Détection SDS-PAGE/Immunoblot de multimères de Aßi tissu cortical humain homogénats utilisant l'antigène démas

Ce protocole permet de détecter un bêta-malteur dans le tissu cortical humain. Tout d’abord, le tissu homogénéisé est sondé par sonde et clarifié par centrifugation à basse vitesse. Ensuite, des échantillons de réduction bouillis dans un tampon SDS et chargés sur un polyacrylamide.

Les protéines de gel sont transférées sur une membrane de nitrocellulose et la membrane est chauffée à la vapeur dans une solution saline tamponnée au phosphate. Enfin, sur un agitateur orbitaire, la membrane est incubée pendant la nuit dans un anticorps primaire HRP conjugué à un anticorps secondaire, puis dans un réactif de peroxyde luminal avant d’être exposée à un film radiographique. Bonjour, je m’appelle Rebecca Rosen et je travaille dans le laboratoire de Larry Walker au Département de neurosciences du Centre national de recherche sur les primates Yerkes de l’Université Emory.