להערכת טיפולים בתאי גזע חדש חשוב הלא פולשני המסלול התאים מוזרקים in vivo. סרט הווידאו הזה יראה לכם כיצד לתייג אדם בתאי גזע mesenchymal ו עובריים עם סוכני תחמוצת ברזל מבוסס בניגוד in vivo עבור הבאים MR הדמיה in vivo.
Abstract
בשנים האחרונות, מחקר בתאי גזע הוביל להבנה טובה יותר של הביולוגיה ההתפתחותית, מחלות שונות וההשפעה הפוטנציאלית על רפואה רגנרטיבית. שיטה לא פולשנית כדי לפקח על בתאי גזע המושתלים שוב ושוב in vivo היה מאוד לשפר את היכולת שלנו להבין את מנגנוני הבקרה תא גזע מוות לזהות גורמים trophic ועל מסלולי איתות כי לשפר תא גזע engraftment. MR הדמיה הוכח להיות כלי יעיל עבור בתיאור vivo בתאי גזע עם רזולוציה ליד אנטומי מיקרוסקופיים. על מנת לזהות בתאי גזע עם MR, התאים צריכים להיות מתויג עם תא ספציפי סוכנים בניגוד MR. לענין זה, חלקיקים תחמוצת ברזל, כגון ברזל פאראמגנטי חלקיקי תחמוצת (SPIO), מוחלים, בגלל רגישות גבוהה שלהם לאיתור התא biocompatibility מעולה שלהם. SPIO חלקיקים מורכבים הליבה תחמוצת ברזל ומעיל dextran, carboxydextran או עמילן, ותפקוד על ידי יצירת שדה inhomogeneities המקומי, הגורמות אות ירד ב T2 משוקלל תמונות MR. מצגת זו תדגים טכניקות תיוג בתאי גזע עם החלים קלינית סוכני MR בניגוד עבור שלאחר מכן לא פולשנית של מעקב vivo של תאים שכותרתו עם MR הדמיה.
Protocol
תיוג של hMSC עם Ferucarbotran זוהי טכניקה תיוג אדם בתאי גזע mesenchymal עם Ferucarbotran, תחמוצת ברזל סוכן מבוסס בניגוד עבור MR הדמיה: כדי להתחיל, צלחת התאים 18-24 שעות לפני ההליך תיוג ב T75 צלוחיות בנקודת המ…
Discussion
תיאור פולשני בתאי גזע חיוני לניטור כמעט כל תא גזע טיפול מבוסס. הבנה טובה יותר של קינטיקה ב vivo בתאי גזע שכותרתו, כמו דמיינו על תמונות MR, יכול להוביל את הדרך רציונלי ושימוש יעיל יותר של תא טיפולים מבוססי גזע. מאז אנו משתמשים סוכנים בניגוד החלים קלינית שיטות הדמיה, פרוטוקולים שהוצגו …
Acknowledgements
פרויקט זה מומן על ידי מענק ג'יי טל! SEED ליאון ממכון קליפורניה עבור רפואה רגנרטיבית. טוביאס הנינג המחקר מומן על ידי מענק מן האגודה הגרמנית למחקר (DFG, HE 4578/1-2). אנחנו רוצים להכיר תודה Meneses חואניטו את עצתו על תרבות בתאי גזע עובריים אנושיים.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
D-MEM High Glucose
Reagent
Sigma
D5648
Gelatin
Reagent
Sigma
G1890
dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 %
Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. Cell labeling with the positive MR contrast agent.Gadofluorine M. Eur Radiol. 17, 1226-1234 (2007).
Henning, T. D., Boddington, S., Daldrup-Link, H. E. Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging. J. Vis. Exp. (13), e685, doi:10.3791/685 (2008).