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Article de méthode

Modèle de transplantation de membres postérieurs hétérotopiques partiels chez le rat

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DOI :

10.3791/62586

9 juin 2021

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Cet article présente un protocole de transplantation de lambeau ostéocutané hétérotopique partiel chez le rat et ses résultats potentiels dans le suivi à moyen terme.

Résumé

Les allotransplantations composites vascularisées (VCA) représentent l’option de reconstruction la plus avancée pour les patients sans possibilités chirurgicales autologues après un défaut tissulaire complexe. Les transplantations faciales et faciales ont changé la vie des patients défigurés, leur donnant un nouvel organe social esthétique et fonctionnel. Malgré des résultats prometteurs, le VCA est toujours sous-performant en raison de comorbidités d’immunosuppression à vie et de complications infectieuses. Le rat est un modèle animal idéal pour les études in vivo portant sur les voies immunologiques et les mécanismes de rejet du greffon. Les rats sont également largement utilisés dans de nouvelles techniques de préservation de greffes de tissus composites, y compris les études de perfusion et de cryoconservation. Les modèles utilisés pour l’ACV chez le rat doivent être reproductibles, fiables et efficaces avec une morbidité et une mortalité postopératoires faibles. Les procédures de transplantation de membres hétérotopiques répondent à ces critères et sont plus faciles à effectuer que les greffes de membres orthotopiques. La maîtrise des modèles microchirurgicaux des rongeurs nécessite une solide expérience en microchirurgie et en soins aux animaux. Il est rapporté ici un modèle fiable et reproductible de transplantation partielle hétérotopique de lambeaux ostéocutanés chez le rat, les résultats postopératoires et les moyens de prévention des complications potentielles.

Introduction

Au cours des deux dernières décennies, le VCA a évolué en tant que traitement révolutionnaire pour les patients qui souffrent de défiguration sévère, y compris le visage1,les amputations des membres supérieurs2,le pénis3et d’autres défauts tissulaires complexes4,5. Cependant, les conséquences de l’immunosuppression à vie entravent encore une application plus large de ces chirurgies reconstructives complexes. La recherche fondamentale est cruciale pour améliorer les stratégies anti-rejet. L’augmentation du temps de conservation du VCA est é....

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Protocole

Tous les animaux ont reçu des soins sans frais conformément au Guide des NIH pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire. Le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux (protocole IACUC 2017N000184) et le Bureau d’examen des soins et de l’utilisation des animaux (ACURO) ont approuvé tous les protocoles pour animaux. Des rats Lewis mâles consanguins (250-400 g) ont été utilisés pour toutes les expériences.

1. Chirurgie

  1. Anesthésier les rats Lewis par inhalation d’isoflurane. Induire une anesthésie avec 5% d’isoflurane dans la chambre d’induction et maintenir l’anesthésie avec une inhalation d’isoflurane ....

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Résultats

Dans cette étude mono-opérateur, 30 greffes partielles hétérotopiques syngéniques de membres ont été réalisées. Le succès a été défini au jour 21 postopératoire comme l’absence d’échec du VCA ou de complications nécessitant une euthanasie. L’évolution normale du greffon est représentée à la figure 3. La durée moyenne de l’obtention partielle des membres et de l’encart du greffon chez le receveur était de 35 et 105 minutes, respectivement; le temps moyen d’ischémie était de 105 min. Au cours .......

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Discussion

Des modèles de transplantation de membres orthotopiques chez des rongeurs ont été décrits dans la littérature15,16,17; cependant, ils nécessitent une réparation nerveuse, une rattachement musculaire et une ostéosynthèse parfaite du fémur, ce qui peut être une étape très difficile. Ces modèles sont également associés à un taux de morbidité et de mortalité plus élevé chez les rongeurs14,en particulier dans .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont aucune divulgation.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le Bureau du Secrétaire adjoint à la Défense pour les affaires de santé par le biais du Programme de recherche médicale dirigé par le Congrès sous le numéro de bourse. W81XWH-17-1-0680. Les opinions, interprétations, conclusions et recommandations sont celles des auteurs et ne sont pas nécessairement approuvées par le ministère de la Défense.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
24 GA angiocathéterBD Insyte Autoguard381412
4-0 Suture monofilament noir non résorbableEthicon1667Utilisé pour suturer le collier E à l’arrière du cou
Suture 4-0 Coated Vicryl Plus AntibactérienEthiconVCP496
Adson Pince à tissus, 11 cm, 1 x 2 dents avec plate-forme de liageASSIASSI.
Cordons bipolairesASSI228000C
Noir Polyamide Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8cAROSurgicalT04A10N07-13Utilisé pour effectuer les anastomoses microvasculaires
Buprénorphine HClPharmaceutical, Inc42023-179-01
Pince à dilatationOutils de sciences fines (FST)18131-12
Ciseaux de dissection 15 cm, Manche rond de 8 mm de diamètre, Lame droite mince et effilée 7 mm, Motif LipshultzASSIASSI.
Micro Pinces Doubles 5,5 x 1,5 mmOutils de science fine (FST)18040-22
Collier élisabéthainBraintree ScientificEC-R1
Pince 13,5 cm de long, Poignée plate, 9 mm de large Pointes droites 0,1 mm de diamètre (x2)ASSIASSI. JFL31
Halsey Micro Porte-AiguillesOutils de sciences fines (FST)12500-12
Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 unités/mLBD PosiFlush306424
IsofluranePatterson Veterinary14043-704-06
Bijoutier Pince Bipolaire Antiadhésive 11 cm, pointe droite, pointe de 0,25 mm diamètreASSIASSI.
Haubans élastiques Lone StarCooperChirurgical3314-8GUtilisé pour rétracter le ligament inguinal pour la dissection des vaisseaux fémoraux
Écarteurs auto-retenus Lone StarCooperChirurgical3301G
Micro-Mosquito HemostatsOutils scientifiques fins (FST)13010-12Utilisé pour rétracter le coussinet adipeux inguinal distalement
Porte-aiguille, poignée ronde de 15 cm, diamètre 8 mm, mâchoire incurvée superfine de 0,2 mm de diamètre de pointe, sans serrureASSIASSI. B1582
Suture en nylon Noir Monolfilament 8-0, 6,5 mm 3/8cEthilon2808GUtilisé pour ligaturer les branches collatérales sur les vaisseaux fémoraux
Pince osseuse décaléeOutils de science fine (FST)16101-10
S& Pinces vasculaires en T 5,5 x 1,5 mmOutils scientifiques fins (FST)00398-02
Ciseaux WaltonOutils scientifiques fins (FST)14077-09
ATK26426SAS15RVLBPNS11223

Références

  1. Lanteiri, L., et al. Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes. American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).
  2. Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T.

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Transplantation h t rotopiqueAllotransplantation de tissu composite vascularisMod le de transplantation chez le ratTechniques microchirurgicalesPr servation du membreRejet de greffeAnastomose microvasculaireConservation froide statiquePerfusion de membre