Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 5:45 min • July 8th, 2025
Les lymphocytes T régulateurs, ou Tregs, sont une sous-population spécialisée de lymphocytes T qui exercent des effets immunosuppresseurs pour médier l’homéostasie du système immunitaire. Les Tregs expriment les marqueurs de surface cellulaire CD4, CD25 et Neuropiline 1, Nrp1, et les facteurs de transcription nucléaire forkhead box P3, Foxp3 et Helios.
Pour isoler les Tregs des ganglions lymphatiques drainants pancréatiques de souris, ou PDLN, placez un treillis métallique sur un tube conique. Placez les PDLN sur le grillage et broyez le tissu pour le dissocier mécaniquement. Ajoutez un milieu approprié sur le maillage, en rinçant les cellules dans le tube.
Centrifugeuse, éliminant les cellules mortes et les débris cellulaires. Remettre en suspension les cellules viables dans le milieu. Passez les cellules à travers un capuchon de crépine de cellule monté sur un tube à fond rond pour obtenir une suspension monocellulaire homogène, éliminant ainsi les amas de cellules restants.
Ajoutez des anticorps anti-CD4, anti-CD25 et anti-Nrp1 conjugués au fluorochrome. Les anticorps anti-CD4 et anti-CD25 se lient à leurs antigènes de surface cellulaire respectifs sur les Tregs. Simultanément,
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