Évaluation de ventriculaire droite Structure et fonction dans le modèle de souris de l'artère pulmonaire constriction par échocardiographie transthoracique

L’objectif global de cette procédure est d’établir une méthode non invasive pour évaluer la structure et la fonction du ventricule droit dans un modèle murin de constriction de l’artère pulmonaire. Ceci est accompli en obtenant d’abord par échographie, les vues parasternales du grand axe B et M pour obtenir la dimension de la chambre du ventricule droit, le raccourcissement fractionnel et l’épaisseur de la paroi du ventricule droit. La deuxième étape consiste à obtenir une vue parasternale à court axe au niveau papillaire moyen pour calculer le changement de surface fractionnaire.

Ensuite, la vue parasternale à court axe au niveau de la valve aortique est obtenue pour atteindre l’épaisseur de la paroi du VD et la vitesse de pointe de l’artère pulmonaire. La dernière étape consiste à obtenir une vue parasternale modifiée sur le grand axe du VD et de l’AP Pour calculer la vitesse de pointe de l’artère pulmonaire, le calcul de l’AP peut être effectué à partir de l’axe court et de l’axe long. En fin de compte, sur la base des images ci-dessus, la cinquième étape, le calcul et l’analyse des données peuvent être effectués hors ligne.

Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes comme la caractérisation du RV, est que l’échocardiographie est une méthode non invasive. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans l’évaluation de la structure et de la fonction du VD. Pour commencer ce protocole, prélevez d’abord des souris mâles C 57 black six âgées de huit semaines et laissez-les s’acclimater pendant une semaine avant toute procédure expérimentale.

Ensuite, anesthésie complètement les animaux et effectue l’occlusion de l’artère pulmonaire conformément aux directives de l’A VMA et aux protocoles iacuc approuvés de votre établissement. Notez que lors de l’imagerie, le bon choix de l’anesthésie, comme une courte durée d’isoflurane inhalé, est crucial pour le maintien du rythme cardiaque à des taux physiologiques normaux. Les images, comme on le voit ici, sont collectées à l’aide du système vivo 2100.

Des images similaires peuvent être obtenues à l’aide de systèmes d’imagerie par ultrasons d’autres fabricants. Il est recommandé d’obtenir et d’analyser toutes les images à l’aveugle dans la mesure du possible. Commencez par utiliser le mode B pour obtenir une vue parasternale longitudinale complète du ventricule gauche avec l’animal en position couchée.

Sur la plateforme. Positionnez la sonde à ultrasons de 40 mégahertz, également connue sous le nom de MS five 50 D, sur l’animal avec un angle d’environ 30 degrés dans le sens inverse des aiguilles d’une montre par rapport à la ligne parasternale gauche, l’encoche pointant dans la direction du dorlot. Ajustez ensuite l’angle de la sonde en l’inclinant légèrement le long de l’axe Y comme on le voit ici pour obtenir une vue complète de la chambre du ventricule gauche au centre de l’écran.

Une fois que les points de repère appropriés sont clairement visualisés, passez en mode M, une ligne indicatrice s’affichera à l’écran. En mode M, la ligne doit être positionnée de manière à traverser la partie la plus large de la chambre ventriculaire droite en utilisant l’aorte comme point de repère, comme illustré ici dans un modèle d’occlusion de l’artère pulmonaire et une souris fictive. Dans cette vue, la paroi du ventricule droit et le septum intraventriculaire doivent être clairement visibles, assurez-vous que la profondeur de mise au point se trouve au centre de la chambre du ventricule droit.

Enregistrez les données à la fréquence d’images la plus élevée possible pour mesurer la dimension de la chambre ventriculaire droite, le raccourcissement fractionnel et l’épaisseur de la paroi du ventricule droit hors ligne. Ensuite, pour obtenir des changements de surface fractionnaire, passez en mode B. Trouvez ensuite la vue de l’axe long comme précédemment, puis tournez la sonde de 90 degrés dans le sens des aiguilles d’une montre Pour obtenir la vue de l’axe court, inclinez légèrement la sonde le long de l’axe X de la sonde pour éviter la vue obstructive du sternum.

Ensuite, déplacez-vous légèrement vers le haut et vers le bas le long de l’axe Y de la sonde. Pour obtenir la vue papillaire moyenne, recherchez la vue avec la plus grande dimension de chambre dans cette vue, les muscles papillaires sont généralement situés aux positions deux et cinq heures, comme on le voit ici maintenant à partir de la vue parasternale à axe court court, déplacez la sonde sur l’axe Y vers le crâne jusqu’à ce que la section transversale de la valve aortique puisse être vue au milieu de la fenêtre. La voie d’éjection ventriculaire droite doit être visible sur le dessus sous la forme d’une structure en forme de croissant avec la valve tricuspide séparant le ventricule droit de l’oreillette droite.

Comme illustré ici, enregistrez les données à l’aide de ctor pour la mesure du ventricule droit. L’épaisseur de la paroi hors ligne reste à la même position. Passez en mode Doppler couleur et positionnez la ligne pointillée jaune PW parallèlement à la direction de l’écoulement dans la cuve.

Notez que les couleurs bleue et rouge indiquent respectivement un écoulement vers et vers la sonde. Placez ensuite le curseur d’onde de pouls sur la zone sténosée. Il est acceptable d’avoir un angle de sonde inférieur à 20 pour des données d’enregistrement de mesure précises à l’aide du ctor pour la mesure de la vitesse de crête PA hors ligne.

Ensuite, pour obtenir une vue parasternale modifiée sur l’axe long, continuez en mode B et positionnez la sonde sur la ligne parasternale droite et inclinez lentement la sonde à un angle d’environ 30 à 45 degrés sur l’axe Y de la sonde vers la poitrine pour visualiser clairement l’artère pulmonaire traversant l’aorte. Passez ensuite en mode Doppler couleur et positionnez la ligne pointillée jaune PW parallèlement à la direction de l’écoulement dans le récipient. L’angle Doppler doit être aussi proche que possible de zéro degré tout en maintenant la directionnalité parallèle au flux PA.

Placez le curseur PW à l’extrémité des feuillets de la valve pulmonaire et enregistrez les données à l’aide du ctor et mesurez la vitesse de crête de l’AP. L’épaisseur de la paroi du ventricule droit hors ligne peut être calculée à partir des données du mode B obtenues à partir de la vue parasternale du ventricule droit sur un petit axe au niveau de l’aorte. Commencez par sélectionner l’outil de traçage de zone 2D pour tracer la zone de la paroi du ventricule droit au niveau de la diastole, comme on le voit ici en rose.

Utilisez ensuite l’outil de traçage de distance pour tracer les circonférences intérieures et externes de la paroi de la piste d’écoulement du ventricule droit. Prenez la moyenne des circonférences interne et externe, l’épaisseur de la paroi du ventricule droit peut être calculée à l’aide de l’équation vue ici. Des mesures cohérentes de l’épaisseur, de la surface ou des dimensions de la paroi du ventricule droit peuvent être effectuées à l’aide de plusieurs fenêtres acoustiques dans les axes long et court.

Le choix de certaines de ces fenêtres dépendra de l’expérience de l’opérateur et peut tenir compte d’une certaine variabilité, comme on le voit ici. La fonction systolique du ventricule droit peut être mesurée en plaques, vue en pourcentage de raccourcissement fractionné ou en vue musculaire papillaire moyenne en pourcentage de changement de surface fractionnée respectivement. La dilatation du RV peut être mesurée dans les axes long et court comme la dimension de la chambre du ventricule droit et la surface du ventricule droit.

Dans la diastole, l’épaisseur de la paroi libre du ventricule droit en tant que marqueur de l’hypertrophie du VD peut être déterminée avec précision soit en utilisant le mode M, soit la méthode de la trace de zone. De même, la vitesse maximale de l’artère pulmonaire peut également être obtenue avec le mode parasternal grand axe ou axe court. Des mesures fiables de la vitesse de crête de l’AP et donc du gradient de pression de crête dans l’AP peuvent être obtenues à l’aide d’un Doppler couleur dans les fenêtres acoustiques à court et à long axe.

Enfin, dans cette étude, nous montrons que l’échocardiographie non invasive est une alternative viable à la méthode de cathétérisme cardiaque droit terminal actuellement utilisée comme référence pour la mesure du RVSP chez cinq animaux. Un cathétérisme a été effectué pour comparaison avec RVSP. Les mesures et les calculs de pression étaient très comparables.

Une fois mesurée, cette technique peut être réalisée en 15 à 20 minutes si elle est correctement exécutée. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de se rappeler de maintenir la fréquence cardiaque des souris à des niveaux physiologiques. Suite à cette procédure, un cathétérisme du cas ventriculaire des côtes peut être effectué afin d’obtenir une pression systolique ventriculaire des côtes.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de mesurer les changements structurels et fonctionnels dans le ventricule droit à l’aide de l’échocardiographie chez la souris après une constriction de l’artère pulmonaire.