Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Prenez une plaque multi-puits contenant des amibes cultivées dans un milieu de privation.
Le milieu de privation contient des antibiotiques et des agents antifongiques qui limitent la croissance microbienne tout en maintenant les amibes viables sans multiplication ni formation de kystes dormants.
Prenez un tube contenant l'échantillon d'eau environnementale et vortexez-le pour libérer les virus des matières en suspension et des débris.
Ajouter l'échantillon d'eau contenant les virus aux amibes.
Placer la plaque dans un sachet avec une compresse humide pour éviter l'évaporation, puis incuber.
Pendant l'incubation, les amibes englobent les virus géants par phagocytose.
Une fois internalisé, le virus libère son génome dans le cytoplasme de l'amibe.
Une usine virale cytoplasmique se forme autour du génome viral, où elle utilise le matériel cellulaire de l'hôte pour se répliquer et produire des protéines virales qui s'assemblent en de nouvelles particules virales.
Cela provoque l'arrondissement et la lyse des cellules amibiennes, libérant de nouveaux virions dans le milieu et enrichissant ainsi les virus géants en vue de leur détection ultérieure.
Après avoir prélevé des échantillons d'eau sale
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