Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Prendre une plante de pomme de terre cultivée in vitro.
Ensuite, utilisez un Agrobacterium recombinant, un agent pathogène végétal contenant un ADN de transfert (ADN-T).
L'ADN-T porte un génome complet du virus X de la pomme de terre, modifié pour coder un ARN non codant destiné à piéger des microARN végétaux spécifiques.
Infiltrer les feuilles avec les bactéries et gratter la tige avec un bâtonnet de bois enduit des bactéries.
Au site d'inoculation, les bactéries excisent l'ADN-T et le transfèrent sous forme d'ADN simple brin dans les cellules végétales.
En utilisant le mécanisme de l'hôte, l'ADN-T produit un ARN génomique viral, qui se réplique et exprime des ARN non codants et des protéines virales.
L'ARN non codant se lie aux micro-ARN végétaux cibles, empêchant leur liaison avec les ARNm cibles et provoquant des défauts du développement.
Entre-temps, les ARN génomiques viraux forment des complexes ribonucléoprotéiques qui se propagent de manière systémique à travers les plasmodesmes, permettant ainsi la silencing des microARN dans toute la plante.
Les anomalies foliaires, notamment des excroissances ectopiques et des feuilles en forme de trompette, indiquent le rôle du développement d
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