Évaluation du bilan du moteur et de la coordination des souris en utilisant la poutre d'équilibre

Les déficits de la coordination motrice fine peut être évaluée avec le test de poutre d'équilibre. Performance sur la poutre est quantifiée par la vitesse à laquelle le faisceau est traversée et le nombre de fois que la souris glisse sur la poutre.

L’objectif général de cette procédure est d’évaluer la coordination motrice et l’équilibre chez la souris. La première étape consiste à assembler une poutre d’équilibre avec la position du détecteur de mouvement pour enregistrer la latence de la traversée de la poutre afin de commencer l’entraînement du maer placé sur le point de départ de la poutre d’équilibre et autorisé à traverser vers une plate-forme sûre. Il est parfois nécessaire d’encourager l’animal le long de la poutre vers le point final.

Après un intervalle de 10 minutes entre les essais, maer s’est ensuite entraîné sur un faisceau plus étroit pour permettre une plus grande sensibilité. La dernière étape de la procédure consiste à tester les animaux dressés sur des poutres de différentes largeurs. En fin de compte, on peut obtenir des résultats qui montrent des déficits de coordination motrice et d’équilibre.

Bonjour, je m’appelle Tim Luong et je suis candidat au doctorat en médecine au département de biologie de l’Institut de technologie de Californie. Je m’appelle Holly Carlisle et je suis postdoctorante au département de biologie du California Institute of Technology, et aujourd’hui, nous allons vous montrer comment évaluer l’équilibre et la coordination motrice chez la souris à l’aide du test de la poutre d’équilibre. Maintenant, le principal avantage de cette technique par rapport à d’autres méthodes telles que la tige du rotor, est que le test de la poutre d’équilibre a tendance à être plus sensible aux déficits même subtils de la coordination motrice.

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine comportemental, par exemple si notre coordination motrice et notre équilibre sont affectés dans certains modèles de maladies neurologiques et si nos déficits moteurs sont atténués par des traitements particuliers. Le but de ce test est de mesurer le temps qu’il faut à une souris pour traverser le faisceau sans s’arrêter ou caler et sans incitation de l’enquêteur. Afin d’obtenir une course propre le jour du test, nous nous entraînons pendant deux jours avant le test.

La démonstration visuelle de cette méthode est utile, car la façon dont les souris sont manipulées et aidées à travers le faisceau peut être difficile pour ceux qui sont moins familiers avec les tests comportementaux. Alors commençons. Ce protocole est basé sur ceux de Southwell, et de Carter et al.

L’appareil est assemblé en reposant une poutre d’un mètre de long entre deux poteaux de 50 centimètres de haut. Les faisceaux ont une surface plane de six ou 12 millimètres de large. Des faisceaux de plus grandes largeurs peuvent être utilisés pour les souris plus grandes et celles qui ne peuvent pas traverser les tailles plus étroites.

Une boîte noire est placée à l’extrémité du faisceau et du matériel d’emboîtement est placé à l’intérieur de la boîte noire pour encourager la souris vers le point d’arrivée, éclairer le point de départ avec une lampe pour servir de stimulus aversif. Les détecteurs de mouvement sont placés à zéro et à 80 centimètres pour enregistrer la latence du croisement du faisceau, étirez un hamac en nylon sous le faisceau et à environ 7,5 centimètres au-dessus de la table pour amortir toute chute. Les souris utilisées dans cette procédure sont logées sur un cycle d’obscurité légère de 12 heures et ont été acclimatées pendant deux semaines avant le test.

Présentez les animaux dans la salle d’essai environ 10 minutes avant de commencer l’expérience et utilisez une cohorte d’au moins 10 souris par condition d’essai pour obtenir les meilleurs résultats. Pour commencer l’entraînement, placez une souris sur l’emplacement de départ d’un faisceau de 12 millimètres de large. La minuterie démarre lorsque le nez de la souris entre dans les 80 centimètres centraux et s’arrête lorsque l’animal atteint la fin des 80 centimètres.

Les souris doivent traverser le faisceau avec un minimum d’arrêt ou de calage. Si l’animal cesse d’avancer, encouragez-le à continuer en le poussant doucement par derrière. Une fois que l’animal a réussi à traverser le faisceau, retirez-le du coffre-fort et remettez-le dans la cage d’accueil pendant 10 minutes avant de commencer la prochaine séance d’entraînement.

La poutre d’équilibre et le boîtier sont nettoyés et essuyés avec de l’éthanol à 70 % avant d’introduire la souris suivante. Chaque souris est entraînée trois fois sur le faisceau de 12 millimètres de large, suivie d’un entraînement sur le faisceau de six millimètres de large. Trois fois plus d’entraînement peuvent augmenter le nombre de décrochages à mesure que l’animal se familiarise avec la tâche et l’appareil.

D’autre part, si les souris ne parviennent pas à traverser l’ensemble du faisceau avec succès après deux jours d’entraînement, une formation supplémentaire peut être nécessaire. Assurez-vous d’enregistrer les mesures de base avant que les animaux ne reçoivent tout traitement. Une fois l’entraînement terminé pour la journée, retournez les souris dans leurs cages d’origine dans l’installation de détention.

Le jour du test, amenez les animaux dans la pièce 10 minutes avant de commencer l’expérience comme indiqué précédemment, placez une souris à l’endroit de départ et enregistrez la latence pour que l’animal traverse les 80 centimètres du centre du faisceau. Les données sont rapportées comme la moyenne de deux essais réussis dans lesquels la souris a traversé directement jusqu’à la fin sans s’arrêter et sans être poussée par l’investigateur. Les enregistrements vidéo peuvent être utilisés pour une analyse plus fine des glissades et d’autres déficits moteurs observables.

Dans cet exemple, des souris C 57 noires de neuf à 11 semaines ont été testées sur des faisceaux de 12 millimètres et de six millimètres de large. Le temps moyen pour traverser le faisceau de 12 millimètres de large était de 4,6 plus ou moins 0,4 seconde pour les mâles, et de 3,3 plus ou moins 0,3 seconde pour les femmes, les temps passés sur le faisceau de six étaient de 6,8 plus ou moins 0,7 seconde pour les mâles et de 5,9 plus ou moins 0,5 seconde. Pour les femelles.

Les performances de la poutre d’équilibre peuvent varier en fonction de l’âge et de la souche des souris. Les six souris noires C 57 utilisées dans cet exemple sont généralement des animaux actifs, quelques glissades, mais aucune chute n’a été observée pour ces souris et des animaux manipulés génétiquement ou pharmacologiquement, les glissades et les chutes peuvent devenir plus fréquentes et peuvent être quantifiées. Les souris affaiblies peuvent s’accrocher au côté du faisceau, ce qui augmente leur temps de traversée pendant la tentative de cette procédure.

Il est important d’être persévérant et cohérent pour inciter les souris à avancer si elles calent ou sont distraites sur le faisceau. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’entraîner les souris à traverser la poutre d’équilibre et d’évaluer leur équilibre et leur coordination. Merci d’avoir regardé et j’espère que vous avez trouvé cela utile.