Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:14 min • September 26th, 2025
Prenez une monocouche de cellules endothéliales pulmonaires de rat.
Lavez les cellules avec un tampon. Ajouter une suspension de Pseudomonas aeruginosa et incuber.
Pendant l’incubation, les bactéries entrent en contact avec les cellules et injectent des protéines effectrices dans le cytoplasme.
Ces protéines effectrices induisent la dégradation des microtubules et la perturbation cytosquelettique.
La perturbation cytosquelettique active les réponses au stress cellulaire, conduisant à la formation d’agrégats de protéines cytotoxiques mal repliés-oligomères amyloïdes.
Les protéines effectrices créent également des pores dans la membrane cellulaire, permettant la libération d’oligomères amyloïdes dans l’espace extracellulaire.
De plus, la perturbation cytosquelettique modifie la morphologie cellulaire, créant des lacunes intercellulaires dans la monocouche endothéliale.
Ensuite, observez la monocouche au microscope optique. Une fois que les espaces intercellulaires deviennent évidents, mettez fin à l’incubation.
Ensuite, récupérez le surnageant contenant des amyloïdes cytotoxiques et centrifugez-le pour granuler les débris.
Récupérez le surnageant et filtrez-le pour éliminer les bactéries rest
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