18 novembre 2012
Ce protocole décrit entretien régulier et des soins afin de maintenir des conditions optimales pour le poisson-zèbre élevage. La vidéo illustre le protocole pour la maintenance du système, le logement, l'alimentation, la reproduction, et l'élevage de larves de poisson zèbre.
Ce protocole décrit les soins et l'entretien courants d'un laboratoire de poisson zèbre. En raison de l'intérêt croissant pour la recherche sur le poisson zèbre, la nécessité de créer et de maintenir un centre d'élevage pour ce poisson augmente également. Bien qu'il existe une littérature sur l'entretien d'un laboratoire de poisson zèbre, un protocole vidéo concis fait défaut.
Ce vidéo explique l'entretien du système, l'alimentation, la reproduction et l'élevage des larves de poisson zèbre. Bonjour, je suis ABH de l'École des sciences médicales de l'Université. Bonjour, je suis Manchi de Thee Institution.
Aujourd'hui, nous allons vous montrer les soins et l'entretien courants d'un laboratoire de poisson zèbre. Le poisson zèbre gagne en popularité dans les domaines de la génétique, de la recherche pharmacologique et du comportement. En raison de leur facilité élevée d'entretien et de leur développement rapide, ils se prêtent très bien à la modulation génétique et sont adaptés aux criblages de médicaments à haut débit.
Cette section fournit des idées d'élevage de zebrafish aux utilisateurs de poissons et aux chercheurs qui envisagent de créer une nouvelle installation pour poissons. Commençons donc. Plusieurs sociétés proposent des systèmes pour poissons, mais nous utilisons des systèmes provenant d'aquatic habitats.
Dans notre laboratoire, les poissons zèbre sont maintenus à une température de 26 à 28,5 degrés Celsius et selon un cycle lumineux de 14 heures de clarté pour 10 heures d'obscurité. Les poissons zèbre sont élevés dans un système de circulation qui filtre et aère en continu l'eau du système. Afin de maintenir la qualité de l'eau nécessaire à un environnement aquatique sain, le système utilise un ensemble de filtres de différents types au sein de notre installation.
L'eau des réservoirs passe à travers un tampon filtrant, un filtre en cartouche, un filtre biologique, un filtre au charbon actif et un filtre UV avant d'être recirculée dans le réservoir. De l'eau désinfectée ou vieillie est utilisée dans le système de zebrafish. L'eau peut être désinfectée par vieillissement pendant au moins 48 heures.
Vérifiez quotidiennement le pH de l'eau du système et maintenez-le entre 6,8 et 7,5. À l'aide de bicarbonate de sodium, les aquariums doivent être nettoyés régulièrement. Pour nettoyer un aquarium, fermez l'écoulement d'eau vers cet aquarium, évacuez l'eau excédentaire en inclinant l'aquarium vers l'arrière, puis retirez soigneusement l'aquarium du système.
Préparez un aquarium propre et remplissez-le d'eau du système. Transférez soigneusement les poissons dans cet aquarium à l'aide d'un filet. Fermez le couvercle et remplacez délicatement l'étiquette du nom de l'aquarium.
Placer le réservoir dans le système. Remettre le tube dans le réservoir et rétablir l'alimentation en eau. Décontaminer le filet à poisson et le réservoir avec de l'éthanol à 70 %.
Rincez à l'eau et laissez sécher. Avant réutilisation, les filtres du système de circulation doivent être vérifiés et changés régulièrement afin d'assurer leur bon fonctionnement.
Le tampon du filtre de 120 microns est vérifié et repositionné en direction du flux d'eau chaque jour avant d'être remplacé. Le filtre en cartouche doit être changé toutes les semaines. Pour remplacer le filtre en cartouche, retirez-le à l'aide d'une clé ou des mains.
Placer une feuille en plastique ou une serviette en dessous pour éviter les déversements d'eau. Insérer une nouvelle cartouche et un filtre, puis remettre l'unité en place dans le système. Serrer soigneusement à la main, puis avec une clé.
Si nécessaire, le filtre à charbon doit être changé toutes les deux semaines. Pour remplacer le filtre à charbon, retirez-le soigneusement. À l’aide d’une clé, jetez le charbon actif provenant du filtre et remplacez-le par du nouveau charbon actif.
Remettez en place le support à charbon et replacez-le dans l'unité de filtration. Réinstallez l'unité de filtration dans le système. Allumez le système et vérifiez si l'eau s'écoule vers le filtre.
Le filtre biologique doit être nettoyé tous les six mois. Pour remplacer le filtre biologique, retirez le filtre du système. Relâchez la pression du filtre en appuyant sur le bouton de décharge de pression.
Dévissez le filtre et retirez le couvercle. Versez le contenu dans un récipient tamis pour séparer le Cy Oex de l'eau. Si le Cy Oex est très sale, remplacez-le.
Remplissez le filtre avec le nouveau cy ax. Remplissez l'unité avec de l'eau du système. Fermez le couvercle du filtre, remettez l'unité en place et allumez-la.
Les filtres UV sont utilisés pour contrôler les contaminants biologiques et doivent être remplacés tous les neuf à dix mois. Les poissons zèbres peuvent être nourris avec de la nourriture sèche ou des aliments vivants tels que les crevettes d'artémia ; les kystes d'artémia sont disponibles dans les magasins d'animaux locaux et peuvent être éclos en laboratoire en suivant les étapes simples décrites ici. Dissoudre du sel de mer rouge dans l'eau du système afin d'obtenir une solution de 30 à 35 grammes par litre.
Remplissez le récipient à artémias avec l’eau salée et ajoutez les œufs de crevettes à une concentration de 1,2 cuillères à soupe par litre. Aérez vigoureusement l’écloserie à l’aide d’une pompe à air et laissez les œufs d’artémias éclore pendant environ 48 heures. Retirez le tuyau d’aération et laissez la culture se décanter pendant quatre à cinq minutes.
Les artémies fécondées s'accumulent au fond de l'écloserie ; à l'aide du robinet situé au bas de l'écloserie, jeter le premier écoulement, qui contient les œufs non fécondés. Ensuite, recueillir les artémies fécondées. Séparer les artémies de l'eau salée.
À l’aide d’un filet de prélèvement pour artémias, rincez les artémias dans un récipient à l’eau du système. Les artémias se concentrent fortement au fond du récipient et sont désormais prêts à être distribués aux poissons zèbres. Nourrissez les poissons avec les artémias à l’aide d’une pipette ou d’un compte-gouttes.
La quantité de nourriture distribuée dépend de la taille de la population dans chaque aquarium. Après l'ajout de nourriture dans l'eau, les poissons affamés nagent pour attraper les artémies, ce qui est important pour leur exercice régulier. L'alimentation sèche peut être réalisée soit à l'aide d'un habitat aquatique, d'un distributeur de nourriture pour poissons, soit à l'aide d'une simple cuillère.
Les poissons-zèbres commencent la reproduction au début de la période lumineuse. Les œufs peuvent être obtenus par reproduction en groupe ou par accouplement individuel. Bien que la reproduction en groupe soit plus économique en main-d'œuvre et soit utilisée lors de la collecte régulière d'embryons, l'accouplement individuel est préféré lorsqu'il s'agit de dépister des gènes ou des mutations en reproduction en aquarium ; assemblez le dispositif de reproduction dans l'aquarium et immergez-le lentement dans le réservoir.
Après l'allumage de la lumière, laisser le dispositif d'accouplement environ 15 minutes dans l'aquarium pour permettre aux poissons de se reproduire avant de retirer l'adulte de l'aquarium et de récupérer les œufs. Le dispositif d'accouplement en paires est mis en place tard en après-midi en assemblant l'aquarium d'accouplement et en le remplissant d'eau du système. Transférer une femelle et un mâle respectivement sur les côtés opposés du réservoir.
Les femelles peuvent être distinguées des mâles en raison de leur ventre plus gros. Retirer la cloison le lendemain matin. Peu après le début de la lumière, laisser les poissons s'accoupler sans être dérangés pendant 20 minutes ou jusqu'à ce qu'un nombre suffisant d'embryons soit déposé au fond du réservoir.
Après l'accouplement, remettez les poissons dans leurs aquariums. Ramassez les œufs à l'aide d'une passoire. Lavez soigneusement les embryons.
Avec de l'eau du système. Transférer les embryons dans une boîte de Pétri en rinçant le tamis avec le milieu pour embryons. Les embryons peuvent être observés au microscope.
Les embryons non fécondés doivent être séparés des embryons fécondés à l'aide d'une aiguille et d'une pipette. Après que les œufs fécondés ont été séparés des œufs non fécondés, ils sont conservés dans un incubateur à environ 28,5 degrés Celsius pendant 72 heures, jusqu'à l'éclosion des larves. Maintenant, les larves sont sorties des COR et nagent librement.
Les larves doivent être nourries à partir du cinquième jour suivant la fécondation et conservées dans de l'eau stagnante pendant quelques jours avant d'être transférées dans le système. Transférez délicatement les larves dans un réservoir contenant un déflecteur de petite taille, d'environ 300 à 400 microns. Après 14 jours, les réservoirs contenant les larves peuvent être placés dans le système et alimentés par un faible courant d'eau en circulation.
Des déflecteurs de tailles différentes doivent être utilisés en fonction de la taille des larves et des poissons adultes. Il faut généralement trois mois pour que les embryons se développent en adultes sexuellement matures. Merci d'avoir regardé ce menu, et bonne chance pour vos expériences.
Ce protocole décrit l'entretien courant et les soins nécessaires à une bonne maintenance des zébrés. Il comprend des procédures détaillées pour l'entretien du système, le logement, l'alimentation, la reproduction et l'élevage des larves de zébrés.
La mise en place de protocoles solides d'élevage des zebrafish soutient des modèles précliniques fiables pour la recherche pharmacologique et génétique. Des pratiques normalisées d'hébergement, d'alimentation et de reproduction réduisent la variabilité biologique et améliorent la reproductibilité des données dans les flux de travail de découverte précoce. Cela permet un criblage phénotypique cohérent et une validation des cibles dans des systèmes pertinents pour les maladies.
L'élevage du poisson zèbre s'intègre dans le continuum de découverte, allant de la validation précoce de cibles jusqu'à l'identification de composés candidats et au profilage préclinique, en offrant une plateforme biologique stable et évolutible.