In situ Transverse lambeau de grand droit: un modèle de rat de myocutané ischémie reperfusion

Je m’appelle Marie Claire Edmonds. Je suis chercheur clinique à l’Université d’Édimbourg. L’objectif de cette présentation vidéo est de démontrer notre init deux lambeaux myocutanés transverses du droit de l’abdomen comme modèle de lésion de reperfusion myocutanée chez le rat.

Il s’agit de notre configuration chirurgicale. Le dispositif d’anesthésie et la boîte d’induction rouge sont visibles derrière la table d’opération. La table d’opération est disposée de telle sorte que l’animal est allongé sur une couverture homéothème utilisée en conjonction avec une source de chaleur externe dont la température centrale est maintenue par rétroaction à travers une sonde rectale.

Les instruments chirurgicaux sont installés à droite de l’animal et le matériau de suture de gaze, le silicium et le MicroPen à gauche de l’animal, tous deux sur des champs chirurgicaux détachables. Ces instruments ne sont disposés qu’une fois que le dégonflage est terminé et que l’animal est ensuite préparé et drapé pour la chirurgie afin de se conformer à ses directives. Tout d’abord, l’animal est anesthésié avec 4 % de fluor ISO.

L’anesthésie est maintenue à un à 1,5 % de fluor ISO pendant toute la durée de l’intervention. La paroi abdominale antérieure est rasée à l’aide d’un rasoir électrique, une crème commerciale Delling est appliquée. Ceci est important pour obtenir des raisonnements précis avec la machine d’imagerie laser Doppler.

La crème tating est retirée et la zone lavée avec une solution saline stérile chaude. 2 % de chlorhexidine dans de l’alcool isopropylique à 70 % est ensuite appliqué sur la peau. Ceci est laissé sec.

Nous vous conseillons de vous conformer aux directives locales en matière de préparation de la peau. Le lambeau illustré sera basé sur les vaisseaux épigastriques supérieurs profonds gauches et les zones numérotées telles que décrites par SCH Neal en 1982. Pour le volet de tramway T humain, il est possible de baser le volet sur les vaisseaux profonds, inférieurs ou supérieurs de gauche ou de droite.

Bien qu’il faille noter que les vaisseaux supérieurs sont les vaisseaux dominants chez le rat. Contrairement à l’anatomie humaine correspondante, la démarcation des limites plates identifie l’alba linéaire en utilisant le sternum et la queue ZA comme points de référence. Marquez la ligne médiane à 0,8 centimètre sous le sternum ZA et marquez ce point, tracez une ligne perpendiculaire à la ligne médiane à partir du point que vous avez précédemment marqué sous la fermeture éclair Un sternum prenant la ligne médiane au centre du rabat.

Marquez un et deux centimètres à droite et à gauche de la ligne médiane. Tracez une ligne verticale parallèle à la ligne médiane à partir de ces points. Mesurez quatre centimètres sous la ligne horizontale d’origine et tracez-en un autre parallèle.

En suivant ces instructions, un rabat de quatre centimètres sur quatre centimètres sera délimité, composé de quatre zones de dimensions égales. Les zones sont numérotées en tant que description perle et ale, de sorte que la zone un est le muscle abdom directif inte overline directement alimenté par le pédicule vasculaire. La zone deux est le tégument recouvrant le muscle droit controlatéral.

La zone trois est latérale à la zone un et la zone quatre à la zone deux. Une fois l’anesthésie terminée, le rat est transféré de manière aseptique et sous anesthésie à l’appareil d’imagerie laser Doppler où un autre appareil d’anesthésie est en place. Pour maintenir l’anesthésie, l’imagerie laser Doppler pourrait fournir un moyen non invasif d’évaluer le flux sanguin dans le lambeau. Une source lumineuse monochromatique est émise par la tête du scanner.

Cette lumière instantanée montrée en bleu dans cette animation est diffusée par les érythrocytes en mouvement dans le tissu. Le degré de décalage est lié à la vitesse des érythrocytes. La lumière décalée indiquée en vert dans cette animation est mesurée par le photodétecteur à l’intérieur de la tête du scanner et la profusion calculée profusion.

Ainsi, les mesures sont données en unités arbitraires appelées unités de profusion et les données affichées dans une image ressemblent beaucoup à une carte météorologique, dans laquelle la profusion est graduée de haute à basse et chaque valeur attribuée à la couleur, chaque instrument est calibré de telle sorte que toutes les lectures prises avec le même scanner utilisant le même réglage peuvent être comparées. À l’aide du logiciel fourni avec le scanner, une région d’intérêt peut être superposée à l’image LDI et une profusion moyenne de cette zone peut être calculée. Cela permet d’évaluer et de comparer l’ensemble du lambeau ou des zones individuelles.

Après l’imagerie par voie d’injection, retournez les rats en décubitus dorsal dans la couverture thermique de la maison sur la table d’opération, frottez à nouveau les mains et, avec des gants pour les yeux fraîchement morts, drapez l’animal au lieu de champs chirurgicaux. Et demandez à votre assistant d’effectuer un test de pincement des coussinets pour s’assurer d’une anesthésie adéquate avant de continuer. Faites une incision vers le bas.

Bord latéral gauche marqué de l’animal. Faites des incisions similaires le long des lignes horizontales à gauche de la ligne médiane. Assurez-vous que l’hémostase est établie à l’aide d’un appareil à cordon portatif.

Localisez le surbord de graisse, la gaine érectrice inférieure gauche à l’aide d’une pince et de ciseaux à iris fins pour ouvrir un plan sous cette graisse. Veillez à ne pas endommager les perforateurs qui remontent à travers la gaine de reconnaissance antérieure gauche. Le plan ouvert par une telle dissection est celui directement supérieur au fascia de la paroi abdominale.

Continuez à disséquer dans ce plan et autour des limites délimitées. Ensuite, disséquez médialement. En ce qui concerne le bord latéral du muscle droit gauche, il y a un changement de couleur évident à ce stade, passant du rose au blanc, comme le souligne cette ligne blanche.

Le champ opératoire devrait maintenant ressembler à cette image. Répétez la procédure du côté controlatéral, mais cette fois, elle peut envoyer la dissection médiale à la ligne médiane linéaire alba et cautériser les perforateurs passant à travers la gaine rectrice antérieure droite. Au fur et à mesure qu’ils sont visualisés, réalisez l’hémostase, irriguez et placez de la gaze humide sur le rabat surélevé.

Les parties cutanées fascinées du lambeau de rat sont suffisamment minces pour permettre au lambeau de prendre toute son épaisseur de greffe de peau. Pour éviter cela et s’assurer qu’il s’agit d’un véritable modèle d’IRI, une fine feuille de silicone flexible est placée sous les parties cutanées fasciales du lambeau. Cette étape a été adoptée par d’autres chercheurs qui ont entrepris des modèles de volets de tramway chez des rats découpant la feuille de silicium en ovales.

Ceux-ci doivent être suffisamment grands pour couvrir la majeure partie de la zone sous les parties fascicutanées du lambeau. Cependant, des précautions doivent être prises pour s’assurer que le bord de la peau peut être fermé sans aucune tension et qu’il n’y a pas de pression sur les perforateurs passant par le centre de la gaine de l’érectus antérieur gauche. Les feuilles de silicone sont ensuite suturées en place avec six oh Vicryl recouvertes de gaze humide pour revenir au bord inférieur du muscle erectus antérieur gauche cautérisé le perforateur le plus inférieur vu découpé une petite fenêtre dans la gaine du droit antérieur à l’aide de micro-ciseaux et de pinces grises incurvées pointues.

Disséquez lentement le long du bord médial du muscle droit gauche jusqu’à ce que ses muscles s’amincissent, mais avant que sa gaine postérieure du droit ne soit percée, répétez l’opération sur le côté latéral, puis dissèquez médialement jusqu’à ce que le ventre du muscle soit au sommet du bord incurvé de la pince et que les pointes soient libres au niveau du bord médial. Introduisez six centimètres d’étholone dans les mâchoires de la pince et attachez le muscle du recteur inférieur. Ce faisant, nous disposons maintenant d’un lambeau myocutané alimenté par un pédicule vasculaire les vaisseaux épigastriques supérieurs profonds recouverts de gaze humide.

À l’aide de simples sutures interruptives, fixez le rabat pour réduire la perte d’humidité comme indiqué. Étendez la plaie vers le haut juste à gauche de la fermeture éclair du sternum. Suturez ce tissu dans le quadrant supérieur gauche pour améliorer le champ de vision.

Découpez une fenêtre dans la gaine supérieure du droit antérieur gauche. Étendez la plaie médialement jusqu’à ce qu’un changement évident de la trajectoire de la fibre musculaire soit observé, passant de fibres verticales serrées du droit à des fibres OBL faiblement tassées. Insérez soigneusement la pince incurvée entre ces plans musculaires et étendez-la latéralement par dissection émoussée.

Coupez soigneusement à l’aide de micro-ciseaux sur la surface supérieure fermée de ces pinces. Couper à travers le ventre du muscle droit gauche pour révéler les vaisseaux épigastriques supérieurs profonds gauches sous-jacents à l’aide de micro-instruments et d’une puissance élevée sur le microscope opératoire. Séparez soigneusement l’artère et la veine et enlevez toute graisse environnante.

Appliquez une pince LAN traumatique sur l’artère et la veine et démarrez le compte à rebours pour la période ischémique de 30 minutes. Irriguez le puits créé autour des pinces et recouvert de gaze humide. Demandez à votre assistant d’administrer la buprénorphine et le liquide chaud en commençant par le quadrant supérieur gauche de l’animal.

Suturer le lambeau à l’aide de sutures sous-cutanées continues à l’aide de six oh Vicryl. Continuez le long du bord inférieur de la plaie. Continuez vers le haut du bord du rabat à droite de l’animal et le bord supérieur.

S’arrêter et s’attacher lorsque vous arrivez à la fermeture éclair d’un sternum. Lorsque la période ischémique de 30 minutes est terminée, retirez les pinces et irriguez le puits avec une solution saline chaude. Suturez les bords coupés de la gaine du recteur en place avec six oh Vicryl.

En prenant grand soin de ne pas endommager le pédicule vasculaire sous-jacent. N’appliquez pas trop de tension car cela entraînerait un pliage des vaisseaux. Terminez ensuite la suture sous-cutanée.

En prenant soin d’enterrer tous les nœuds sous la peau. Nettoyez la zone de la plaie et laissez-la sécher. Redessinez les zones du rabat.

Scanner à nouveau l’animal pour obtenir une évaluation postopératoire du pourcentage de profusion de la surface, la nécrose plate entière est illustrée dans cette figure, N est égal à 10, une moyenne et un MEB sont indiqués. La perfusion absolue est représentée sur cette figure aux quatre points temporels. Préopératoire, postopératoire : 24 et 48 heures, n est égal à 10, ce qui signifie qu’un MEB est montré, que les images laser Doppler et les photographies correspondantes aux quatre points temporels pour trois animaux sont présentées ici.

La paroi abdominale antérieure du rat a beaucoup moins de graisse sous-cutanée que la paroi abdominale antérieure de la plupart des femmes subissant une chirurgie de lambeau T pour la reconstruction mammaire. Le modèle décrit dans ce texte est conçu spécifiquement comme un modèle d’ischémie, de brève lésion de profusion dans les lambeaux myocutanés afin que les effets des thérapies de préconditionnement puissent être évalués en utilisant la nécrose cutanée et la profusion comme mesures de résultats. La procédure détaillée dans cet article ne modélise pas spécifiquement des problèmes tels que la nécrose graisseuse, qui sont encourues dans les lambeaux humains lorsque des lambeaux contenant des composants graisseux importants sont délibérément prélevés pour créer une projection pour les grandes reconstructions mammaires.

Direct in vivo. L’observation de la microcirculation n’est pas démontrée dans ce protocole, mais a été décrite dans le modèle musculaire chma et dans un lambeau ostéomyocutané. Le modèle T tram est un modèle à lambeau myocutané.

Si les chercheurs s’intéressent particulièrement au lambeau ostéomyocutané, ce modèle n’est pas approprié, mais un modèle alternatif a été décrit dans la littérature. On retrouve ce modèle fiable et reproductible de lésion d’ischémie de profusion dans un lambeau myocutané.