Name: Implantation dune manchette carotidienne pour le déclenchement de cisaillement-stress athérosclérose induite chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-13T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Apprenez à implanter une manchette conique en polyéther cétone autour de l'artère carotide chez la souris. Cette technique modifie le cisaillement-stress pour induire l'athérosclérose et étudier les phénotypes inflammatoires des lésions.

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Cette étude a été financée en partie par la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG), le projet PI GZ 771/1-1; SFB 656 &quot;Imagerie moléculaire cardiovasculaire», Münster, Allemagne (projets C6, Z2, B3 et PM3); UE NoE «Diagnostic Molecular Imaging-DIMI &quot;(WP 11.1 et 11.2). L&#39;étude a également été financé en partie par la British Heart Foundation, Royaume-Uni.

1. Préparer le modificateur contrainte de cisaillement (manchette) <ol><li> Le modificateur de la contrainte de cisaillement se compose de deux moitiés longitudinales d'un cylindre avec une lumière en forme de cône. Les demi-coques sont faites de polyéthercétone thermoplastique produit par un procédé de coulée en plastique. Les éléments de fonte sont envoyés tout relié à la roue. Ainsi, les demi-coquilles doivent être coupés avant l'utilisation. Chaque fonte contient des demi-coquilles de différentes tailles allant de 150 um - 300 um (diamètre intérieur plus bas à la fin de l'aval). </li><li> La préparation brassard doit être réalisée sous un microscope chirurgical. </li><li> Tenez la demi-coquille coiffe avec une pince émoussée et doucement le couper de la fonte en utilisant un scalpel tranchant. Cette procédure conduira à la moitié des précurseurs shell qui doivent être traitées ultérieurement. </li><li> Placez le précurseur demi-coquille sur une plaque de même les non-glissantes, de la fixer avec une pince émoussée et le couper exactement le long de l'incision préformée pour remOve l'extrémité fermée. Cela donnera la demi-coquille coiffe prêt à l'emploi. </li><li> Contrôle de la demi-coquilles sous le microscope et retirez délicatement les bords restent vifs. La lumière interne conique est essentielle pour induire différentes qualités de la contrainte de cisaillement à l'intérieur, en amont et en aval de la coiffe implanté. Une rainure sur la surface extérieure des demi-coquilles perpendiculaire à la lumière interne sert de guide pour le fil qui colle enfin les demi-coquilles pour former le brassard fonctionnel. </li><li> Stocker les demi-coquilles manchette, classées selon leur taille, dans de l'éthanol à 70%. </li></ol> 2. Implanter le brassard autour de l'artère carotide droite <ol><li> Souris knockout ApoE devrait être autour de 10 semaines d'âge et à un poids d'au moins 20 grammes. Si le développement des plaques doit être étudié sous régime riche en cholestérol, en commençant par exemple un régime de type occidental 4 semaines avant l'implantation brassard est recommandée. </li><li> L'ensemble de la procédure chirurgicale doitêtre effectuée au moins sous conditions semi-stériles: Porter une blouse chirurgicale, masque et chapeau et gants stériles. Stériliser les instruments pendant 30 secondes dans un stérilisateur à billes instruments et les placer sur une feuille stérile opaque. Méfiez-vous! Des instruments ont pour refroidir avant de l'utiliser! </li><li> Placez la souris dans une chambre d'induction anesthésique remplie avec 3% d'isoflurane jusqu'à ce qu'il soit complètement anesthésiés. Vérifiez la profondeur de l'anesthésie avec la réponse à pincement de l'orteil. Sinon, une anesthésie peut être réalisée avec intrapéritonéale (IP) d'injection de kétamine (80 mg / kg) et de xylazine (10 mg / kg) ou autre anesthésiques approuvés par le IACUC. Pour une injection ip, maintenez la souris en position couchée et injecter l'anesthésique dans le quadrant inférieur gauche de l'abdomen. </li><li> Placez la souris sur une plaque chauffée chirurgicale, en position couchée. Afin d'éviter les yeux de la marche à sec les humidifier avec collyre (par exemple, Bepanthen yeux et du nez lotion). Fais l'avant-et pattes arrière et les bandes en bas de la plaque. Si vous effectuez l'isoflurane, le débit de gaz narcotiques (2% d'isoflurane) doit être alimenté via un masque de petit rongeur. </li><li> Enlever les poils entre la mandibule et le sternum soit par l'agent appliquant dépilatoires (par exemple Pilca Med) ou en utilisant une amende rasoirs électriques (par exemple, Wella Contura). Rasage doit être effectuée avec prudence afin d'éviter d'irriter la peau. Si vous utilisez un agent dépilatoire, donner 1-2 min pour pénétrer les cheveux, par la suite, frottez doucement jusqu'à ce que tous les cheveux et agent dépilatoire est supprimé. </li><li> Avez prêts préalablement préparé demi-coquilles coiffe de différentes tailles (deux de chaque taille) et un 2,5 cm de long morceau de 6-0 suture de soie pour interconnecter les demi-coquilles sur le site de l'occlusion carotidienne. </li><li> Désinfecter le champ opératoire avec une quantité libérale de Betadine. Utilisez de petits ciseaux pointus pour ouvrir la peau et le fascia sous-jacent de la nuque par une incision médiane 4-5mm à partir du haut du sternum (manubrium). </li><li> Développer l'ouverture, shift l'glande parotide droite de côté et insérez un épandeur chirurgicale. Puis décortiquer carrément dans l'abîme, juste à gauche de la trachée (du point de vue des chirurgiens), où le muscle sternomastoideus droite traverse le muscle droit omohyoïdien, jusqu'à ce que vous êtes capable d'identifier la pulsation carotidienne droit commun. </li><li> L'utilisation très fine pince coudée ou courbée (par exemple, Dumont # 5 / 45), disséquer le artère carotide commune droite en enlevant doucement le tissu conjonctif environnant. Séparez les carotides du nerf vague - le blanc, objet filandreuse exécuter directement le long de la carotide - que cette étape est nécessaire pour complètement exposer le navire. Soyez prudent, ni de nuire le nerf vague, ni une branche de la veine jugulaire interne gauche, qui est également en relation étroite à la carotide. </li><li> Afin de choisir la taille qu'il vous faut, comparer le diamètre de la carotide exposée avec le diamètre intérieur des demi-coquilles brassard: La plus grande largeur de la lumière devrait répondre aux poignets, le diamètre extérieur de la carotide. </li> Maintenant, soigneusement mis le bout de la pince sous la carotide, ouvrez la pince, fil de la pièce de 6-0 suture de soie sous la carotide et former une boucle. Entre la boucle et le lieu de la carotide une demi-coquille coiffe sous la carotide. Le côté du plus grand resserrement doit être en aval. <li> Placez la coquille coiffe seconde moitié dans la boucle sur le dessus de la carotide. </li><li> Serrer doucement la boucle de suture à l'aide des pinces suture et le nœud du fil. En faisant cela, le modificateur de stress fonctionnement de cisaillement est formé. Pour l'ajustement précis de la coiffe, il est essentiel que la suture est en marche exactement dans la rainure préformée sur la surface externe de la coiffe. </li><li> Déplacez le glande parotide droite de retour à sa position initiale, approximative et proche de la peau soit en utilisant une petite quantité de 6-0 suture Prolène ou, alternativement, vous pouvez utiliser des clips plaie. </li><li> Injecter une dose unique de 5 mg / kg carprofène (par exemple Rimadyl) sous-cutanée à fournir un traitement prophylactique des douleurs et le lieula souris dans une chambre de réchauffement jusqu'à ce qu'il récupère. Normalement, cela prend 30-60 minutes lors de l'utilisation d'anesthésie kétamine / xylazine. Lorsque vous utilisez l'isoflurane anesthésie par inhalation de la période de récupération est sensiblement plus courte (10-20 min). </li><li> Dans notre expérience, les animaux retrouver une activité normale atones dans les 24 premières heures après l'implantation brassard avec l'intervention étant effectuée par un chirurgien expérimenté. Toutefois, si l'animal semble être en difficulté même un jour post-opératoire, répéter le traitement antalgique et consulter le personnel vétérinaire. </li></ol> 3. Explantation de la manchette et les artères carotides <ol><li> Pour l'analyse histologique des artères carotides doivent être récoltés à la fin de la période d'observation. Avant de commencer l'explantation, l'animal doit être tué selon les directives du IACUC. </li><li> Si les demi-coquilles brassard sont destinées à être réutilisées, retirez soigneusement tous les fragments de tissus et de la suture connectant à partir des éléments en plastique, DISsecting des artères carotides, laver et stocker les demi-coquilles dans une solution d'alcool à 70%. Il convient de garder à l'esprit que le brassard est ancrée dans le tissu conjonctif adhérences après plusieurs semaines d'implantation et que l'on a de disséquer le brassard avec prudence afin de ne pas nuire à la paroi des vaisseaux. </li><li> Alternativement, le brassard peut être explantés et intégrés en collaboration avec l'artère carotide. La matière plastique de la coiffe est résistant à des solutions de fixation normale et les solvants utilisés pour l'enrobage de paraffine. En outre, les échantillons embarqués peuvent être coupés à l'aide d'un microtome normale équipée de lames normales. </li></ol> 4. Les résultats représentatifs Le brassard doit être placé toujours autour de l'une des deux artères carotides communes d'un animal (fig. 1A, 1B) - du côté controlatéral sert de contrôle. Sur l'image présentant les deux demi-coquilles de la coiffe (Fig. 1B) la forme conique de la lumière interne est visible. Cette forme conique est essentiel pour establishing les trois régions où la dynamique des flux distincts. Typiques motifs contrainte de cisaillement induite par la fonte calculée à partir de mesures Doppler 11 et les vitesses d'écoulement correspondant basé sur la vitesse à contraste de phase IRM 12 sont donnés dans la Figure 2. Lorsque le brassard est implanté dans des souris knockout ApoE nourris avec un régime de type occidental de la modification du débit dynamique de provoquer un stress de cisaillement induite dépôt plaque d'athérome (Fig. 3): En amont de la constriction faible contrainte de cisaillement laminaire coniques conduit à un développement massif des plaques d'athérosclérose d'une plus phénotype vulnérables, caractérisées par des noyaux de lipides proche de la lumière centrale couverte que par une chape fibreuse mince (Fig. 3A1). La lumière intérieure conique du poignet conduit à une augmentation de la vitesse d'écoulement. Presque pas de dépôt de plaque est observée dans ce domaine. Directement en aval du site du goulot d'étranglement de l'élargissement immédiat des résultats artère dans une zone de tourbillons et oscillatoire floparamètres w, ce qui provoque le développement des plaques moins étendu d'un phénotype plus stable (noyaux à savoir lipides, qui sont moins localisées plus près aux médias). <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 1"> Figure 1 Le modificateur contrainte de cisaillement - d'assemblage et de placement (A) Représentation schématique de la coiffe implanté:.. Le brassard est placé autour de l'artère carotide commune droite (CRAC) - du côté controlatéral (LCCA = artère carotide commune gauche) sert de contrôle . (B) In vivo l'angio-IRM dans une souris: Dans la projection d'intensité maximale d'un en trois dimensions du temps de vol angiographie MR de la constriction induite par la forme conique exprimés (flèche blanche) est visible (pour plus de détails voir 12). (H = la tête, F = pieds, R = droite, L = gauche). Dans le coin supérieur droit d'une vue macroscopique sur la lumière intérieure et la surface extérieure des demi-coquilles brassard est donné. Une fois assemblé, deux demi-coquilles former un cylindre conique qui modifiela dynamique d'écoulement dans la cuve d'une manière définie. Pour assurer le bon ajustement, une rainure sur la surface externe de la coiffe (flèche jaune) sert de guide pour la suture reliant. <img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 2"> Figure 2. Régions de la dynamique des flux différents et des contraintes de cisaillement. Implantation de la dynamique de la coiffe le flux et le stress altère la suite de cisaillement dans l'artère carotide dans constriction d'une manière définie. Dans la représentation schématique supérieure les propriétés d'écoulement différentes sont indiquées et les valeurs locales approximatif pour des contraintes de cisaillement sont donnés (basé sur les mesures Doppler 11). Ci-dessous, les vitesses d'écoulement correspondantes pour un seul animal mesurée par IRM en amont de la coiffe des implantés sont présentés dans un pondérées en T1 transversale IRM image de la nuque (imagerie par contraste de phase de vitesse, pour plus de détails voir 12). Figure 3. La contrainte de cisaillement induit le développement des plaques chez les souris KO ApoE. Le coin supérieur gauche montre la vue macroscopique sur le cou ouvert et exposé les artères carotides d'une souris KO ApoE sous haute teneur en graisses (type occidental) alimentation 8 semaines après l'implantation d'une contrainte de cisaillement modificateur autour de l'artère carotide commune droite (CRAC). La région blanc opaque sur le navire (*) en amont de la coiffe correspond à un site de dépôt de la plaque d'athérosclérose étendue. La flèche jaune indique le thread qui combine les deux moitiés du brassard. En revanche, il n'ya aucun signe de dépôt de plaque dans l'artère coronaire gauche commune (ACCV). (A) - (C) représentant Il a taché les sections de l'artère carotide commune droite d'une souris KO ApoE sous régime de type occidental 8 semaines après l'implantation de la manchette. La représentation schématique donne les avions correspondants (lignes pointillées) Where les sections ont été localisés. (A) en amont de l'athérosclérose coiffe conduit au dépôt de plaque massive. Noyaux lipidiques Grande (flèches rouges), qui sont en partie situé à proximité de la lumière centrale (détail A1) de caractériser le caractère vulnérable de ces plaques. (B) Au plan de la coiffe le goulot d'étranglement presque pas le développement des plaques est évident, alors que directement en aval de la coiffe (C) écoulement oscillatoire conduit à modérer le développement des plaques d'un type plus stable (c'est à dire des noyaux lipidiques moins ou pas). (C1, C2 = demi-coquilles de la coiffe, P = plaques, astérisque = navire de lumière)

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Les auteurs n&#39;ont rien à révéler.

Afin de minimiser les variations expérimentales, il est recommandé de travailler avec les animaux de près le même âge et avec l&#39;histoire même régime alimentaire. Une enquête publiée récemment démontre que le modificateur contrainte de cisaillement appliquée chez les souris de type sauvage pourrait être un bon modèle pour l&#39;enquête de la dysfonction endothéliale et au début des réactions inflammatoires induites par la modification du débit dynamique de 13. Cependant, pour l&#39;enquête sur la plaque d&...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Société </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Modificateur de la contrainte de cisaillement (polyéthercétone) </td><td> Promolding BV <a href="http://promolding.nl">http://promolding.nl</a> </td><td> Les moulages sont envoyés tout relié à la roue. Ainsi, les éléments simples doivent être coupés avant l&#39;utilisation. </td></tr></tbody></table>

implantation d&#39;une manchette carotidienne pour le déclenchement de cisaillement-stress athérosclérose induite chez la souris

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

Il est largement admis que les altérations de la contrainte de cisaillement vasculaires déclencher l&#39;expression de gènes inflammatoires dans les cellules endothéliales et induire ainsi l&#39;athérosclérose (revue en 1 et 2). Le rôle de la contrainte de cisaillement a été largement étudiées in vitro d&#39;étudier l&#39;influence de la dynamique de l&#39;écoulement sur ​​les cellules endothéliales en culture 1,3,4 et in vivo dans les grands animaux et les humains 1,5,6,7,8. Cependant, hautement reproductible de petits modèles animaux permettant l&#39;investigation systématique de l&#39;influence des contraintes de cisaillement sur le développement des plaques sont rares. Récemment, Nam et al. 9 introduit un modèle de souris dans lequel la ligature des branches de l&#39;artère carotide crée une région de faible débit et oscillatoire. Bien que ce modèle entraîne une dysfonction endothéliale et la formation rapide de lésions athéroscléreuses chez les souris hyperlipidémiques, il ne peut pas être exclu que la réponse inflammatoire est observée, du moins en partie, une conséquence of endothéliales et / ou des dommages aux vaisseaux due à la ligature. Afin d&#39;éviter de telles limitations, un brassard de la contrainte de cisaillement modification a été développé basé sur la dynamique des fluides calculés, en forme de cône dont la lumière interne a été choisi pour créer des régions définies du bas, des contraintes de cisaillement élevées et oscillatoires au sein de l&#39;artère carotide commune 10. En appliquant ce modèle chez la souris knockout apolipoprotéine E (apoE) nourris avec un régime riche en cholestérol de type occidental, les lésions vasculaires développer en amont et en aval du brassard. Leur phénotype est corrélé à la dynamique des flux régionaux 11 comme le confirme in vivo en imagerie par résonance magnétique (IRM) 12: contrainte de cisaillement faible et laminaire en amont de la coiffe des causes de la formation de plaques étendues d&#39;un phénotype plus vulnérables, alors que oscillatoires aval de la contrainte de cisaillement le brassard induit des lésions athérosclérotiques stables 11. Dans ces régions de la contrainte de cisaillement élevé et à flux laminaire élevé au sein de la coiffe,généralement pas de plaques d&#39;athérosclérose sont observées. En conclusion, la procédure de la coiffe des contraintes de cisaillement modificateur est une approche fiable pour produire chirurgicale phénotypiquement différentes lésions athérosclérotiques dans les souris déficientes en ApoE.

Le brassard de constriction présentés dans cet article est conçu pour induire l&#39;athérosclérose dans l&#39;artère carotide commune murin. Grâce à la forme conique de sa lumière intérieure de la coiffe des implantée génère régions bien définies de la basse, la contrainte de cisaillement élevées et oscillatoires déclenchant le développement des lésions athérosclérotiques des différents phénotypes inflammatoires.

Implantation d&#39;une manchette carotidienne pour le déclenchement de cisaillement-stress athérosclérose induite chez la souris

Il est largement admis que les altérations du stress de cisaillement vasculaire déclenchent l'expression de gènes inflammatoires dans les cellules endothéliales et induisent ainsi...

L'objectif général de cette procédure est d'implanter un modificateur de contrainte de cisaillement autour de l'une des deux artères carotides communes chez un modèle murin d'athérosclérose. Cette opération s'effectue en découpant d'abord les deux moitiés longitudinales du modificateur de contrainte de cisaillement dans un moulage en polyéthercétone. Ensuite, le cou de la souris expérimentale est ouvert et l'une des deux artères carotides communes est exposée.Deux demi-coquilles de manchon sont ensuite placées autour des deux artères carotides communes et les demi-coquilles sont interconnectées à l’aide d’un fil chirurgical afin de former la lumière interne conique du manchon fonctionnel. Enfin, la nuque de l’animal est refermée. En définitive, des résultats peuvent être obtenus montrant des paramètres d’écoulement modifiés ainsi que des contraintes de cisaillement, qui provoquent finalement la formation de plaques athéroscléreuses en amont et en aval du manchon.Bien que cette méthode puisse fournir des informations sur la formation des plaques d'athérosclérose, elle peut également être appliquée à d'autres questions relatives au dysfonctionnement endothélial et à l'inflammation vasculaire. Le modificateur de contrainte de cisaillement est constitué de deux moitiés longitudinales de cylindre présentant une lumière en forme de cône.Les demi-coquilles sont en polyéther cétone thermoplastique, et chaque moule contient des demi-coquilles de tailles différentes, allant de 150 micromètres à 300 micromètres. Pour préparer le modificateur de contrainte de cisaillement à utiliser sous microscope chirurgical, tenez la demi-coquille du manchon avec une pince effilée et utilisez un scalpel bien aiguisé pour la découper délicatement du moule. Placez le précurseur de demi-coquille sur une plaque plane et non glissante.Fixez-le avec une pince plate et coupez-le exactement le long de l'incision préformée. Afin d'éliminer l'extrémité fermée, retirez délicatement tous les bords tranchants restants. Conservez les demi-coquilles de manchon classées par taille dans de l'éthanol à 70 %.Pour la procédure d'implantation de la gaine. Commencez avec des souris APOE knock-out âgées de 10 semaines et pesant au moins 20 grammes. Portez une blouse chirurgicale, un masque, une charlotte et des gants stériles.Stérilisez les instruments pendant 30 secondes dans un stérilisateur à billes, puis placez-les sur une feuille opaque stérile. Anesthésiez la souris avec 3 % d'isoflurane, et vérifiez la profondeur de l'anesthésie en pinçant l'orteil. Retirez les poils situés entre la mandibule et le sternum en appliquant un agent dépilatoire ou en utilisant un rasoir électrique fin.Placer la souris sur une plaque chirurgicale chauffante en position supine. Ensuite, appliquer une pommade en forme de V sur les yeux pour éviter qu'ils ne s'assèchent. Si l'on utilise de l'isoflurane, placer l'espace du rongeur dans un masque et administrer 2 % d'isoflurane.Fixez le sol et les pattes arrière avec du ruban adhésif et positionnez le masque facial. Tenez prêt un brassard, des demi-coquilles de différentes tailles, ainsi qu'un morceau de suture en soie 6/0 mesurant 2,5 centimètres pour relier les demi-coquilles au site d'occlusion carotidienne. La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle, car les étapes montrant la dissection de l'artère carotide à la position définie permettent de minimiser la manipulation des tissus.Par ailleurs, je tiens à souligner que le positionnement correct et l'ajustement adéquat du manchon constituent l'étape la plus importante pour obtenir des résultats reproductibles. Pour garantir cela, nous avons défini une position anatomique précise comme site d'implantation. De plus, l'ajustement correct du manchon est facilité par une rainure située sur la surface externe du manchon, constituée de demi-coquilles, qui sert de guide pour le fil de connexion.Désinfectez la peau avec une quantité généreuse de Bétadine. Utilisez de petites ciseaux pointus pour ouvrir la peau et la fascia sous-jacente du cou à l’aide d’une incision médiane de quatre à cinq millimètres à partir du sommet du sternum, élargissez l’ouverture, déplacez la glande parotide droite sur le côté et insérez des écarteurs pour exposer la zone chirurgicale. Ensuite, effectuez une dissection émoussée vers l’intérieur légèrement à gauche de la trachée, là où le muscle sterno-cléido-mastoïdien droit croise le muscle omohyoïdien droit, afin de localiser l’artère carotide commune droite pulsatile.À l’aide de pinces très fines, angulées ou courbées, disséquer l’artère carotide commune droite en retirant délicatement les tissus conjonctifs environnants. Séparer l’artère carotide du nerf vague, cet objet blanc et filamenteux qui longe directement l’artère carotide.Étant donné que cette étape est nécessaire pour exposer complètement le vaisseau, veillez à ne pas endommager le nerf vague ni une branche de la veine jugulaire interne droite, qui est également en étroite connexion avec la carotide. Afin de choisir la taille appropriée de la gaine, comparez le diamètre de l'artère carotide exposée avec le diamètre intérieur de la gaine, des demi-coquilles ; la largeur maximale de la lumière de la gaine doit correspondre au diamètre extérieur de la carotide. Ensuite, insérez délicatement la pointe de la pince sous l'artère carotide.Ouvrez la pince. Passez le morceau de fil de soie 6/0 sous l'artère et formez une boucle ; entre la boucle et la carotide, placez une demi-gaine sous la carotide, en orientant le côté de plus grand rétrécissement en aval. Placez la seconde demi-gaine à l'intérieur de la boucle, par-dessus l'artère carotide.Serrer délicatement la boucle du fil et fixer le fil. En procédant ainsi, on obtient un modificateur fonctionnel du cisaillement. Pour un ajustement précis de la gaine, il est essentiel que le point de suture suive exactement la rainure préformée située sur la surface extérieure de la gaine.Le rétrécissement conique de l'artère doit maintenant être clairement visible. Le manchon doit toujours être placé autour d'une des deux artères carotides communes d'un animal, et le côté controlatéral sert de témoin. Ici, la forme conique de la lumière interne est visible.Cette forme conique est essentielle pour établir les trois régions présentant des dynamiques d'écoulement distinctes. Remettez la glande parotide droite en arrière, dans sa position d'origine. Rapprochez et fermez la peau à l’aide d’un faible nombre de sutures en proline 6-0 ou d’agrafes chirurgicales.Injecter une dose unique de cinq milligrammes par kilogramme de carprofène par voie sous-cutanée afin d'assurer un traitement prophylactique contre la douleur, puis placer la souris dans une chambre de réchauffage jusqu'à son réveil. Si l'animal présente des signes de détresse le jour suivant, administrer une deuxième dose d'analgésique. Profils typiques de contraintes de cisaillement induits par l'attelle, calculés à partir des mesures Doppler, et vitesses d'écoulement correspondantes basées sur la vitesse en contraste de phase.L'imagerie par résonance magnétique est présentée ici lorsque le manchon est implanté chez une souris knock-out du récepteur P OE, nourrie avec un régime de type occidental. Les dynamiques d'écoulement modifiées provoquent un dépôt de plaques athéroscléreuses induit par le stress de cisaillement en amont de la constriction conique. Un faible stress de cisaillement laminaire entraîne un développement massif de plaques athéroscléreuses présentant un phénotype plus vulnérable, caractérisé par des cœurs lipidiques proches de la lumière centrale et recouverts uniquement par une fine capsule fibreuse.La lumière interne conique du manchon entraîne une augmentation de la vitesse d'écoulement. Presque aucun dépôt de plaque n'est observé dans cette zone située directement en aval du rétrécissement. L'élargissement immédiat de l'artère provoque une zone de tourbillons et de paramètres d'écoulement oscillatoires, ce qui entraîne un développement de plaque moins étendu, mais de phénotype plus stable.Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment placer correctement un modificateur de contrainte de cisaillement autour de l'artère carotide commune d'une souris.

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