Isolement des cellules souches mésenchymateuses du tissu de pulpe et co-culture avec les cellules cancéreuses afin d’étudier leurs Interactions

Ayşegül Doğan; Selami Demirci; Hüseyin Apdik; Ezgi Avşar Apdik; Fikrettin Şahin

doi:10.3791/58825

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Article de méthode

Isolement des cellules souches mésenchymateuses du tissu de pulpe et co-culture avec les cellules cancéreuses afin d’étudier leurs Interactions

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DOI :

10.3791/58825

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7 janvier 2019

Ayşegül Doğan¹ , Selami Demirci² , Hüseyin Apdik¹ , Ezgi Avşar Apdik¹ , Fikrettin Şahin¹

¹Genetics and Bioengineering, Yeditepe University, ²National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI), Sickle Cell Branch, National Institutes of Health (NIH)

Dans cet article

Résumé

Nous fournissons des protocoles d’évaluation des cellules souches mésenchymateuses isolées de la pulpe dentaire et interactions cellulaires de cancer de la prostate basées sur des méthodes directes et indirectes de co-culture. Moyenne de l’état et les membranes de trans-puits conviennent d’analyser l’activité paracrine indirecte. Ensemencement différemment colorées cellules ensemble est un modèle approprié pour l’interaction cellule-cellule direct.

Résumé

Cancer comme un processus multipas et compliquées de la maladie est non seulement régi par la croissance et la prolifération des cellules individuelles mais également contrôlé par des interactions entre environnement et cellules de tumeur. Identification du cancer et des interactions entre cellules souches, y compris les changements dans l’environnement extracellulaire, interactions physiques et facteurs sécrétés, pourrait permettre la découverte de nouvelles options thérapeutiques. Nous combinons des techniques de culture co connus pour créer un système modèle pour les cellules souches mésenchymateuses (CSM) et le cancer interactions cellulaires. Dans la présente étude, des cellules souches pulpe dentaire (DPSCs) et les interactions entre les cellules de cancer de la prostate dans la PC-3 ont été examinées par des techniques directes et indirectes de co-culture. Moyen de condition (CM) provenant de DPSCs et 0,4 µm taille de pore trans-puits membranes ont été utilisés pour étudier l’activité paracrine. Co-culture de différents types de cellules ensemble a été réalisée pour étudier les interactions cellule-cellule direct. Les résultats ont révélé que CM augmente la prolifération cellulaire et une diminution de l’apoptose dans les cultures de cellules de cancer de la prostate. Les CM et les trans-puits augmenté capacité de migration des cellules du PC-3 cellules. Cellules colorées avec des teintures différentes membranes ont été ensemencées dans les récipients de culture même, et DPSCs ont participé à une structure auto-organisée avec PC-3 cellules sous cette condition de co-culture direct. Dans l’ensemble, les résultats indiquent que les techniques de culture mixte pourraient être utiles contre le cancer et les interactions de MSC comme système modèle.

Introduction

Cellules souches mésenchymateuses (CSM), avec la capacité de différenciation et de contribution à la régénération des tissus mésenchymateux tels qu’OS, cartilage, muscle, ligament, tendon et adipeux, ont été isolés chez presque tous les tissus dans le corps adulte¹ ^, ². autre que fournir l’homéostasie tissulaire en produisant des cellules résidentes dans le cas d’une inflammation chronique ou d’une blessure, ils produisent vital cytokines et facteurs de croissance d’orchestrer l’angiogenèse, système immunitaire et tissu transformant³. L’interaction de MSCs avec tissus cancéreux n’est pa....