek " yük " altında " sıra " ve tıkırtı " açık. "
Not: katı önerilen deneydir katı malzemeler için hızlı rahatlatıcı kısa T 2 ile (enine gevşeme zamanı). 128 taramalar bir 0.1 µs Işınma Zamanı, 1.024 veri noktaları, 90 derece nabzı (7,05 µs bu durumda, calibr ile toplanan önerilen deneysel parametreleridirated) Teflon kullanarak ve 10 µs ölü bir süre için 19 F 26 mm sonda. 7.5 bir geri dönüşüm gecikme CF 3 grubu ve 20 içeren ilaçlar için s s burada anlatılan durumlar için kullanılan ilaç bir aromatik (nedeniyle daha uzun T 1 gevşeme süreleri) bağlı F Grubu ile temel üzerinde onların T 1 ölçümler. - Onlar için 5-10 dk her API örnek kalibrasyon eğriler oluşturmak için mıknatıs sıcaklığını equilibrated sonra her API için hazırlanan tüm örneklerini ölçmek. Verileri her deneysel çalışma için farklı bir ad vererek bir klasörüne kaydedin.
- Her tüp ve göz önüne alındığında en büyük tüp API örnekte saflığı göre örnekleri ağırlık yüzdesi hesaplamak.
5. Uyuşturucu ürün ölçümü örnekleri tablet
- yer zaten hazır formüle uyuşturucu ürün örnekleri (Tablet veya kapsül) mıknatıs onları bir ölçmek için bir zaman. Örnek 5 dk küçük NMR tüpler veya daha büyük NMR tüpler örneklerinde 10 dakikadır equilibrate.
- Aynı NMR deneyi (Yani, katı) kalibre edilmiş örnekleri gelince aynı koşullarla her belirli API için elde.
6. Kalibrasyon nesil eğrileri saf API örnekleri ve Kalibrasyon eğrileri tablet olarak uyuşturucu ürün örnekleri verileri ekleme ile
- katı bölge deneme 5 ila 300 puan için kalibrasyon eğriler oluşturmak için bu gibi durumlarda, seçin. Aşağıda özetlenen verileri üç farklı yolla çözümlenebilir.
- RI kalibrasyon yazılımını açın. SAĞLAM veri FID veya katı dosyaları belirli bir API açmak için klibi sembolünü tıklayarak çağırmak. Ölçülen tüm örnekleri için altında ağırlık yüzdeleri girin “ konsantrasyon ” sütun ve ağırlık altında “ kitle ” sütun. (5-300 puan) kalibrasyon eğrisi oluşturmak için ortalama yöntemi kullanarak uygun bölgeyi seçin (simgesini açın “ ekran NMR veri ” Puan hesaplaması için aralığı seçmek için). Kalibrasyon eğrisi kaydedin.
Not: Cal sütun uyuşturucu örneklerinde ölçülen yüzdesi sağlayacaktır. - İçinde RI ayarlama yazılımıyla birlikte aynı seçilen bölge (5-300 puan), kalibrasyon eğrisi oluşturmak için uygun yöntemi kullanın. Kalibrasyon eğrisi kaydedin. Adım 4.2.2 olduğu gibi aynı yönergeleri izleyin.
- (Örneğin, Mnova) yazılımını açın. SAĞLAM veri belirli bir API sürükleyin ve standart örnekleri ağırlık yüzdeleri girin; el ile talimatlar bulundu tıklatarak “ içerik ” altında “ yardım ” menü. İçinde “ gelişmiş ” yemek listesi, seçme “ zaman etki alanı ” ve sonra “ Nefelometri; ” bir pencere çıkacaktır. Entegrasyon alanı seçmek için mavi artı işaretini tıklatın. Uygun bölge (5-300 puan) kalibrasyon eğrisi oluşturmak için Parlaklık modu kullanarak entegre.
- Kalibrasyon eğrisi kaydedin. Tabloda, örnek başına ilaçların yüzde sadece ve standartlarında girin “ konsantrasyonu (x) ” sütun ve ağırlık altında tüm örnekleri için “ kütle (m) ” sütun; kalibrasyon örnekleri (işaretli) kırmızı renkte olmalıdır. Emin olun “ sinyal görev ” olduğunu “ y s/m = ” (sinyal/kütle için normalize etmek).
- Tekrarlanabilirlik ve tekrarlanabilirlik, ölçmek için her 3 kez farklı günlerde örnek ve Kalibrasyon eğrisi her iki yazılım paketleri oluşturun. Kalibrasyon eğrisi dosyaları kaydetmek.
7. Fluorlu API uyuşturucu hesaplanması ağırlık formüle uyuşturucu ürün kullanımında kalibrasyon eğrileri
- tutarının hesaplaması ağırlık yüzdesi ve ortalama doz tablet/kapsül flüorlu API başına ilaç formüle ilaç Ürün
- RI ayarlama yazılımıyla ve ortalama kalibrasyon eğrisi için dosyayı kullan yöntemi. Ölçülen Tablet (ya da kapsül) NMR veri okuma ve fluor API formüle tablet veya kapsül kalibrasyon eğrisi üzerinden ağırlık yüzdesi belirlemek için onların ağırlık girin.
Not: “ Cal ” sütun (kalibrasyon ve ticari tabletleri veya bilinmeyen) ölçülen örneklerinde uyuşturucu yüzdesi sağlayacaktır. O1 parametresi aynı kalibrasyon örnekleri ve tablet veya kapsül RI ayarlama yazılımı için olmalıdır fark. - Dosyayı uygun yöntemle RI ayarlama yazılımıyla gelen kalibrasyon eğrisi için kullanın. Okuma Tablet (veya kapsül) NMR verilerden ölçülen ve fluor API formüle tablet veya kapsül kalibrasyon eğrisi üzerinden ağırlık yüzdesi belirlemek için onların ağırlık girin. Adım 5.2.1 olduğu gibi aynı yönergeleri izleyin. O 1 parametresi aynı kalibrasyon örnekleri ve tablet veya kapsül RI ayarlama yazılımı için olmalıdır fark.
- Mnova dosyasını kullanın ve Edinsel NMR veri için formüle edilmiş API sürükleyin (veya onları aynı günde ölçmek). Adım 4.2.4 yönergeleri izleyin. Formüle tablet veya kapsül kalibrasyon eğrisi üzerinden API flüorlu ağırlık yüzdesi belirlemek için ağırlık girin.
Not: tabloda, kalibrasyon örnekleri (işaretli) kırmızı ve bilinmeyen veya ticari tablet/kapsül mavi (seçilmemiş) olacaktır. “ Konsantrasyonu (x) ” sütun Mavi kırmızı kalibrasyon örneklerinde değerlere göre bilinmeyen örnekleri ticari tabletler için hesaplanan değerleri gösterir. Yazılım ağırlık yüzdesi hesaplamak için aynı O1 parametrenin kullanımı gerektirmez dikkat. - Olarak aşağıdaki denklemi ortalama değerden flüorlu ilaç tablet veya kapsül ücret miktarını hesaplamak (D = API doz mg, W NMR kalibrasyon eğrisi, w elde API ağırlık yüzdesi = toplam ağırlığı = ölçülen tablet veya kapsül ve N gelen formüle uyuşturucu ağırlığını ürününden formüle formüle tablet veya kapsül ölçüm için kullanılan sayısı =) ve temel yazılım tarafından hesaplanan değerlerle karşılaştırın kalibrasyon eğrileri:
- RI ayarlama yazılımıyla ve ortalama kalibrasyon eğrisi için dosyayı kullan yöntemi. Ölçülen Tablet (ya da kapsül) NMR veri okuma ve fluor API formüle tablet veya kapsül kalibrasyon eğrisi üzerinden ağırlık yüzdesi belirlemek için onların ağırlık girin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Düşük-alan 19F TD-NMR ile üç ticari ilaç ürünleri (cinacalcet, Lansoprazol ve siprofloksasin) flüorlu ilaç ürünleri ortalama uyuşturucu içeriğini ölçmek için test ettik. Şekil 1 test ilaçların yapıları Flor atomları yerlerini görüntüleme gösterir.
Birkaç birçok bir sürü ve dozaj formları (Yani, 30, 60 ve 90 mg) cinacalcet tablet, bir dozaj formu (15 mg) Lansoprazol kapsül, marka ve genel bir sürü ve bir dozaj formu (500 mg) ve siprofloksasin tablet bir sürü test ettik. NMR sinyali yaşlılık için cinacalcet (Resim 2), kalibrasyon eğrileri ve bir örnek üç uyuşturucu (şekil 3 - 5) ortalama kullanarak RI ayarlama yazılımı elde edilmiştir ve yöntemleri uygun ve büyüklüğü modu kullanılarak Mnova üzerinden. Bu eğrileri verilerden de onların mükemmel doğrusallık gösterilen tekrarlanabilirlik (şekil 3 - 5), triplicates ölçümleri arasında ve iyi tekrarlanabilirlik denetlemek için çizildi. Üç uyuşturucu için ölçümler tablo (Tablo 1-3) ve üç uyuşturucu için etiket iddiaları ile gösteri iyi anlaşmalar sonuçlarıdır.
Numune hazırlama üzerindeki etkisini test etmek için siprofloksasin tablet yarısı ezildi. Tablo 3 sağlam ortalama uyuşturucu içerikten sonuçlarını ve ezilmiş tabletleri de etiket iddia ile katılıyorum ölçüm gerçekleştirmek için tablet yok gerek yok olduğunu belirten göstermektedir. Buna ek olarak, bu yöntem non-yıkıcı ve örnekleri olduğu gibi formlarında kurtarılabilmesini gösterir.
Fiziksel ve kimyasal formları ölçümü önemi belirlemek için biz siprofloksasin ücretsiz Bankası ve HCl monohidrat kalibrasyon standartları olarak sağlam ve ezilmiş siprofloksasin tablet ilaç ortalama içeriğini belirlemek için kullanılır. Şekil 6 bu sonuçları göstermektedir. Şekil 6 A ne zaman siprofloksasin HCl monohidrat (kırmızı nokta) kalibrasyon standart olarak kullanıldı ve şekil 6B gösterir siprofloksasin Bankası (kırmızı nokta) ücretsiz sonuçları gösteriyor. Şekil 6'daki mavi noktalar bozulmamış ve ezilmiş siprofloksasin tablet karşılık gelir. İçinde yalnızcaA şekil 6tablet siprofloksasin ortalama içeriğini yapar ve ezilmiş tablet etiket iddia ile de doğru kalibrasyon standart siprofloksasin HCl monohidrat olduğunu belirten, katılıyorum. X-ışını toz kırınım (XRPD) veri cipro tabletleri, siprofloksasin ücretsiz Bankası ve siprofloksasin HCl monohidrat XRPD desenleri (Şekil 7) göre farklı fiziksel formları onaylamak için kaydedildi.
Resim 1 . Kimyasal yapıları Lansoprazol, siprofloksasin hidroklorik asit monohidrat ve Cinacalcet hidroklorik asit.
5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 2. Cinacalcet HCl için farklı veri tedaviler gösterilen zaman içinde ölçülen NMR sinyali çürüme.
(A) RI kalibrasyon yazılım ortalama yöntemi, yöntem ve (C) Mnova yazılım area yöntemi (B) RI ayarlama yazılımıyla uygun. Bölge üzerinden 5-300 puan tüm veri tedaviler için analiz için kullanıldı. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3. Cinacalcet HCl, ölçüler oluşturulan ücretsiz üs olarak hesaplanan için kalibrasyon eğrileri (NMR sinyali karşı yüzdesi uyuşturucu) nüsha gerçekleştirilen.
(A) RI ayarlama yazılımıyla ortalama modu, (B) RI ayarlama yazılımıyla uygun modu ve (C) Mnova yazılım area yöntemi. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 . Lansoprazol için kalibrasyon eğrileri (NMR sinyali karşı ilaç yüzde), oluşturulan ölçümler gerçekleştirilen nüsha olarak.
(A) RI ayarlama yazılımıyla ortalama modu, (B) RI ayarlama yazılımıyla uygun modu ve (C) Mnova yazılım area yöntemi. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 . Siprofloksasin HCl H2O, ölçüler oluşturulan ücretsiz üs olarak hesaplanan için kalibrasyon eğrileri (NMR sinyali karşı yüzdesi uyuşturucu) nüsha gerçekleştirilen.
(A) RI ayarlama yazılımıyla ortalama modu, (B) RI ayarlama yazılımıyla uygun modu ve (C) Mnova yazılım area yöntemi. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 6. NMR veri.
NMR sinyali uyuşturucu madde yüzdesi bir fonksiyonu olarak birs ücretsiz siprofloksasin (mavi noktalar) sağlam ve ezilmiş tabletler için temel kullanılan standartlar (A) siprofloksasin HCl monohidrat (kırmızı nokta) ve (B) siprofloksasin ücretsiz baz (kırmızı nokta) kullanarak. Veri Mnova yazılımı kullanılarak oluşturuldu. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 7 . X-ışını güç kırınım veri.
Siprofloksasin ücretsiz temel (üst), siprofloksasin uyuşturucu ürün için güç kırınım verisi cipro Tablet (orta) ve siprofloksasin HCl monohidrat (alt) olarak x-ışını. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Tablo 1. Hesaplanmış doz, Cinacalcet ücretsiz Bankası'ticari tablet, onların istatistik hesaplanan ortalama ve uygun yöntemleri kullanarak RI kalibrasyon yazılım paketi ve Mnova yazılımı ile. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu.
Tablo 2. Onların istatistik hesaplanan ortalama ve uygun yöntemleri kullanarak RI kalibrasyon yazılım paketi ve Mnova yazılımı ile hesaplanan Lansoprazol marka ve genel kapsül doz. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu.
Tablo 3. Hesaplanan dozda, siprofloksasin genel Cipro tabletler ve ezilmiş tabletleri, onların istatistik hesaplanan ortalama ve uygun yöntemleri kullanarak RI kalibrasyon yazılım paketi ve Mnova yazılım tarafından ile. 5yayımlanmaktadır, 2015, John Wiley izniyle telif hakkı & oğlu.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Daha fazla flüorlu ilaç piyasada kullanılabilir hale geliyor gibi düşük alan 19F TD-NMR5kullanarak flüorlu ilaç ürünleri ortalama uyuşturucu içeriğini ölçmek için belirli ve basit bir yöntem geliştirdik. Bu yöntem üç ticari ilaç ürünleri üzerinde test ettik: cinacalcet HCl, Lansoprazol içeren kapsül içeren tabletler ve siprofloksasin HCl monohidrat içeren tabletler. Bu yöntemin avantajları, Flor eksipientleri ve sadeliği eksikliği nedeniyle kendi özgüllük vardır. Test ettiğimiz ölçüm yetenekleri üzerinde cinacalcet ve Lansoprazol için sağlam formülasyonları (kapsül veya tabletler) formüle uyuşturucu. Ancak, formüle siprofloksasin uyuşturucu, söz konusu olduğunda biz bozulmadan test ve numune hazırlama değerlendirmek için tablet ezilmiş. İki yazılım paketleri, RI kalibrasyon (TD-NMR veri Nefelometri için ortak yazılım) ve bir ticari olarak mevcut güncel TD-NMR veri (Mnova biridir işleyen Mnova yazılımı karşılaştırma üzerinde duruldu yöntem geliştirme bölümü yüksek-alan NMR verileri işlemek için ortak yazılım paketleri). Biz her iki yazılım paketleri rapor-den sonuçlanmak için yeteneklerini ve onların uyumluluk Standart ticari ofis yazılım paketleri5ile değerlendirildi.
Cinacalcet8 HCl (şekil 1) üç doz tablet olarak formüle edilmiş (30, 60 ve 90 mg, muhasebesi ücretsiz temel olarak). Bu üç ticari doz güçlü ücretsiz Bankası tablet'olarak cinacalcet ortalama tutarlarını hesaplamak için bizim 19F TD-NMR metodoloji kullanarak üzerinden birkaç birçok bir sürü test ettik. Kalibrasyon eğrileri HCl oluşturulan nüsha doğrusal kalibrasyon eğrileri iyi tekrarlanabilirlik (şekil 3) ile sağlanan iki yazılım paketleri kullanarak iletişim kuralı, gösterildiği gibi cinacalcet için. Tablo 1 (RSD) değerleri, iyi standart sapma ve yüzde göreli standart sapma ile test doz için etiket ile de katılıyorum sonuçları iddia gösterir.
Lansoprazol9 (şekil 1) metodolojimiz düşük doz kapsül formülasyonları için test etmek için bir model sistem bir 15 mg formüle edilmiş dozda satılmaktadır. Biz bizim yöntem yukarıda açıklandığı gibi test ve kullanılan örnekleri olarak aldı. Cinacalcet HCl tablet şubesinde kalibrasyon eğrileri, triplicates, olarak doğrusal ve iyi tekrarlanabilirlik (şekil 4) vardı. Test dozu iyi etiket ile aynı fikirde analiz göstermek sonuçlarını iyi standart sapma ve tamamlanma RSD değerlerinin (Tablo 2) ile iddia. Siprofloksasin10 monohidrat hidroklorür (şekil 1) ücretsiz üs olarak 500 mg dozla siprofloksasin HCl monohidrat içeren tabletler formüle edilmiştir. Önceki durumlarda olduğu gibi kalibrasyon eğrileri nüsha olarak doğrusal iyi tekrarlanabilirlik (şekil 5). Test dozu iyi etiket ile aynı fikirde analiz göstermek sonuçlarını iyi standart sapma ve tamamlanma RSD değerlerinin (Tablo 3) ile iddia. Bu durumda, biz de sağlam ve ezilmiş tablet numune hazırlama etkilerini belirlemek için kullanıldığı yöntem değerlendirildi. Her iki durumda da, ortalama uyuşturucu içerik sonuçları çok az örnek hazırlama tarafından etkilenir gösteren iyi anlaşma ile etiket talebi (Tablo 3), sonuçlar alındı.
19F TD-NMR yöntemlerle bizim yöntemi doğrudan tozlar, onların katı devletlerden formüle ilaç ürünleri ortalama flüorlu uyuşturucu içeriğinde, Tablet veya herhangi bir diğer manipülasyon (Örneğin, çözünme, içinde olarak, gerek kalmadan kapsüller sıvı Kromatografi (LC) yöntemleri). Bu nedenle, doğru kimyasal ve kullanılan standartlar doğru fiziksel formları çözümleme sonuçlarını üzerindeki etkilerini belirlemek için değerlendirilmelidir. Bu noktada göstermek için kalibrasyon standartları olarak siprofloksasin siprofloksasin HCl monohidrat ve ücretsiz kaidesi ile kalibrasyon eğrileri yaptık. Kalibrasyon eğrisi için kullanılan standart ücretsiz Bankası iken, formüle cipro tablet ölçümü ve uyuşturucu madde olarak formüle edilmiş bütün ve ezilmiş tabletler %138.8 %137.8 sırasıyla belirtilen ( şekil 6 B grafiğinde gösterilen veriler mavi noktalar olarak). Açıkçası, bu sonuçlar siprofloksasin ücretsiz Bankası civarında %64.7 (Tablo 3) etiket iddia uzak vardır. Grafiği şekil 6 A kalibrasyon eğrisi cipro ve ezilmiş Tablet (mavi noktalar) ölçmek için siprofloksasin HCl monohidrat ile (kırmızı nokta) bitince etiket iddia ile kabul sonuçlarını gösterir. Sonuçları arasındaki farklar nedeniyle yanlış fiziksel ve kimyasal formları için referans standart örnekleri ücretsiz temel olarak kullanılan. Bu değerlendirme siprofloksasin ücretsiz Bankası, siprofloksasin HCl monohidrat ve genel cipro tablet XRPD desenleri karşılaştırarak teyit edildi. Siprofloksasin ücretsiz tabanı siprofloksasin HCl monohidrat ve cipro tablet farklı XRPD desen (Şekil 7) nedeniyle daha farklı kristal formu vardır.
Kalibrasyon için yazılım paketleri karşılaştırırken, RI kalibrasyon ve Mnova tatmin edici sonuçlar üretmek. Mnova daha fazla istatistik ve bilimsel grafik ve raporlama için yararlı olan veri analiz için diğer ticari ofis yazılım paketleri ile uyumlu olma avantajına sahiptir. Mnova yazılım gözden geçirilmiş ve RI ayarlama yazılımıyla olmasa da her yıl güncellenmiş. İki ile ilgili veri analiz yöntemleri, RI ayarı'nda kullanılan "uygun" yöntemi makul sonuçlar elde sağlar ancak daha "ortalama" yöntemi daha da fakir olan ekstrapolasyon ölçülen verileri sıfır "uygun" yönteminin dayandığı için daha fazla belirsizlik için ekleme kesin sonuçları.
Sonuç olarak, düşük alan 19tarihinde F TD-NMR Flor içeren ilaç ürünleri ortalama uyuşturucu içeriğini ölçmek için dayalı basit bir yöntem geliştirdik. Bu basit iletişim kuralı klasik yöntemleri (Örneğin, LC) daha kısa sürede etiket iddiaları ile iyi sözleşmedeki sonuçları sağlar. Teknik non-yıkıcı ve değil herhangi bir örnek işleme Çözümleme sırasında (Örneğin, toz, Tablet ve kapsül) olduğu gibi formları kullanarak tam bir örnek kurtarma ile gerekli. Kalibrasyon eğrisi oluşturmak için kullanılan standartlar uyuşturucu olarak aynı kimyasal ve fiziksel formları formülasyonu formunda olması gerekir. (RI kalibrasyon ve Mnova) çözümlemesi için kullanılan yazılım paketleri ile ilgili olarak, her ikisi de yeterli, ama güncel ve standart ofis yazılım paketleri ile tam uyumlu Mnova. Bu sonuca göre laboratuvarlar ve üretim tesisleri ilaç sektöründe bir süreç PAT aracı olarak uygulanmakta Bu metodoloji öngörüyoruz.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu makale daha önce yayımlanmış bir makaleye5temel alır. 5, telif hakkı 2015, John Wiley & Sons izni ile yayımlanmaktadır.
Bizim yönetim, Dr. Janet Cheetham, Dr Francisco Alvarez, Dr Arwinder Nagi ve onların desteği, faiz ve bu araştırma projesi gerçekleştirmek için teşvik için Dr David Semin ve Dr Minhui Ma ve Bay Robert Munger bizimle sağlamak için için minnettarız cinacalcet HCl, formüle Tablet ve ilaç hakkında bilgi. Ayrıca TD-NMR veri Nefelometri için geçerlidir olarak onların yapıcı destek ve Mnova yazılım şu anda ticari versiyonu gelişimi üzerine tartışmalar Doktor Michael Bernstein, Dr Manuel Perez ve Dr Santiago Dominguez teşekkür etmek istiyorum. Ayrıca, Bay Regnar L. Madarang F.N.P. için özel teşekkür ederiz bizi genel cipro ile sağlamak için çalışmalarımız yapmak için tablet.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MQC-23 | Oxford Instruments | 52-AM4044 | 23.4 MHz for 1H and 22.0 MHz for 19F |
| 26 mm Probe (19F) | Oxford Instruments | 52-AM4061 | 19F NMR probe |
| Cinacalcet HCl | Amgen | Lot 005002 M | Purity 99.8% |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot 0010021308 | 30 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D1026396 | 30 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D118714 | 30 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D061829 | 60 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot 00100213 | 90 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D064074 | 90 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot 1026356 | 90 mg tablets |
| Lansoprazole | Fluka | Lot LRAA1897 | Purity 99.7% |
| Brand name Lansoprazole | Novartis | Lot DV1891 | 15 mg capsules |
| Lansoprazole generic | SUPERVALUE INC | Lot 2GE2027 | 15 mg capsules |
| Ciprofloxacin free base | Fluka | Lot BCBM7969V | 99.9% purity |
| Ciprofloxacin HCl monohydrate | Fluka | Lot P500044 | 94% purity as HCl salt |
| Cipro generic | Pack Pharmaceuticals | Lot PUB3033 | 500 mg tablets |
| 25 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-25TD-200-FB | |
| 18 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-18TD-200-FB | |
| 10 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-10TD-200-FB | |
| 5 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-HL5-7 | |
| 3 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-H3-7 | |
| 2.5 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-H5/2.5 |
References
- El-Yazigi, A., Wahab, F. A., Afrane, B. Stability Study and Content Uniformity of Prochloroperazine in Pharmaceutical Preparations by Liquid Chromatography. J Chromatogr A. 690, 71-76 (1995).
- Takeuchi, Y., Yoshida, M., Ito, A., Sunada, H. Uniformity of Drug Content During Pharmaceutical Dry Granulation by Roller Compaction and Tableting Processes. J Drug Del Sci Tech. 19 (2), 119-124 (2009).
- Toro, I., Dulsat, J. F., Fábregas, J. L., Claramunt, J. Development and Validation of a Fully Automated method of the Chromatographic Determination of Content Uniformity of Drug Tablets. J Pharm Biomed Anal. 36, 57-63 (2004).
- Shi, Z., Hermiller, J. G., Gunter, T. Z., Zhang, X., Reed, D. E. A Novel Sample Selection Strategy by Near-Infrared Spectroscopy-Based High Throughput Tablet Tester for Content Uniformity in Early-Phae Pharmaceutical Product Development. J Pharm Sci. 101 (7), 2502-2511 (2012).
- Silva Elipe, M. V., et al. Applications of 19F Time-Domain NMR to Measure Content in Fluorine-Containing Drug Products. Magn Reson Chem. 54 (6), 531-538 (2015).
- Wang, J., et al. Fluorine in Pharmaceutical Industry: Fluorine-Containing Drugs Introduced to the Market in the Last Decade (2001-2011). Chem Rev. 114, 2432-2506 (2014).
- Dolbier, W. R. Jr Guide to Fluorine NMR for Organic Chemists. , John Wiley & Sons, Inc. Hoboken, NJ. (2009).
- Barman, J. A., Scott, L. J.
- Horn, J. The Proton-Pump Inhibitors: Similarities and Differences. Clin Ther. 22 (3), 266-280 (2000).
- LeBel, M. Ciprofloxacin: Chemistry, Mechanism of Action, Resistance, Antimicrobial Spectrum, Pharmacokinetics, Clinical Trials, and Adverse Reactions. Pharmacotherapy. 8 (1), 3-30 (1988).
