アクチン共沈降アッセイ、F -アクチンへの結合タンパク質の解析のための
Summary
タンパク質は、異なるアクチン結合モジュールを介して繊維状アクチン（F -アクチン）に結合する。このビデオでは、in vitroアッセイで日常的にF -アクチンを結合するタンパク質または特定のドメインを分析するために使用されているアクチンの共堆積、の手順を示しています。
Abstract
細胞内のアクチン細胞骨格は細胞と細胞プロセスの動きを可能にするアクチンフィラメントのネットワークであり、それは緊張を生成し、細胞の形状を維持するのに役立ちます。アクチン細胞骨格が剛構造であるが、それは絶えず改造された動的な構造です。タンパク質の数は、アクチン細胞骨格に結合することができる。 F -アクチンへの特定のタンパク質の結合は、しばしば、細胞生物学的な観察をサポートするために、またはさらに、アクチン細胞骨格のリモデリングによる動的なプロセスを理解することが望まれている。アクチンの共沈降アッセイは、in vitroアッセイで日常的にF -アクチンと特異的タンパク質またはタンパク質ドメインの結合を分析するために使用される。アッセイの基本原則は、F -アクチンと目的のタンパク質のインキュベーション（の全長またはドメイン）、F -アクチンとの共沈降タンパク質のペレットF -アクチンと分析への超遠心ステップを含む。アクチンの共沈降アッセイはアクチン結合親和性との競合アッセイを測定するためにそれに応じて設計することができます。
Protocol
Discussion
アクチンの共沈降は、F -アクチンへの結合specficタンパク質を解析するin vitroアッセイ簡単です。このビデオでは、我々は単純なアクチンの共沈降を行うことができる方法の一例を示す。我々は、F -アクチンを準備する方法を示し、試験されるタンパク質とアクチンの手続き共同沈降を準備。アクチンの共沈降アッセイを行う際のポイントの数を考慮する必要があります。例えば、インキュベーション用緩衝?…
Acknowledgements
HaCaT細胞におけるアクチンの映画のためにUCSFのウィットマンラボで博士プラビーンクマールに感謝します。
References
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