Évaluation de la perméabilité intestinale chez C. elegans après exposition bactérienne

Prends C. Vers élégans cultivés sur des plaques d’agar riches en nutriments contenant de l’E. coli pour la condition témoin et Pseudomonas aeruginosa pour la condition pathogène.

Pendant l’incubation, les vers se nourrissent de bactéries qui colonisent la lumière intestinale.

Dans le témoin, l’épithélium intestinal reste intact, tandis que les toxines libérées par le pathogène causent des dommages épithéliaux.

Lavez les vers avec un tampon, puis transférez-les sur des plaques complétées par des traceurs fluorescents et des bactéries inactivées par la chaleur comme source de nourriture.

Dans le témoin, les traceurs fluorescents ingérés restent dans l’intestin, tandis que chez les vers infectés par l’agent pathogène, ils traversent l’épithélium endommagé et pénètrent dans la cavité corporelle.

Lavez à nouveau les vers et placez-les sur des assiettes fraîches. Ensuite, transférez-les sur une plaque multi-puits contenant un fixateur pour préserver la structure cellulaire.

Enlève le fixateur. Ensuite, ajoutez un support de montage pour l’imagerie.

Observez à l’aide d’un système d’imagerie à fluorescence.

Augmentation de la fluorescence dans la cavité corporelle de P. Les vers exposés à Aerugino