Suivi de la dynamique d’infection bactérienne chez une souris à l’aide de la bioluminescence
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 4:35 min • September 26th, 2025
Commencer par une suspension d’une souche atténuée d’une bactérie pathogène.
La souche atténuée présente une pathogénicité réduite en raison de délétions ciblées dans les gènes de virulence.
Les bactéries sont marquées chromosomiquement avec un opéron bioluminescent qui permet une production autonome de lumière.
Les bactéries expriment l’opéron bioluminescent, produisant une enzyme luciférase et un complexe enzymatique qui synthétise le substrat de la luciférase.
La luciférase oxyde le substrat pour produire de la lumière visible.
Centrifugez la suspension et jetez le surnageant.
Lavez les cellules avec un tampon, centrifugez-les à nouveau et jetez le surnageant pour éliminer les composants non cellulaires résiduels.
Remettez les cellules en suspension dans le tampon pour obtenir une concentration bactérienne optimale et aspirez la suspension dans une seringue.
Injectez la suspension par voie intrapéritonéale dans une souris, puis transférez-la dans une cage.
Visualisez le signal bioluminescent à intervalles réguliers.
La souche atténuée reste localisée et la bioluminescence diminue progressivement, indiquant l’élimination de l’infection.
Le matin des injections, décongelez les cryoflacons de
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