Waiting
Traitement de la connexion…

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

نورموثيرميك ت نضح قلب الموقع في العمل وضع: تقييم وظيفة القلب والايض

Published: January 12, 2019 doi: 10.3791/58430
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1, 1, 2, 3, 4, 5, 1,6, 1,3,6,7
1Department of Surgery, Faculty of Medicine, University of Alberta, 2Department of Pediatrics, Faculty of Medicine, University of Alberta, 3Department of Biomedical Engineering, Faculty of Medicine, University of Alberta, 4Department of Mechanical Engineering, Faculty of Engineering, University of Alberta, 5Department of Chemical and Materials Engineering, Faculty of Engineering, University of Alberta, 6Canadian National Transplant Research Program, 7Department of Physiology, Faculty of Medicine, University of Alberta

Summary

السابقين نورموثيرميك الموقع القلب نضح (أشب)، يحافظ على القلب في حالة شبه الفسيولوجي، والضرب. عندما يؤديها في وضع عامل، أشب يوفر الفرصة لإجراء عمليات تقييم متطورة للمانحين صلاحية الجهاز ووظيفة القلب. وهنا يصف لنا لدينا طريقة لتقييم أداء عضلة القلب أثناء أشب.

Abstract

الطريقة القياسية الحالية للحفاظ على الجهاز (التخزين البارد، CS)، يعرض القلب لفترة الاسكيمية الباردة أن يحد من الوقت الحفاظ على آمنة، ويزيد من مخاطر ما بعد زرع الأعضاء من نتائج ضارة. وعلاوة على ذلك، لا تسمح طبيعة ثابتة لخدمات العملاء لتقييم الجهاز أو التدخل أثناء الفاصل الزمني لحفظ. السابقين نورموثيرميك الموقع القلب نضح (أشب) هو طريقة جديدة للحفاظ على القلب المتبرع به أن يقلل الاسكيمية الباردة بتوفير بيرفوساتي اﻷوكسيجين، الغنية بالمغذيات إلى القلب. أشب لقد ثبت أن تكون أدنى من غير خدمات العملاء في الحفاظ على المعايير القياسية المانحة القلوب وسهلت أيضا زرع قلوب تبرعت بها بعد تحديد الدورة الدموية من الموت السريري. حاليا، بيرفوسيس الجهاز أشب السريرية متوفر فقط في القلب في حالة إلغاء تحميل، وغير العاملين، يحد من تقييمات الأداء احتشاء عضلة القلب. على العكس من ذلك، يوفر أشب في وضع العامل الفرصة لإجراء تقييم شامل لأداء القلب بتقييم البارامترات الفنية والتمثيل الغذائي في ظل الظروف الفسيولوجية. وعلاوة على ذلك، اقترح في وقت سابق من الدراسات التجريبية أن أشب في وضع العامل قد يؤدي تحسين الحفاظ على الوظيفية. هنا، يمكننا وصف البروتوكول من أجل ت نضح الموقعية للقلب في نموذج الثدييات كبيرة (خنزيري)، وقابل لإعادة الإنتاج لنماذج حيوانية مختلفة وأحجام القلب. البرنامج في هذا الجهاز أشب يسمح للتحكم في الوقت الحقيقي والآلي لسرعة المضخة للحفاظ على الضغط المطلوب أذينية الابهري الأيمن والأيسر، وتقيم مجموعة متنوعة من المعلمات الوظيفية والكهربية مع الحاجة إلى الحد الأدنى الإشراف/التلاعب.

Introduction

أهمية سريرية

التخزين البارد (CS) بينما معظم جوانب زرع القلب تطورت كثيرا منذ زرع القلب الأولى في عام 1967، يبقى المعيار للمانحين قلب المحافظة على1. خدمات العملاء يعرض الجهاز لفترة الاسكيمية البارد الذي يحد من الحفاظ على آمنة الفاصل الزمني (4 – 6 ساعات)، ويزيد من خطر الفساد الرئيسية خلل2،3،4. نظراً لطبيعة ثابتة لخدمات العملاء، تقييم الدالة أو التدخلات العلاجية غير ممكنة في الوقت الفاصل بين شراء الجهاز وزرع الأعضاء. هذا وجود قيود خاصة في المعايير الموسعة المانحين بما في ذلك قلوب تبرع بعد الوفاة الدورة الدموية (DCD)، خلق عقبة للتغلب على الفجوة الكبيرة بين الطلب وتجمع الجهات المانحة الحالية5،6. لمعالجة هذا القيد، ت نضح قلب الموقع وقد اقترح كأسلوب الرواية، وشبه الفسيولوجية القلوب المتبرع بها الحفاظ على التقليل إلى أدنى حد من التعرض للبرد الاسكيمية بتوفير اﻷوكسيجين، بيرفوساتي الغنية بالمغذيات إلى القلب أثناء حفظ وقت 1 , 7 , 8.

ت نضح قلب الموقع

إحدى الطرق الأكثر استخداماً لتحويله فحص الموقع من قلب معزولة من نضح لانجيندورف. في هذا الأسلوب، عرضته أوسكار لانجيندورف في عام 1895، تدفق الدم إلى الشرايين التاجية، وخارج الجيب التاجي للقلب معزولة، مع القلب في فارغة وضرب الدولة9،10. أشب السريرية في وضع لانجيندورف مع الجهاز "نظام رعاية الجهاز ترانسميديكس" (OCS) قد ثبت غير أدنى لخدمات العملاء في الحفاظ على المعايير القياسية المانحة القلوب1، وسهلت السريرية زرع قلوب DCD 11. ومع ذلك، هناك شواغل بشأن قدرة الجهاز على تقييم صلاحية الجهاز، كما تم تجاهل عدد من قلوب المانحة كان يعتقد في البداية أن تكون الأولى بعد نضح على مكتب الدعم الدستوري3. مكتب الدعم الدستوري يدعم القلب في الوضع (غير العاملين) لانجيندورف، وهكذا تمتلك قدرة محدودة لتقييم وظيفة الضخ ل القلب3،12. مجموعة متزايدة من الأدلة تشير إلى أن المعلمات الوظيفية توفر أفضل طريقة لتقييم صلاحية الجهاز، مما يوحي بأن الأنصبة المقررة لوظيفة القلب قد تصبح أداة موثوقة للتقييم والاختيار من القلوب للزرع خلال أشب3 13، ،،من1214، علاوة على ذلك، توحي الدراسات لدينا في الموقع السابق perfused القلوب الخنزير أن أشب في وضع العمل ينص على تعزيز الحفاظ على الوظيفية للقلب أثناء 15،نضح الفاصل الزمني16.

يجب أن تمتلك جهاز أشب قادرة على الحفاظ على القلب في وضع عامل على مستوى التشغيل الآلي للحفاظ على أمان ودقة التحميل المسبق و afterload ومعدلات التدفق. أيضا، ينبغي أن يتمتع هذا نظام المرونة اللازمة لتيسير التقييمات الشاملة لوظيفة القلب التي يتعين الاضطلاع بها. أشب جهاز يستخدم هنا مجهز ببرامج مخصصة 1) يوفر ويحافظ المطلوب الابهري (Ao) واليسار الرجفان (LA) الضغط/تدفق و 2) يوفر تحليل في الوقت الحقيقي لمعلمات الفنية والتقييم البصري للطول الموجي الضغط مع الحد الأدنى من الحاجة للإشراف. هو الحصول على بيانات الضغط مع محولات الضغط القياسية مملوءة بسائل، وهو الحصول على بيانات التدفق مع تحقيقات تدفق دوبلر وقت العبور. هذه الإشارات هي رقمية باستخدام جسر ومدخلات التناظرية، على التوالي. يتم وضع القلب أفقياً مع ارتفاع طفيف بسفن كبيرة في غشاء سيليكون لينة. المرفقات كانوليشن تمر عبر الغشاء، دمج دائرة امتثال لقذف البطين مثبط. والهدف من هذا العمل تزويد الباحثين في مجال زرع القلب مع بروتوكول لتحويله نضح الموقعية والتقييم للقلب، وفي ظل الظروف نورموثيرميك، وشبه الفسيولوجية في وضع العامل، في نموذج الثدييات كبيرة (يوركشاير خنزير).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وأجريت جميع الإجراءات في هذه المخطوطة امتثالا للمبادئ التوجيهية "المجلس الكندي لرعاية الحيوانات" ودليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. البروتوكولات بموافقة اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان من جامعة ألبرتا. تم تطبيق هذا البروتوكول في الخنازير يوركشاير الأحداث الإناث بين 35 – 50 كجم. جميع الأفراد المشاركين في إجراءات أشب تلقوا تدريبا السلامة الأحيائية السليمة.

1-مرحلة ما قبل الجراحية التحضير

  1. وضع الدائرة الجهاز بشكل صحيح على جهاز العربة وتركيب غشاء السيليكون الدعم داخل قاعة الهيئة. Ao، الشريان الرئوي (السلطة الفلسطينية) ونقاط اتصال ليتبين في الشكل 1.
  2. تثبيت أشب أنابيب الشبكة (ممثلة في الشكل 2 أ، ب) مكساج والتصفية. إرفاق خطوط المياه المبادلات الحرارية وأنابيب الغاز اكتساح مكساج.
  3. مكان التدفق يسبر لقياس الجيوب التاجي/السلطة الفلسطينية وتدفق لوس أنجليس في الأنبوب المقابلة.
  4. قم بتوصيل محولات الضغط Ao ولوس أنجليس الخطوط الممثلة في الدائرة.
  5. التأكد من أن كافة اتصالات أنابيب مرفقة بشدة وجميع ستوبكوكس وتأمين نظام إغلاق بشكل صحيح في مواقع فاتحة.
  6. رئيس الوزراء على حلبة مع 750 مل من المخزن المؤقت المعدل كريبس-هينسيليت (كلوريد الصوديوم، 85؛ بوكل، 4.6؛ ناكو3، 25؛ خ2ص، 1، 2؛ MgSO4، 1، 2؛ الجلوكوز، 11؛ وكاكل2، 1.25 ملمول/لتر) الذي يحتوي على الزلال 8%. إزالة الهواء المضخات Ao ولوس أنجليس بوضع مخرج المضخة فوق المدخل حيث أن يترك الهواء مضخة الدائرة (الشكل 3). الحل عادة لا تحتاج إلى أن تأكسد قبل بدء نضح.
  7. بدء البرنامج بعد الرفع يتم بثها المضخات Ao ولوس أنجليس وهو معبي في الدائرة.

2-أشب برامج التهيئة والتعديلات

ملاحظة: جهاز أشب المستخدمة هنا مجهز ببرنامج حاسوبي مخصص للسماح للسيطرة على سرعة المضخة من أجل تحقيق والمحافظة على الرغبة الضغوط Ao ولوس أنجليس. أيضا هذا البرنامج يحلل معلمات الفنية ويوفر إجراء تقييم بصرية لضغط الطول الموجي (الشكل 4).

  1. لبدء تشغيل البرنامج أشب، انقر فوق اختصار البرنامج على جهاز العرض.
  2. في الصفحة "إعدادات"، انقر فوق "تهيئة". سوف تظهر رسالة تهيئة في المجلس (الشكل 5).
  3. في نفس الصفحة، صفر أجهزة استشعار تدفق النقر فوق "تدفق صفر لوس أنجليس" و "صفر تدفق السلطة الفلسطينية". سوف تظهر الرسالة في المجلس.
  4. ضبط ارتفاع محولات الضغط إلى ارتفاع الدعم السليكون. إلى الصفر محولات الضغط، فتح في Ao ومحولات الضغط لوس أنجليس (وأي محولات أخرى للتحقق من الضغط) في الغلاف الجوي، ثم انقر فوق الزر "صفر كل الضغوط". سوف تظهر الرسالة في المجلس.
  5. في الصفحة "الرئيسية"، وزيادة سرعة ضخ Ao تدريجيا وصولاً إلى النقطة حيث يظهر التدفق من قنية Ao في قاعة الهيئة. في النظام الحالي، ويتحقق ذلك بالثورات 900-1000 في الدقيقة (RPM).
  6. إضافة 750 مليلتر دم في حل بيرفوساتي لكي بيرفوساتي إجمالي الحجم 1.5 لتر (كما هو موضح في "الجراحة، وحصاد الدم، والمشتريات القلب" القسم) وثم زيادة مضخة LA PRM (800-900 دورة في الدقيقة) بحيث لا يزال لا يوجد هواء في قنية LA أو أنابيب LA تحت الغشاء الدعم سيليكون.
  7. بعد تهيئة البرنامج المسيطر وإلغاء بث جهاز أشب، قد تمضي المانحة قلب المشتريات.

3-الأعمال التحضيرية والتخدير

  1. إدارة 20 مغ/كغ الكيتامين و 0.05 مغ/كغ من الأتروبين عضليا لتخدير.
  2. نقل الخنازير إلى جناح العمليات الجراحية ومكان الخنزير على طاولة العمليات مع منضدية التدفئة للحفاظ على نورموثيرميا.
  3. تيتراتي معدل تدفق الأكسجين لتحريض قناع حسب وزن الحيوان ونظام مخدر. ينبغي أن يكون تدفق الأكسجين للدوائر دائرة مغلقة مخدر 20-40 مل/كغ.
  4. قم بتشغيل إيسوفلوراني إلى 4-5%؛ بعد دقيقة واحدة أو اثنتين وهذا قد تنخفض إلى 3%.
  5. تقييم عمق التخدير. الخنزير في الطائرة الجراحية إذا لم يكن هناك لا منعكس الانسحاب استجابة للحوافز الضارة.
  6. بعد تأكيد عمق التخدير المناسبة، انتقل إلى التنبيب.
  7. ضع نبض التاكسج المسبار على اللسان (يفضل) أو الإذن. ينبغي أن تظل تشبع الأكسجين تقاس pulse oximetry فوق 90%.
  8. يحلق بقع من الشعر في مناطق الكوع الأيمن والأيسر، وخنق اليسار. يغسل زيوت الجلد بالماء والصابون وشطف مع فرك الكحول ويجف تماما. وضع الأسماء وتخطيط القلب. تجنب التدخل في سلك الرصاص مع موقع الجراحية. الاتصال بالعملاء المتوقعين إلى المواقع الصحيحة.
  9. للمحافظة على التخدير، ضبط تدفق الأوكسجين (20 – 40 مل/كغ)، وسعر الغاز الاستنشاق (1-3%). ينبغي أن يكون معدل ضربات القلب 80 – 130 نبضة/دقيقة معدل التنفس يجب أن يكون 12 – 30 نفسا في الدقيقة.
  10. حلق وغسل وإعداد الموقع شق أسيبتيكالي.

4. جمع الدم والقلب المشتريات

  1. تقييم مستوى التخدير كل الدنيا كل 5 دقائق للتأكد من أن الطائرة الجراحية (لا منعكس دواسة ولا منعكس الطرفة، لا الاستجابة للمحفزات مؤلمة).
  2. نفذ ستيرنوتومي وسيط.
    1. تحديد جوجولوم والرهابه كمعالم.
    2. استخدام اليكتروكاوتيري، وتطوير خط الوسط بين معالم بتقسيم الأنسجة تحت الجلد واللفافة بين ألياف عضلة صدرية كبيرة.
    3. علامة خط الوسط على طول عظم القصية مع الكي. تنفيذ العظم القصية مع منشار الكهربائي أو تعمل بالهواء. لمنع إنشاء الأضرار التي تلحق بالهياكل الأساسية (مثل تامور براتشيوسيفاليك الوريد والشريان إينوميناتي)، المضي تدريجيا مع المنشار.
    4. التراجع عن القص تدريجيا، استخدام ضام القصية. لتجنب التوتر المفرط وإصابة الأوعية الدموية، لا مكان ضام جداً الآن cranially.
    5. مجاناً الأربطة ستيرنوبيريكارديال من السطح الخلفي لعظم القص باستخدام الكي.
    6. فتح في تامور مع مقص ميتزينباوم وإصلاح الحواف التامور للقص باستخدام خياطة الحرير 1-0.
  3. تمديد شق خط الوسط cranially من 2 – 3 سم، وتكشف عن الشريان السباتي المشترك الحق والداخلية حبل الوريد.
  4. الحصول على التحكم الدانية والبعيدة للسفن بتطويق هذه السفن مع العلاقات الحريرية (2-0).
  5. ربط علاقات يطوق الجمجمة على كل سفينة.
  6. فتح الأمامي 1/3 لكل سفينة مع 11-شفرة وقم بإدراج غمد 5 – 6 في كل سفينة. شياثيس التعادل التعادل يطوق والذيلية حول كل سفينة للحصول كل منها.
  7. مراقبة الضغوط الوريدي الشرياني والمركزية بتوصيل كل غمد بضغط على المفاتيح.
  8. تسليم 1,000 U/كغ الهيبارين عن طريق الوريد.
  9. ضع خياطة محفظة البولي بروبلين-سلسلة 3-0 حول أطرافهم أذينية الحق وتأمينه مع فخ.
  10. داخل خياطة محفظة السلسلة، إنشاء شق 1 سم على أطرافهم استخدام شفرة 11. إدراج قنية وريدية ذات مرحلتين (28/36 الأب) داخل شق وموقف نصيحة القاصي في IVC. تأمين القنية بالفخ تينج إلى القنية الوريدية. مراقبة المنفذ القنية مع المشبك أنابيب.
  11. من مرحلتين قنية وريدي توضع في الاذين الأيمن، جمع 750 مليلتر دم كله من الخنزير تدريجيا على مدى فترة 15 دقيقة في حاوية زجاج يعقم، وفي الوقت نفسه استبدال وحدة التخزين مع 1 لتر محلول البلوراني متساوي التوتر مثل ألف بلاسماليتي
  12. إضافة الدم إلى حلبة التروية (التي قد تم أعدادا مسبقاً مع المخزن المؤقت 750 مل كريبس-هينسيليت التي تحتوي على 8% الزلال) للوصول إلى وحدة تخزين نهائي من 1.5 لتر بيرفوساتي. بيرفوساتي مزيج 1:1 كريبس-هينسيليت التي تحتوي على 8% الزلال الحل والدم كله من المانحين الحيوانية 17.
  13. ضع إبرة كارديوبليجيا (14-16) في Ao تصاعدي وتأمينه مع فخ.
  14. الاتصال قنية كارديوبليجيا بكيس كارديوبليجيا وإضافة 100 مل دم إلى 400 مل كارديوبليجيا (حل مستشفى سانت توماس) للوصول إلى وحدة تخزين نهائي من 500 مل الدم كارديوبليجيا.
  15. Euthanize الخنازير اكسسانجوينيشن. إذا كانت تعتزم إضافة المزيد من الدم بيرفوساتي بعد ابتداء من نضح (وفقا لأهداف الدراسة) وجمع الدم وإضافة 10 – 30 U/mL الهيبارين إليها وتخزينها في حاوية زجاجية أو كيس من بلاستيك على 4 درجة مئوية لفترات قصيرة (ساعة
  16. عبر المشبك Ao تصاعدي مع المشبك Ao وتسليم الحل كارديوبليجيك في جذر Ao.
  17. بعد الانتهاء من تقديم حل كارديوبليجيك، إزالة الصليب-المشبك وتؤدي كارديكتومي.
    1. لسهولة إرفاق Ao والسلطة الفلسطينية على القنية الممثل، جزئيا تشريح Ao تصاعدي من السلطة الفلسطينية باستخدام مقص ميتزينباوم.
    2. الأجوف فينا أعلى وأدنى، ترك حوالي 1 سم طول في كل قطاع.
    3. فصل القلب عن منصف الخلفي من ترانسيكتينج الأوردة الرئوية.
    4. المكوس قلب ضمان جميع Ao شراء سفن قوس جنبا إلى جنب مع شريحة من تنازلي Ao. الحفاظ على ما يصل إلى التشعب السلطة الفلسطينية.
  18. وزن القلب فارغة. مقدار الزيادة في الوزن على مدى فترة الحفاظ على الموقع السابق يمكن استخدامها كمقياس لذمة الجهاز.

5-التنسيب للقلب على جهاز أشب والشروع في التروية

  1. قطع الأنسجة الزائدة حول LA مع مقص ميتزينبوم وقص بين الأوردة الرئوية لإنشاء من فوهة مشتركة.
  2. المكان خياطة محفظة-سلسلة حول الفوهة LA استخدام خياطة البوليبروبيلين 3-0.
  3. خياطة وإغلاق الأجوف فينا أقل شأنا بخياطة البوليبروبيلين 3-0. ترك الأجوف فينا متفوقة مفتوحة في بداية نضح لضمان البطين الأيمن (RV) يبقى decompressed حتى يتحقق إيقاع منظم واستعد بيرفوساتي.
  4. وضع قنية لوس أنجليس في الفوهة لوس أنجليس وتأمينه مع فخ (الشكل 6).
  5. بلطف الضغط في البطينين لإزالة الهواء القلب "من 5.5. وإضافة إلى 5.7. كزيادة سرعة ضخ Ao إلى 1600 دورة في الدقيقة كالضغط بلطف القلب. يتم إخراج الهواء المتبقي في الجذر أو من خلال فروع الاستكمالية وسوبكلافيان.
  6. إرفاق Ao قنية Ao المضمنة في غشاء السيليكون. تأمين Ao حول القنية مع ربطه عنق حرير. تقليم Ao لتحقيق كذبة سليم دون توتر أو مجعد.
  7. زيادة سرعة ضخ Ao إلى 1600 دورة في الدقيقة. يتم إخراج الهواء المتبقي في الجذر أو من خلال فروع الاستكمالية وسوبكلافيان.
  8. قم بتوصيل خط التصريف Ao الشريان إينوميناتي. تأمين الاتصال مع ربطه عنق حرير.
  9. الفخ الفوهة الشريان subclavian الأيسر مع ربطه عنق حرير. تأمين الإغلاق مع فخ والمفاجئة. من خلال الفوهة الشريان subclavian، ضع غمد مقدم (5f). تأكد من أن طول القسطرة وتوجهها يتم بشكل صحيح تعديل بحيث أنها لا تتداخل مع وظيفة صمام Ao.
  10. الاتصال الضغط على المفاتيح أو إلى منفذ الجانب غمد المقدم.
  11. قراءة الضغط أو على جهاز العرض. ضبط سرعة مضخة Ao للوصول إلى ضغط متوسط من 30 ملم زئبق. عند هذه النقطة (الوقت 0)، سوف قد بدأت نضح في الوضع غير العاملين (طريقة لانجيندورف) وظهور بيرفوساتي deoxygenated الظلام في خط السلطة الفلسطينية عاكس لإعادة تدفق الشريان التاجي. تعيين جهاز ضبط وقت لمتابعة مدة نضح إذا لزم الأمر.
  12. بدوره على مبادل حراري وضبط درجة حرارة إلى 38 درجة مئوية. بيرفوساتي سوف الحارة يصل إلى 37-38 درجة مئوية ج في حوالي 10 دقيقة. التروية نورموثيرميك من قلب الخنزير، الحفاظ على درجة الحرارة في 38 درجة مئوية في جميع أنحاء التروية.
  13. الاحتفاظ نضح في وضع غير العاملين خلال الساعة الأولى من نضح. ضبط سرعة مضخة لوس أنجليس لإبقاء الضغط لوس أنجليس في 0 ملم زئبق.
  14. وبمجرد أن درجة الحرارة بيرفوساتي > 34 درجة مئوية، تقييم ضربات القلب ووتيرة وديفيبريلاتي كالمطلوبة (جولات 5 – 20). كفالة يتم ضغط القلب تماما قبل محاولة تقويم نظم القلب.
  15. تحقق من حالة الغازات المذابة استخدام محلل غازات دم. ضبط خليط الغاز للمحافظة على الرقم الهيدروجيني: 7.35-7.45، الشرياني الضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون (فCO2): 35-45 ملم زئبق، والضغط الشرياني الجزئي للأكسجين (فس2): 100 – 150 مم زئبق، والأكسجين تشبع (حتى2) إيه ناين فايف %.
  16. بمجرد القلب نورموثيرميك وفي إيقاع مستقرة، اضطر الأجوف فينا متفوقة.
  17. إرفاق مؤقتة تنظيم ضربات القلب يؤدي إلى الجدار حق أذينية ووتيرة القلب في وضع الدواء على 100 نبضة في الدقيقة.
  18. إرفاق أقطاب كهربية epicardial على سطح صلب.
  19. قم بالتبديل إلى وضع العامل بعد ح 1 من نضح في وضع لانجيندورف. لهذا الغرض، أدخل الرغبة في لوس أنجليس الضغط (عادة من 6 – 8 مم زئبق) على الجانب الأيسر من الصفحة الرئيسية، في المقطع "اللفة المطلوبة" من البرنامج، وانقر فوق الزر بدء حلقة مفرغة. وضع العامل المنشط سوف يظهر كزر أخضر، وسرعة مضخة LA تلقائياً زيادة ونقصان للوصول والمحافظة على الضغط LA المطلوب.
  20. كما يبدأ القلب في العمل، سوف تنخفض مقاومة الأوعية التاجية أسفر ضغط االنقباضي منخفضة. ضبط سرعة مضخة Ao للحفاظ على ضغط 40 مم زئبق انبساطي Ao ك afterload أثناء التروية في وضع العامل.

6-التمثيل الغذائي الدعم خلال أشب

ملاحظة: جهاز نضح الحلول، بما في ذلك حل المخزن المؤقت كريبس هينسيليت، تحتوي عادة على الجلوكوز كالركيزة للطاقة الأولية.

  1. التحقق من مستوى الجلوكوز (على سبيل المثال مع تحليل غاز الدم) على فترات منتظمة خلال التروية. وفقا لمعدلات الاستهلاك، استخدام جلوكوز استبدال مضخة ضخ قياسية جرعات ضخ و/أو بلعه الشرياني المستمر، للاحتفاظ بتركيز 6-8 مليمول/لتر من السكر في جميع أنحاء التروية الشريانية.
  2. باستخدام مضخة حقن منفصلة، تسليم يو 2/ح الأنسولين إلى بيرفوساتي في جميع أنحاء التروية، تغيير معدل ضخ الأنسولين وفقا للأهداف الدراسة.
  3. Β-أدرينوسيبتور التحفيز للقلب، تسليم 0.08 ميكروغرام/دقيقة من الابينفرين إلى بيرفوساتي استخدام مضخة ضخ قياسية، وتستمر طوال التروية. وبدلاً من ذلك، يمكن استخدام ضخ 4 ميكروغرام/دقيقة من الدوبوتامين.

7-مضادة للميكروبات والمضادة للالتهابات وكلاء

  1. إضافة المضادات الحيوية واسعة الطيف (مثل 3.375 غراما من البيبراسيللين-تازوباكتام) إلى بيرفوساتي في بداية التروية.
  2. إضافة العوامل المضادة للالتهابات (مثل 500 ملغ methylprednisolone) إلى بيرفوساتي وفقا لأهداف الدراسة، إذا لزم الأمر.

8-تقييم الدالة

ملاحظة: أشب مراقبة البرامج تلقائياً يحسب ويسجل مؤشرات الحالة المستقرة الفسيولوجية والوظيفية كل عشر ثوان.

  1. تقييم لحالة مستقرة وظيفة الانقباضي والانبساطي
    1. لتسجيل البيانات حالة ثابتة، ومن خلال غمد المقدم وضعت في وقت سابق في الشريان سوبكلافيان، وتقييم وضع قسطرة ضفيرة مملوءة بسائل في البطين الأيسر (LV) أثناء وجوده في وضع العامل.
      1. مسح القسطرة ضفيرة مع المالحة ووضع سلك دليل داخله.
      2. برفق إدراج القسطرة قنية غمد وضعه مسبقاً في الشريان سوبكلافيان. بمجرد أن يمر عبر صمام Ao، إزالة جويديويري بطء وتوصيل القسطرة ضفيرة إلى خط الضغط المنخفض.
      3. اتبع موجه الضغط المنخفض على جهاز العرض. جزء موجه الضغط االنقباضي سوف تصل إلى الصفر عندما القسطرة قد وضعها بشكل صحيح داخل العائلة من المذكرة، هذه الخطوة فقط ممكن في وضع العامل حيث يجب فتح صمام Ao عادة للقسطرة ضفيرة ليتمكن من دخول قاعة. حالما يتم وضعها في الوقف قسطرة ضفيرة ومتصلة بمحول الضغط المنخفض، وسيتم تسجيل معدل الحد الأقصى والحد الأدنى LV تغير الضغط (dP/dT min و max dP/dT) تلقائياً.
    2. تحديد أداء عضلة القلب بالفهرسة flow يقاس على خط لوس أنجليس، لكتلة القلب (mL·min ·g– 1– 1)، وفي ضغط LA ثابت معين (6-8 ملم زئبق)، وضغط االنقباضي Ao من عيار 40 ملم زئبق، ومعدل ضربات القلب من 100 beats·min-1. الضغط LA يساوي الناتج القلب، افتراض وجود لا قصور Ao. دراسة الموجي Ao الضغط للتأكد من وجود لا قصور Ao.
  2. تقييم أعمال preload السكتة الدماغية ريكرويتابل (برسو)
    ملاحظة: برسو هي علاقة خطية بين حجم نهاية الانبساطي وعمل السكتة الدماغية LV (لفسو) ويمثل مؤشر لتقييم وظيفة البطين، مستقلة عن التحميل المسبق، وأفتيرلواد، وحجم18،بطين19. ويمكن قياس برسو مع هذا النظام بطريقة غير الغازية كما هو موضح أدناه13.
    1. إزالة القسطرة ضفيرة من الوقف، حيث القسطرة قد حمل عدم انتظام ضربات القلب أثناء تحليل برسو سوف تؤثر سلبا على دقة النتائج.
    2. على الصفحة الرئيسية، في المقطع "التقاط PVL"، ضبط معدل الانخفاض في سرعة المضخة LA المطلوب أثناء التحليل (عادة 100-200 لفة في الدقيقة) والمطلوب وقت التحليل سوف تجري خلالها (عادة 10 – 12 s) (الشكل 4).
    3. بعد إجراء التعديلات المشار إليها أعلاه، انقر فوق "سجل PVL". البرنامج سوف تلقائياً إنهاء وضع العامل وتدريجيا خفض LA المضخة في الدقيقة أثناء تسجيل الضغط لفسو ولوس أنجليس في وقت واحد. في ختام جمع البيانات، سيقوم البرنامج الانحدار الخطي في dataset المكتسبة حديثا تسفر عن برسو. بعد اكتمال البرنامج أشب التحليل، ستظهر رسالة على الصفحة الرئيسية، تظهر معامل الارتباط للتحليل. اضغط على "موافق" إذا كان من المستصوب أن معامل (رفالوي) (عادة > 0.95). وسيتم تسجيل نتائج التحليل برسو.
    4. بعد القيام بالتحليل، للعودة إلى التروية في وضع العمل، انقر فوق "الصحافة لبدء وضع العامل؛" وإلا سيستمر البرنامج في وضع لانجيندورف (غير العاملين). الزر الرمادي ستتحول إلى اللون الأخضر يشير إلى عودة إلى وضع العامل. إذا تكرر الحاجة إلى تحليل برسو، قبل كل محاولة جديدة تكفل أن قيم الضغط/تدفق للعودة إلى القيم السابقة حالة ثابتة.

9. تقييم الأيضية للموقع السابق Perfused القلب

  1. تقييم حالة القلب الأيضية وبيرفوساتي خلال أشب، باستخدام المعلومات التي تم الحصول عليها من تحليل العينات بيرفوساتي غاز الدم التي تم جمعها من Ao (الشرياني)، وخطوط السلطة الفلسطينية (وريدية) كل ح 1 – 2.
  2. القيام بتحليل غاز الدم (كل 1 – 2 ح) لمراقبة الغاز والدولة الأيونية بيرفوساتي. ضبط تكوين الغاز (س2 و CO2) واكتساح السرعة للمحافظة على الرقم الهيدروجيني 7.35-7.45، باو2 من 100 – 150 مم زئبق، و باكو2 من 35-45 ملم زئبق. ضبط والحفاظ على تركيز أيونى بيرفوساتي البوتاسيوم والكالسيوم في نطاق الفسيولوجية أثناء التروية (مثلاً بإضافة كلوريد الكالسيوم إذا لزم الأمر).
  3. استخدام المعلومات التي تم الحصول عليها من تحليل غازات الدم وتدفق الدم الشريان التاجي لحساب المعلمات الأيضية. على سبيل المثال، حساب استهلاك الأوكسجين احتشاء عضلة القلب (المرصد2)، والوقف الكفاءة الميكانيكية (لي) على النحو التالي:
    1. تحديد المرصد2 (مل س2 · دقيقة-1 · 100 غرام-1) مضاعفة تدفق الدم التاجي (البرازيلي لكرة القدم) بالفرق الشرياني الوريدي في محتوى الأكسجين (كاو2 – غارتر2).
      المرصد2 = [تساو2 -غارتر2 (مل س2 · 100 مل-1)] × البرازيلي لكرة القدم (مل-دقيقة-1 . 100 غرام القلب كتلة)، حيث؛
      محتوى الأكسجين الشرياني (كاو2) = [1.34 (مل س2 . ز غبطة-1) × × التركيز (ز · 100 مل-1) غبطة تشبع الأكسجين (%)] + [(مل س2 · ملم زئبق-1 · 100 مل-1) × 0.00289 باو2 (مم زئبق)]
      محتوى الأكسجين وريدي (غارتر2) = [1.34 (مل س2 ز · غبطة-1) × × التركيز (ز · 100 مل-1) غبطة تشبع الأكسجين (%)] + [(مل س2 · ملم زئبق-1 · 100 مل-1) 0.00289 × الخاصة2 (مم زئبق)]
    2. حساب الكفاءة الميكانيكية LV (لي) على النحو التالي:
      لي = لفسو (ي. تغلب-1)/المرصد2 (ي. تغلب-1) حيث
      السكتة الدماغية العمل = {يعني من فئة الضغط الشرياني (ملم زئبق)-لوس أنجليس الضغط (ملم زئبق)} × {تدفق LA (مل. دقيقة-1)/القلب معدل (يدق. دقيقة-1)} × 0.0001334 (ي. مل-1 . ملم زئبق-1)، و
      المرصد2 (ي. تغلب-1) = {المرصد2 (مل-دقيقة-1)/معدل القلب (يدق. دقيقة-1)} × 20 (جولات. مل-1)

10-إزالة القلب من جهاز أشب في نهاية التروية

  1. الخروج من وضع العامل. إحضار مضخة LA دورة في الدقيقة إلى الصفر.
  2. إنقاص Ao المضخة RPM إلى الصفر.
  3. إزالة ضفيرة ومانعات.
  4. إزالة كافة المرفقات إلى القلب بسرعة.
  5. وزن القلب فارغة لتحديد درجة تشكيل ذمة احتشاء عضلة القلب.
  6. بسرعة أخذ عينات الأنسجة من الحجم المناسب من البطينين الأيمن والأيسر ووضعها في جل درجة الحرارة (OCT) قطع الأمثل، الفورمالين و/أو الأداة تجميدها في نيتروجين سائل. تخزين العينات لإجراء تحقيقات في المستقبل (أكتوبر والتقاط العينات المجمدة في ثلاجة-80 درجة مئوية، عينات الفورمالين المخزنة في حاوية محكمة الإغلاق بشكل صحيح في درجة حرارة الغرفة).
  7. قم بإغلاق البرنامج؛ سيتم حفظ كافة البيانات المسجلة.
  8. تجاهل الأنسجة المتبقية، والدم والمواد النشطة بيولوجيا وتستخدم مكونات جهاز أشب وفقا لبروتوكولات المؤسسية.
  9. تنظيف العربة أشب استخدام سطح صلب سانيتيزينج نظافة (مثل الإيثانول 70%) بدقة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

القلب عادة في بداية التروية (في وضع غير العاملين)، سوف تستأنف على إيقاع الجيوب الأنفية عندما تقترب درجة حرارة النظام وبيرفوساتي نورموثيرميا. عند الدخول في وضع العامل، كما الضغوط LA تقترب من القيم المطلوبة، ينبغي التقيد بقذف على اقتفاء أثر ضغوط Ao وينبغي زيادة تدفق لوس أنجليس (انعكاس لإخراج القلب) تدريجيا. في نموذج خنزير يوركشاير (35 – 50 كجم) ووزن قلب أولى من 180-220 غراما، تدفق LA الأولية ستكون ~ 2,000 مل/دقيقة، وهذا سوف عادة نهج ~ 2,750 مل/دقيقة خلال الساعة الأولى من نضح في وضع العامل. يعرض الرقم 7 الاتجاهات في الضغط Ao (A)، فضلا عن لوس أنجليس والتدفق الشرياني الرئوي (ب) ما يزيد على 12 ساعة نضح.

خلال أشب في وضع العامل الفسيولوجي، من الممكن أيضا مختلف التقييمات الأيضية للقلب. الدم الغاز الأيض/تحليل تقييمات أجريت على عينات بيرفوساتي التي تم الحصول عليها خلال أشب تقديم معلومات شاملة عن حالة ايضية من القلب على مر الزمن (الجدولان 1 و 2) و (الشكل 8 أ، ب)20 . بالإضافة إلى تحليل غاز الدم، يمكن جمع عينات بيرفوساتي وتقييم لمختلف المؤشرات الحيوية مثل الدماغ الببتيد ناتريوريتيك وتروبونين-الأول؛ ومع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن أشب يحدث في نظام مغلق، لا تبادل لحل بيرفوساتي. نظراً لغياب الأجهزة التي استقلاب الطبيعي/مسح هذه العوامل (مثل الكليتين)، عادة ما يلاحظ تراكم المؤشرات الحيوية على مر الزمن في حل بيرفوساتي (الشكل 9).

قد تتضمن التقييم الوظيفي لقلب هذا النظام الأساسي باستخدام معلمات تعتمد على تحميل [بما في ذلك أداء عضلة القلب (مؤشر القلب، CI)، لفسو، معدلات الحد الأقصى والحد الأدنى لتغير الضغط (dp/dt max و min)]، ومستقلة عن تحميل المعلمات ( برسو) (الجدول 3). يوضح الشكل 10 تقييم برسو LV أثناء تخفيض خطي الكمبيوتر التي تسيطر عليها في لوس أنجليس الضغط13. في تجربتنا مع أشب من > 200 قلوب الخنزير و > 10 قلوب البشر، تم استخدام برنامج البرمجيات أشب الآلي بالاشتراك مع وضع إجراءات التشغيل الموحدة أدى إلى تقلب الدنيا جملة-وداخل-عامل في المعلمات الوظيفية. أشب أجهزة وبرمجيات النظام المستخدم هنا قد صممت للمحافظة على الضغط المطلوب وجمع المعلمات الوظيفية مع الحد الأدنى من الحاجة إلى إجراء تعديلات اليدوي، وإننا لاحظنا معامل الارتباط إينتيركلاس (المحكمة الجنائية الدولية) ≥0.9 لكل من المقررة المعلمات (مثل لفسو، و dP/dt ماكس ودقيقة) التي تستأثر بموثوقية ممتازة بين التصنيفات والتصنيفات داخل وإعادة اختبار اختبار. في هذا النظام، يمكن رصد electrocardiographic القلب أثناء التروية أيضا تأخذ مكانها باستخدام قطبين كما هو موضح في البروتوكول، وتقديم معلومات عن معدل ضربات القلب وإيقاع أثناء التروية (الشكل 4).

ويجوز تمديد تقييم القلب خلال أشب لمختلف طرائق التصوير. تخطيط صدى القلب أثناء أشب يمكن أن تقدم معلومات إضافية عن وظيفة عضلة القلب (مثل كسر قذفي البطين) ومعلمات التشريحية (الرقم 11 و الرقم 12). وعلاوة على ذلك، تقييما للمفرج الشريان التاجي ممكن مع التصوير أنجيوجرافيك21.

إجراء تحليل انحدار خطي ويحدد أفضل المعلمات التي ترتبط مع أداء عضلة القلب (مؤشر القلب: mL·min–·g–11) خلال أشب. أظهرنا سابقا أن المعلمات الفنية عموما، وعلى الرغم من اختلاف significant في القدرة قياس المعلمات الوظيفية للتنبؤ بأداء عضلة القلب، يحمل ارتباط مع إخراج القلب. أفضل تنبؤ وظيفية تشمل العمل بالسكتة الدماغية الانقباضية [معامل التحديد (ص2) = 0.759] للوظيفة الانقباضية، والحد الأدنى dP/dt، (ص2 = 0.738) للدالة الانبساطي. من المثير للاهتمام، إظهار معلمات الأيضية وحدها قدرة محدودة جداً على التنبؤ بأداء عضلة القلب (استهلاك الأوكسجين: R2 = 0.28؛ مقاومة الأوعية التاجية: R2 = 0.20؛ لاكتات تركيز: R2 = 0.02). 13 التروية للقلب في وضع عامل نورموثيرميك يوفر فرصة الحصول على تقييمات شاملة التمثيل الغذائي والوظيفي للقلب أثناء المحافظة على الجهاز. وسيوفر جهاز أشب سريرية مع القدرة على دعم قلب الجهات المانحة في وضع العامل فريق الرعاية الصحية الفرصة لاتخذت قرارات حول صلاحية الجهاز على أساس بيانات موضوعية قبل الزرع.

Figure 1
رقم 1: غشاء السيليكون الدعم للقلب- غشاء الدعم المصورة مع القنية الابهري المتكاملة (A)، قنية أذينية الأيسر (ب) وقنية الشريان الرئوي (ج). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
رقم 2: دارة "أشب". (أ) الشكل التخطيطي للدائرة أشب. (ب) أشب الأجهزة المستخدمة في الإعداد لدينا. A = غشاء الجهاز الدائرة وسيليكون الدعم، ب = الخزان، ج = مرشح خط الشرياني، د = مضخة أذينية الأيسر، ه = الابهر مضخة، و = مكساج غشاء ومبادل حراري، ز = خلاط الغاز، ح = أنبوب تدفق الاستشعار، أنا = استشعار الضغط، ي = قفل محبس الحنفية/اللوير. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3: إلغاء بث المضخات عن طريق وضع مأخذ المضخة إلى مستوى أعلى- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4: الشاشة بالرصاص من البرنامج أشب تشغيل عرض معلمات الفنية القلب. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الرقم 5: لقطة من البرنامج أشب تهيئة الشاشة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 6
رقم 6: قنية أذينية الأيسر المغناطيسي المضمونة على الجانب الخلفي الاذين الأيسر. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 7
رقم 7: رصد التدفقات والضغوط أثناء نضح. (أ) الاتجاهات في ضغط الابهر خلال 12 ساعة أشب. (ب) اتجاهات اليسار أذينية والشريان الرئوي تدفقات خلال 12 ساعة أشب الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 8
الشكل 8: الاتجاهات على مر الزمن- استهلاك الأوكسجين احتشاء عضلة القلب (أ) و (ب) وريدي لاكتات تركيز خلال 12 ح أشب الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 9
الشكل 9: الاتجاهات على مر الزمن في تركيز تروبونين القلب بيرفوساتي--أنا خلال 12 ساعة أشب. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 10
رقم 10: تقييم preload السكتة الدماغية ريكرويتابل العمل قلب سوء أداء (رمادي) مقابل قلب يعمل بشكل جيد (أسود). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 11
رقم 11: الممثل الصور مشخصين ثنائي الأبعاد. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 12
الشكل 12: الممثل M-وضع الصور مشخصين. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

معلمات (الشرياني) الابهر معلمات (وريدي) السلطة الفلسطينية
T1 T5 T11 T1 T5 T11
قيم "غاز الدم"
الأس الهيدروجيني 7.28 7.44 7.33 7.25 4.42 7.30
ص. ب2 (مم زئبق) 123.00 149.00 141.00 44.00 55.40 57.80
pCO2 (مم زئبق) 38.00 33.90 42.50 43.00 37.10 46.10
قيم oximetry
خضاب الدم (غ/دل) 4.20 4.10 3.90 4.20 4.10 3.90
حتى2 (%) 100.00 100.00 100.00 64.00 95.50 92.00
قيم المنحل بالكهرباء
ك+ (mmol/لتر) 4.20 4.60 5.20 4.20 4.60 5.20
نا+ (mmol/لتر) 142.00 144.00 149.00 142.00 144.00 149.00
Ca2 + (mmol/لتر) 1.02 1.20 1.40 1.02 1.20 1.40
Cl– (mmol/لتر) 107.00 109.00 114.00 107.00 109.00 114.00
Osm (mmol/كغ) 291.30 292.50 302.40 291.90 292.90 302.40
قيم المستقلب
الجلوكوز (mmol/لتر) 7.00 5.30 5.10 7.00 5.20 5.00
لاكتات (mmol/لتر) 3.00 2.30 2.00 3.10 2.40 1.90
مركز قاعدة حمض
Hco3– (mmol/لتر) 17.60 بوصة 23.10 21.90 18.50 23.70 22.40

الجدول 1: حالة لتحليل غاز الدم التي يتم إجراؤها أثناء السابقين نضح قلب الموقع. Ca2 +، أيون الكالسيوم؛ Cl-، أيون الكلوريد؛ خضاب الدم، خضاب الدم؛ HCO3-، بيكربونات أيون؛ ك+، أيون البوتاسيوم؛ نا+، أيون الصوديوم؛ Osm، الاسموليه؛ باكو2، الضغط الشرياني الجزئي لثاني أكسيد الكربون؛ باو2، الضغط الشرياني الجزئي للأكسجين؛ حتى2، تشبع الأكسجين؛ T1، ح 1 من ت نضح الموقعية (نضح المبكر)؛ T5، ح 5 من ت نضح الموقعية (منتصف نضح)؛ T11، ح 11 من ت نضح الموقعية (أواخر نضح)

الوقت
معلمات الأيضية T1 T5 T11
المرصد2 مل/دقيقة/100 ز 6.68 2.44 1.77
لاكتات وريدي mmol/لتر 3.1 2.4 1.9
وريدي-لاكتات الشرياني الفرق mmol/لتر 0.1 0.1 -0.1
استخدام الجلوكوز ز/ح 1.23 0.6 1.14

الجدول 2: معلمات الأيضية محسوبة باستخدام بيانات تحليل غاز الدم. المرصد2، استهلاك الأكسجين احتشاء عضلة القلب؛ T1، ح 1 من ت نضح الموقعية (نضح المبكر)؛ T5، ح 5 من ت نضح الموقعية (منتصف نضح)؛ T11، ح 11 من ت نضح الموقعية (أواخر نضح)

الوقت
معلمات الفنية T1 T5 T11
CI (مل/دقيقة/g) 10.26 9.66 7.50
سويسري (ملم زئبق * مل) 2253 1965 1323
dP/dT ماكس (ملم زئبق/s) 1781 1783 1482
Sys ف (مم زئبق) 128 121 91
لي (%) 6.69 16.85 21.68
برسو 399 348.38 248.63
مين dP/dT (ملم زئبق/s) -1444 -2350 -844

الجدول 3: حالة المعلمات الوظيفية البطين الأيسر المقررة خلال ت نضح قلب الموقع. CI، مؤشر القلب؛ dP/dT كحد أقصى، وأقصى معدل تغير الضغط؛ مين dP/dT، المعدل الأدنى لتغير الضغط؛ لي، الكفاءة الميكانيكية؛ برسو، عمل preload السكتة الدماغية ريكرويتابل؛ سويسري، السكتة الدماغية العمل؛ Sys ف، systolic ضغط; T1، ح 1 من ت نضح الموقعية (نضح المبكر)؛ T5، ح 5 من ت نضح الموقعية (منتصف نضح)؛ T11، ح 11 من ت نضح الموقعية (أواخر نضح).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

يتم تعريف نضح ناجحة وفقا لأهداف الدراسة؛ ومع ذلك، ينبغي أن يشمل أشب دون انقطاع للمبلغ المطلوب من الوقت ومجموعة كاملة من البيانات في وظيفة القلب خلال نضح. ولهذا الغرض، يجب أن يتبع بعض الخطوات الحاسمة في البروتوكول.

القلب جهاز مع الأكسجين المرتفعة والطلب على الطاقة، وتقليل الوقت الدماغية قبل كانوليشن والتروية هو أحد مبادئ هامة التي يجب اتباعها. عملية الشراء، تصاعد القلب على جهاز أشب، والشروع في نضح ينبغي أن لا تتجاوز 20-30 دقيقة.

لنضح الكفاءة وتقييم وظيفي موثوق، يتحمل عملية تركيب القلب على الجهاز أهمية حاسمة. المحاذاة التشريحية الصحيحة من سفن كبيرة تلعب دوراً هاما في هذا الصدد. يجب شراء القلب بطول كاف للسلطة الفلسطينية والقوس Ao الفروع حيث أن هذه السفن لم تستنفد عند إرفاق القنيات الممثل. من بداية نضح، كفاءة التروية التاجية يلعب دوراً محوريا في حماية القلب أثناء ت نضح الموقعية. بعد بدء تشغيل التروية في وضع غير العاملين، ينبغي رصده وتعديلها على مالا يقل عن 30 ملم زئبق دعم التروية التاجية كفاءة الضغط Ao. مظهر بيرفوساتي deoxygenated الظلام في خط السلطة الفلسطينية عاكس لإعادة تدفق الشريان التاجي. بعد التبديل إلى وضع العامل، ينبغي تعديل Ao الضغط إلى 40 مم زئبق لتوفير ضغط التروية التاجية كافية لقلب العامل.

دييرينج قلب الدوائر و Ao ضروري لأشب ناجحة. وقت إرفاق قنية LA، ستساعد عصر الدوائر في دييرينج القلب. وينبغي أن أوافيكم أي الهواء المتبقي في الوقف أن يتم إخراج عن طريق خط التصريف في الشريان إينوميناتي، مما يقلل من خطر الانسداد التاجي الجوية. ومع ذلك، إذا جوية كبيرة لا تزال في القلب الأيسر عند التبديل إلى وضع العامل، الانسداد التاجي الجوية من الممكن مما أدى إلى انخفاض كبير في وظيفة عضلة القلب.

وهدف النهج الذي قدم توفير منصة استنساخه وموثوق بها للدراسات التجريبية أشب في نماذج الثدييات الكبيرة. هذا نظام يوفر فرصة التروية في وضع عامل الفسيولوجي، ولتقييم واسع النطاق للقلب بيرفوسيد. وهذا يوفر فرصة لتقييم كارديوبروتيكتيفي البروتوكولات الرامية إلى إنعاش الهيئات المانحة المختلة وظيفيا. وييسر هذا النظام التقييمات البسيطة واستنساخه من القلب معلمات الفنية جنبا إلى جنب مع معلمات الأيضية خلال أشب، توفير البيانات الموضوعية التي يمكن استخدامها لتحديد الأجهزة صالحة للزرع. إجراء تقييم شامل من هذا القبيل لها أهمية خاصة عند تقييم المعايير الموسعة تبرعت بقلوب وقلوب تبرع بعد الوفاة الدورة الدموية. وعلاوة على ذلك، وفقا للملاحظات في الإعداد لأشب التجريبية، قلوب perfused في وضع عامل عرض متفوقة الحفاظ على وظيفة الانقباضي والانبساطي على مر الزمن مقارنة بقلوب الحفاظ عليها في وضع لانجيندورف وقد تساعد في توسيع الآمنة الحفاظ على الوقت.

أشب في وضع عامل طريقة فعالة للحفاظ على قلب المتبرع بها وتقييم قدرته على البقاء، ومع ذلك إعداد مصطنعة، تفتقر إلى العديد من الجوانب الفسيولوجية للجسم (مثل الدعم التوازن الهرمونية والغذائية في الوقت الحقيقي، والراديكالية الحرة أنظمة المسح). القلب جهاز مع مطالب الطاقة المتطورة/التمثيل الغذائي. وبالتالي، توفير الدعم الأيضية متسقة وفعالة لقلب perfused له أهمية حاسمة. لقد لاحظنا تراجعا في وظيفة السابقين الموقع perfused القلب، لا سيما أثناء التروية الموسعة مرات22. قد يكون هذا انخفاض يعكس القصور الاستقلابية التي تؤثر على وظيفة العامل perfused وضع القلب. هناك ما يبرر إجراء مزيد من الدراسات لتوصيف الدعم الأيض الأمثل للقلب أثناء أشب. تحديا إضافيا هو مدى تعقيد العمل نضح قلب الوضع. على الرغم من بساطة أشب المحسنة في هذا النظام، تعمل نضح الوضع ينبغي أن يقوم بها أفراد مدربين تدريبا جيدا.

جهاز أشب، مع القدرة على القيام بتقييم شامل وظيفية والأيضية للقلوب في نموذج الثدييات كبيرة، ويوفر إمكانات كبيرة لتطوير البروتوكولات العلاجية متعدية لتحسين القلوب المتبرع بها مختلة/الأمثل . أشب قد تكون بمثابة منصة لإدارة التدخلات العلاجية التي تستهدف طائفة واسعة من الظروف (مثل الاسكيمية ضخه الإصابة)، وتقييم آثارها على المعلمات الأيضية والوظيفية ل القلب perfused12. وعلاوة على ذلك، قد تيسر وضع العامل أشب تمديد فترة الحفاظ على آمنة، مما قد يساعد على التغلب على القيود الجغرافية للتبرع بالأعضاء وتيسير توزيع أفضل للقلوب المتبرع بها.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الدنك يحمل براءات الاختراع السابقين الموقع الجهاز نضح التكنولوجيا والأساليب. حمى الدنك النزفية والجامايكية من المؤسسين والمساهمين الرئيسيين، وشركة تيفوسول

Acknowledgments

وأيد هذا العمل منح من "برنامج بحوث زرع الوطنية الكندية". SH هو المتلقي لكلية الطب وطب الأسنان Motyl سنهم الدراسات العليا في "علوم القلب". حمى الدنك النزفية هي المستفيدة منحة مشاريع البحوث التعاونية (تشرب) في المعونة من العلوم الوطنية ومجلس البحوث الهندسية والمعاهد الكندية للبحوث الصحية.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Debakey-Metzenbaum dissecting scissors Pilling 342202
MAYO dissecting scissors Pilling 460420
THUMB forceps Pilling 465165
Debakey straight vascular tissue forceps  Pilling 351808
CUSHING Gutschdressing forceps Pilling 466200
JOHNSON needle holder Pilling 510312
DERF needle holder Pilling 443120
Sternal saw Stryker 6207
Sternal retractor Pilling 341162
Vorse tubing clamp Pilling 351377
MORRIS ascending aorta clamp Pilling 353617
Surgical snare (tourniquet) set Medtronic CVR79013
2-0 SILK black 12" x 18" strands ETHICON A185H
3-0 PROLENE blue 18" PS-2 cutting ETHICON 8687H
Biomedicus pump drive (modified) Medtronic 540 Modified to allow remote electronic control of pump speed
Biomedicus pump Maquet BPX-80
Membrane oxigenator D 905 SORIN GROUP 50513
Tubing flow module   Transonic Ts410
PXL clamp-on flow sensor Transonic ME9PXL-BL37SF
TruWave pressure transducer Edwards VSYPX272
Intercept tubing 3/8" x 3/32" xX 6' Medtronic 3506
Intercept tubing 1/4" x 1/16" x 8' Medtronic 3108
Heated/Refrigerated Bath Circulator  Grant TX-150
ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer Radiometer 989-963
DLP cardioplegia cannula (aortic root cannula) Medtronics 20613994495406
5F Ventriculr straight pigtail cathter CORDIS 534550S
5F AVANTI+ Sheath Introducer CORDIS 504605A
Emerald Amplatz Guidewire CORDIS 502571A
Dual chamber pace maker Medtronic 5388
Defibrilltor CodeMaster M1722B
Infusion pump Baxter AS50
Surgical electrocautery device Kls Martin ME411
Gas mixer SECHRIST 3500 CP-G
Medical oxygen tank praxair 2014408
Cabon dioxide tank praxair 5823115
Bovine serum albumin MP biomedicals 218057791

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ardehali, A., et al. Ex-vivo perfusion of donor hearts for human heart transplantation (PROCEED II): a prospective, open-label, multicentre, randomised non-inferiority trial. Lancet. 385 (9987), 2577-2584 (2015).
  2. Collins, M. J., Moainie, S. L., Griffith, B. P., Poston, R. S. Preserving and evaluating hearts with ex vivo machine perfusion: An avenue to improve early graft performance and expand the donor pool. European Journal of Cardiothoracic Surgery. 34 (2), 318-325 (2008).
  3. Freed, D. H., White, C. W. Donor heart preservation: Straight up, or on the rocks? Lancet. 385 (9987), 2552-2554 (2015).
  4. Guibert, E. E., et al. Organ preservation: Current concepts and new strategies for the next decade. Transfusion Medicine and Hemotherapy. 38 (2), 125-142 (2011).
  5. Collins, M. J., et al. Use of diffusion tensor imaging to predict myocardial viability after warm global ischemia: Possible avenue for use of non-beating donor hearts. Journal of Heart and Lung Transplantation. 26 (4), 376-383 (2007).
  6. White, C. W., et al. A cardioprotective preservation strategy employing ex vivo heart perfusion facilitates successful transplant of donor hearts after cardiocirculatory death. Journal of Heart and Lung Transplantation. 32 (7), 734-743 (2013).
  7. Iyer, A., et al. Normothermic ex vivo perfusion provides superior organ preservation and enables viability assessment of hearts from DCD donors. American Journal of Transplantation. 15 (2), 371-380 (2015).
  8. Peltz, M., et al. Perfusion preservation maintains myocardial ATP levels and reduces apoptosis in an ex vivo rat heart transplantation model. Surgery. 138 (4), 795-805 (2005).
  9. Liao, R., Podesser, B. K., Lim, C. C. The continuing evolution of the Langendorff and ejecting murine heart: New advances in cardiac phenotyping. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 303 (2), H156-H167 (2012).
  10. Rivard, L., Gallegos, R., Ogden, I., Bianco, R. Perfusion Preservation of the Donor Heart: Basic Science to Pre-Clinical. Journal of Extra Corporeal Technology. 41 (3), 140-148 (2009).
  11. Dhital, K. K., et al. Adult heart transplantation with distant procurement and ex vivo preservation of donor hearts after circulatory death: A case series. Lancet. 385 (9987), 2585-2591 (2015).
  12. Messer, S., Ardehali, A., Tsui, S. Normothermic donor heart perfusion: Current clinical experience and the future. Transplant International. 28 (6), 634-642 (2015).
  13. White, C. W., et al. Assessment of donor heart viability during ex vivo heart perfusion. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 93 (10), 893-901 (2015).
  14. Messer, S. J., et al. Functional assessment and transplantation of the donor heart after circulatory death. Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (12), 1443-1452 (2016).
  15. Hatami, S., et al. Endoplasmic reticulum stress in ex vivo heart prfusion: A comparison between working vs non-working modes. Canadian Journal of cardiology. 33 (10), (2017).
  16. White, C. W., et al. Ex vivo perfusion in a loaded state improves the preservation of donor heart function. Canadian Journal of cardiology. 31 (10), s202 (2015).
  17. White, C. W., et al. A wholeblood-based perfusate provides superior preservation of myocardial function during ex vivo heart perfusion. Journal of Heart and Lung Transplantation. (14), (2014).
  18. Lips, D. J., et al. Left ventricular pressure-volume measurements in mice: comparison of closed-chest versus open-chest approach. Basic Research in Cardiology. 99 (5), 351-359 (2004).
  19. Morita, S. Is there a crystal ball for predicting the outcome of cardiomyopathy surgery? Preload recruitable stroke work, may be a possible candidate. Journal of Cardiology. 71 (4), 325-326 (2018).
  20. Hatami, S., et al. Canadian Society for Transplantation. , Halifax. (2017).
  21. Anthony, C., et al. Ex vivo coronary angiographic evaluation of a beating donor heart. Circulation. 130 (25), e341-e343 (2014).
  22. Sandha, J. K., et al. Steroids Limit Myocardial Edema During Ex vivo Perfusion Of Hearts Donated After Circulatory Death. Annals of Thoracic Surgery. , (2018).

Tags

الطب، 143 قضية، زراعة القلب، نضح الجهاز، المحافظة على عضلة القلب، التقييم الوظيفي، تقييم الأيضية، السابقين الموقع نضح القلب
نورموثيرميك ت نضح قلب الموقع في العمل وضع: تقييم وظيفة القلب والايض
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hatami, S., White, C. W., Ondrus,… More

Hatami, S., White, C. W., Ondrus, M., Qi, X., Buchko, M., Himmat, S., Lin, L., Cameron, K., Nobes, D., Chung, H. J., Nagendran, J., Freed, D. H. Normothermic Ex Situ Heart Perfusion in Working Mode: Assessment of Cardiac Function and Metabolism. J. Vis. Exp. (143), e58430, doi:10.3791/58430 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter