Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:17 min • August 31st, 2026
Prélevez une culture de bactérie lysogène effectuée pendant la nuit, dans laquelle la majorité des cellules contiennent de l'ADN phagique dormant intégré à leur génome.
Il l'incuber dans un milieu frais.
Certaines bactéries subissent une induction spontanée, entrant ainsi dans le cycle lytique, au cours duquel l'ADN phagique est excisé, répliqué et des protéines virales sont produites.
Les phages infectieux nouvellement assemblés sont libérés par lyse cellulaire.
Prélevez des échantillons de culture à des intervalles définis.
Pour dénombrer les lysogènes non induits viables, déposez des dilutions sériées de chaque échantillon sur une boîte de gélose et incubez.
Compter les colonies pour calculer les unités formant des colonies (UFC).
Pour dénombrer les phages infectieux, déposez les mêmes dilutions sur une boîte de gélose contenant un antibiotique préensemencée avec des cellules hôtes indicatrices résistantes à l'antibiotique. Étant donné que les lysogènes sont sensibles à l'antibiotique, seules les cellules hôtes résistantes peuvent croître.
Les phages infectent et lysent les cellules, formant des plaques claires.
Comptez les plaques pour calculer les unités formant des plaques (UFP). Un n
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