הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

עיגון אשך מעוות: מודל חולדה של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של האשך

652 צפיות

DOI:

10.3791/67181

14 בנובמבר 2025

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מתאר הליך שלב אחר שלב ליצירת מודל של איסכמיה/רפרפוזיה של האשכים לייצור מודל ניתן לשחזור של פיתול האשכים בחקר המנגנונים הפתולוגיים של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה באשכים.

תקציר

פציעות איסכמיה-רפרפוזיה (IR) קשורות למספר פתולוגיות, כולל פגיעה באשכים. מודלים מוקדמים יותר של בעלי חיים של IR אשכים, הכוללים פיתול חוט הזרע כדי להשיג איסכמיה, רצופים קשיים טכניים רבים המביאים לחוסר יכולת לשחזר את המודל באופן עקבי. לפיכך, אנו מציגים שיטה פשוטה להשראת IR אשכים במודל חולדה שניתן לשכפל בקלות.

שיטה זו כוללת הפרדת הגוברנקולום מהאשך, יצירת כיס שק האשכים, סיבוב האשך ב-720 מעלות בכיוון השעון בקוטב התחתון שלו ועיגון האשך לבסיס שק האשכים. מודל זה מכווץ ביעילות את כלי האשכים וגורם לאיסכמיה באשכים. לאחר שעה אחת של איסכמיה, מסירים את תפר העיגון והאשך לא מסובב. החבל והכלים הנלווים לו נבדקים כדי להבטיח סבלנות. לאחר IR, האשך נאסף ונחתך להערכה היסטופתולוגית.

היסטולוגיה של האשכים נבדקה עבור נגעים דימומיים מוקדיים, גודש בכלי הדם, מרחב אינטרסטיציאלי מורחב וחדירת תאים דלקתיים. יתר על כן, נבדקו סמנים של עקה חמצונית (מלונדיאלדהיד, גלוטתיון מופחת, קטלאז וסופראוקסיד דיסמוטאז), דלקת (MPO, TNF-α, IL-1β) ואפופטוזיס (ביטוי קספאז 3). שיטה זו מספקת מודל פשוט יותר וניתן לשחזור בקלות לחקר הפתופיזיולוגיה של פגיעה ב-IR באשכים. יתרה מכך, מודל זה פותח צוהר לבחינת סוכנים טיפוליים פוטנציאליים בניהול פגיעה ב-IR באשכים.

מבוא

פיתול האשך (TT) הוא מצב חירום אורולוגי חריף בו חוט הזרע, יחד עם כלי הדם הנלווים אליו, מתפתל, וכתוצאה מכך איסכמיה של האשך. הוא מאופיין בכאבי בטן עזים, בחילות והקאות1. האיסכמיה, אם אינה נפתרת על ידי עיוות בזמן, גורמת לנמק ולאובדן האשך המדובר2. עם זאת, התערבות כירורגית בזמן על ידי התרת פיתול ושיקום זרימת הדם לאשך מביאה לפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה (IRI), מה שגורם לשיבוש היסטולוגי וביוכימי של האשך ותפקודיו 3,4.

מודלים של TT בבעלי חיים שימשו באופן נרחב כדי לחקור את המנגנונים של IRI, הנובעים תמיד מניסיונות למנוע מ-TT להתקדם לנמק 5,6. ישנם שני דגמים של TT, הידוק חוט זרע ופיתול חוט. שניהם מבוצעים בתנאים סטריליים ובהרדמה מספקת. חומרי הרדמה נפוצים בשימוש כוללים קטמין לבד או בשילוב עם קסילזין7. חומרי הרדמה נפוצים אחרים הם אורטן ונתרן תיופנטל, הניתנים בדרךכלל תוך צפק. עם זאת, לשני הדגמים יש מגבלות.

בעוד שהידוק ישיר של עורק האשכים עם קליפסים מיקרו-וסקולריים 8,9 שימש כאמצעי לגרימת איסכמיה למשך זמן מוגדר (בדרך כלל שעה) לפני השראת רפרפוזיה על ידי הסרת המהדקים, השיטה אינה מחקה במדויק את המראה הקליני של פיתול האשך10. יתר על כן, למרות שפיתול כירורגי של חוט הזרע להשגת איסכמיה11,12 מייצג יותר את ההצגה הקלינית, הוא טומן בחובו קשיים טכניים רבים שלא טופלו על ידי התיאורים הקצרים שנתקלו בהם בפרק השיטות של מאמרים בנושא.

קושי טכני מובהק שנתקל בו לעתים קרובות הוא זה של החזרת ועיגון האשך לרצפת שק האשכים כדי למנוע התפרקות בתקופת האיסכמיה. בעוד שחלק מהחוקרים אינם מזכירים את עיגון האשך לדופן שק האשכים13,14, אחרים רושמים עיגון האשך לדופן שק האשכים על ידי תפירת הטוניקה אלבוגינאה אליו 15,16,17. התיאורים של תהליך עיגון האשך לדופן שק האשכים היו, בדרך כלל, קצרים מאוד ולא מפורשים 7,18. ניסיונות לשכפל את ההליכים המתוארים בסעיפי השיטות של מאמרים קודמים נתקלו אפוא בקשיים מעשיים חמורים, כגון פגיעה באשך על ידי ניקוב הטוניקה אלבוגינאה, ואי יכולת להחזיר את האשך לשק האשכים מבלי להפעיל לחץ מיותר. יתר על כן, מבחינה מעשית, החזרת האשך לשק האשכים לאחר גרימת פיתול הייתה אתגר גדול בניסיונותינו לגרום ל-TT ניסיוני בניתוח. קשיים טכניים כאלה הביאו אפוא לחוסר היכולת לשחזר את המודל באופן עקבי בין חוקרים שונים.

לפיכך, ההליך המתואר במחקר זה ליצירת מודל TT בחולדות מזהה את הקשיים הטכניים שנתקלו בהם במודלים קודמים ומציע להם פתרונות. מודל זה מספק טכניקה פשוטה הניתנת לשחזור בקלות ומחקה את החוויה האנושית. המודל הוא, אם כן, נקודת התחלה אמינה וניתנת לשחזור בחקר המנגנונים הפתולוגיים הנובעים מ-IRI.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

המחקר אושר על ידי ועדת סקירת האתיקה של הפקולטה למדעי הרפואה הבסיסיים, האוניברסיטה הטכנולוגית לדוק אקינטולה, אוגבומוסו, מדינת אויו, ניגריה (ERCFBMSLAUTECH:033/05/2024). למחקר זה נעשה שימוש ב-20 חולדות לבקניות בגילאי 10-12 שבועות ובמשקל 180 ±-10 גרם. הם התאקלמו במשך שבועיים ולאחר מכן, הוקצו באופן אקראי לקבוצה המופעלת על ידי דמה (SO) או לקבוצת פיתול/עיוות (T/D) (n = 10 חולדות לקבוצה). חולדות ה-SO עברו ניתוח דומה, בדיוק כמו חולדות T/D, אך האשכים לא היו מעוותים או מעוגנים כדי לגרום ל-T/D.

1. הכנה והרדמה לפני הניתוח

  1. חשוף את בעלי החיים (קבוצות SO ו-T/D) לצום לילה של 12 שעות לפני הניתוח.
  2. ביום הניתוח, יש להרדים את בעלי החיים (קבוצות SO ו-T/D) בשילוב של קטמין 50 מ"ג/ק"ג וקסילזין 10 מ"ג/ק"ג תוך צפקית, ולאשר את הלימות ועומק ההרדמה על ידי התבוננות בחוסר התגובה של בעלי החיים ללחץ כרית הכפות וגירוי קל של השפם.
  3. גלחו את האזורים השמאליים של שק האשכים, הפרינאום והמפשעה של בעלי החיים (קבוצות SO ו-T/D) ולאחר מכן נקו אותם עם רוח מתילציה ותמיסת חיטוי פובידון.

2. אינדוקציה של איסכמיה של האשך

  1. ניוד האשך
    1. הפעל בעדינות לחץ כלפי מטה על הבטן כדי לדחוף את האשך השמאלי (של שתי קבוצות ה-SO וה-T/D) לתוך שק האשכים.
    2. אחזו בחוזקה באשך השמאלי (הן מקבוצות SO והן מקבוצות T/D) ובצעו חתך גבוה בשק האשכים, באורך ~1.5 ס"מ, כדי לחשוף את האשך הבסיסי בתוך טוניקה וגינליס (TV).
    3. אתר את הקוטב התחתון של האשך (הן מקבוצות SO והן מקבוצות T/D), במיוחד את הזנב אפידידימיס, ועשה חתך בטלוויזיה שמעליו עם מספריים קטנות לניתוח.
    4. הניחו את המספריים מתחת לטלוויזיה והרחיבו אותם מעט כדי להראות את שני קצוות הטלוויזיה, ואז אחזו בקצוות משני הצדדים בעזרת מלקחיים מעוקלים של עורק יתושים. זה חל על שתי קבוצות ה-SO וה-T/D.
      הערה: שלב זה חשוב מאוד מכיוון שהוא מקים מישור רקמות שיאפשר החזרה קלה של האשך לשק האשכים לאחר השראת פיתול.
    5. הארך את החתך (של שתי קבוצות ה-SO וה-T/D) בטלוויזיה ב-~0.5 ס"מ.
    6. הפעל לחץ עדין על הבטן התחתונה כדי להוציא את האשך (הן מקבוצת SO והן מקבוצת T/D).
    7. רק עבור קבוצת T/D, גייסו את האשך וזהו את אשך הגוברנקולום, ולאחר מכן חתכו אותו כדי לנתק את האשך מרצפת שק האשכים.
      הערה: שלב זה חשוב מכיוון שהוא מאפשר לסובב את האשך. הגוברנקולום מזוהה כרצועה המשתרעת מהקצה הזנבי של האשך לתעלת המפשעה ומסתיימת בהרחבה דמוית כפתור19,20.
    8. אחוז באשך (של חיות T/D) בקוטב התחתון שלו (היכן שנמצא הזנב האפידידימיס), וסובב אותו 720 מעלות בכיוון השעון ורשום את השעה (מסמן את תחילת האיסכמיה).
  2. עיגון האשך האיסכמי
    1. צור שק אשכים על ידי החזקת האשך המעוות (של חיות T/D) במקומו ודחיפת מספריים ארוכים ומנתחים כלפי מטה לאורך מישור הרקמה מתחת לטלוויזיה לתוך שק האשכים ליצירת שקית.
    2. עבור חיות T/D בלבד, הכנס את תפר העיגון על ידי החזקת המספריים במקומם והכנסת תפר עיגון באמצעות תפר כרומי 2-0 מהחלק החיצוני של הנקודה הנמוכה ביותר של שק האשכים שנוצר קודם לכן. הכנס את התפר לרקמת החיבור בקוטב התחתון של האשך והחזיר אותו לתוך השקית ומחוצה לה ליד נקודת הכניסה הראשונית.
    3. עוגן את האשך לבסיס שק האשכים על ידי משיכת האשך המפותל (של חיות T/D) לתוך שק האשכים והפעלת מתיחה מטה בעדינות על שני קצוות התפר, ולאחר מכן קשר את שני קצוות התפר בחוזקה על עור שק האשכים.
    4. סגור את החתך בשק האשכים (של חיות ה-SO וה-T/D) עם תפר רציף של חוט הארנק באמצעות כרום 2-0.
      הערה: זה מומלץ להסרה קלה כאשר יש לבצע זילוף.

3. חקירות ביוכימיות והיסטופתולוגיות

הערה: ודא שהחוקרים המבצעים את הבדיקות הביוכימיות והבדיקות ההיסטופתולוגיות עיוורים לפרוטוקול המחקר.

  1. בסוף תקופת הניסוי, גרמו לבעלי החיים לעבור צום של 12 שעות למשך הלילה והמתת חסד (50 מ"ג/ק"ג קטמין ו-10 מ"ג/ק"ג קסילזין i.p).
  2. הסר והפרד את האשכים השמאליים ממבנים דבקים.
  3. הומוגניזציה של חמש מתוך 10 רקמות אשכים מכל קבוצה במאגר הומוגניזציה (0.25 M סוכרוז, 0.5 מ"מ EDTA, 5 מ"מ היסטידין, ו-PI מומס ב-PBS, pH 7.4), וקבע את חמש רקמות האשכים הנותרות בתמיסה של בואין להערכה היסטולוגית.
  4. סובב את ההומוגנטים ב-10,000 × גרם למשך 15 דקות ב-4 מעלות צלזיוס בצנטריפוגה קרה כדי להשיג את הסופרנטנט לאנליזות ביוכימיות.
  5. קבע את פעילות קסנטין אוקסידאז באשכים (XO) על ידי בדיקה קולורימטרית אנזימטית באמצעות ערכות מעבדה סטנדרטיות בהתאם להנחיות היצרן.
  6. בדיקת תכולת מלונדיאלדהיד אשכים (MDA) על ידי קולורימטריה21.
    1. קביעת ריכוז חמצון שומנים באמצעות חומרים מגיבים לחומצה תיוברביטורית (TBARS) המיוצרים במהלך חמצון שומנים
      הערה: שיטה זו מבוססת על התגובה בין חומצה 2-תיוברביטורית (TBA) למאלונדיאלדהיד, תוצר סופי של חמצון שומנים. חימום ב-pH חומצי נותן קומפלקס כרומוגני ורוד ([TBS] 2-malondialdehyde adduct) שספיגתו ב-532 ננומטר נמדדת.
      1. דה-פרוטאיניזציה של 200 מיקרוליטר מהדגימה עם 500 מיקרוליטר של חומצה טריכלורואצטית (TCA) וצנטריפוגה ב-3,000 סל"ד למשך 10 דקות.
      2. מוסיפים 1 מ"ל של 0.75% TBA ל-0.1 מ"ל של הסופרנטנט, מרתיחים באמבט מים למשך 20 דקות בחום של 100 מעלות צלזיוס, ומצננים עם מי קרח.
      3. קרא את הספיגה של הדגימה/תקן ב-532 ננומטר באמצעות ספקטרופוטומטר כנגד הריק. קבע את ריכוז ה-TBARS שנוצר על ידי אקסטרפולציה מהעקומה הסטנדרטית.
  7. בדיקת פעילויות האשכים של סופראוקסיד דיסמוטאז (SOD)22, קטלאז23 וגלוטתיון פרוקסידאז (GPx)24 באמצעות פרוטוקולים מבוססים כפי שדווח בעבר.
    1. קביעת SOD
      1. מדללים 1 מ"ל מהדגימה ב-9 מ"ל מים מזוקקים כדי ליצור דילול של 1 ל-10. הוסף 0.2 מ"ל מהדגימה המדוללת הזו ל-2.5 מ"ל של מאגר קרבונט 0.05 M (pH 10.2) לשיווי משקל ספקטרופוטומטר.
      2. התחל את התגובה על ידי תוספת של 0.3 מ"ל אדרנלין טרי של 0.3 מ"מ שהוכן לתערובת וערבב במהירות על ידי היפוך.
      3. לקובט הייחוס יש להוסיף 2.5 מ"ל חיץ, 0.3 מ"ל מהמצע (אדרנלין) ו-0.2 מ"ל מים.
      4. עקוב אחר העלייה בספיגה כל 30 שניות למשך 150 שניות ב-480 ננומטר.
    2. קביעת קטלאז
      1. מערבבים 1 מ"ל של הסופרנטנט של הומוגנט האשכים עם 19 מ"ל מים מדוללים כדי לתת דילול של 1:29 של הדגימה.
      2. קח 4 מ"ל של תמיסת H2O2 (800 מיקרומול) ו-5 מ"ל של מאגר פוספט בבקבוק תחתון שטוח של 10 מ"ל.
      3. מערבבים 1 מ"ל מתכשיר האנזים המדולל כהלכה (שלב 4.6.3.1) עם תערובת התגובה (שלב 4.6.3.2) בתנועת סיבוב עדינה ב-37 מעלות צלזיוס. משוך 1 מ"ל מתערובת התגובה והוסף אותה ל-2 מ"ל של מגיב דיכרומט/חומצה אצטית במרווחים של 60 שניות.
      4. קבע את רמות הקטלאז בדגימה על ידי השוואת הספיגה ב-653 ננומטר לזו של תקן קטלאז מוסמך.
    3. בדיקת GPx
      1. דגרו את תערובת התגובה המכילה את הדגימה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 3 דקות, הוסיפו 0.5 מ"ל של 10% חומצה טריכלורואצטית (TCA), וצנטריפוגה ב-3,000 סל"ד למשך 5 דקות.
      2. ל-1 מ"ל של הסופרנטנט, הוסף 2 מ"ל של מאגר פוספט ו-1 מ"ל של תמיסת 5'-5'- dithiobis-(2-dinitrobenzoic acid (DTNB), וקרא את הספיגה ב-412 ננומטר כנגד ריק.
      3. קבע את פעילות הגלוטתיון פרוקסידאז על ידי התוויית העקומה הסטנדרטית ואקסטרפולציה של ריכוז ה-GSH הנותר מהעקומה.
  8. בדיקת MPO וגורם נמק גידול-אלפא (TNFα)
    הערה: בדיקה זו כוללת חמצון של גואיקול לגואיקול מחומצן בנוכחות מי חמצן. לגואיקול בצורתו המחומצנת יש צבע חום, הנמדד פוטומטרית ב-470 ננומטר.
    1. השתמש בערכות ELISA סטנדרטיות כדי לקבוע את פעילות מיאלופרוקסידאז האשכים (MPO)21,25 ואת רמות גורם נמק הגידול-אלפא (TNF-α).
  9. בדיקה היסטופתולוגית באמצעות כתם המטוקסילין ואאוזין (H&E)26,27 ואימונוהיסטוכימיה לביטוי קספאז 3
    1. לשמר את רקמת האשכים בנוזל של בואן; שוטפים את הטישו עם טולואן, טובלים בשעוות פרפין ודוגרים בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס למשך הלילה.
    2. קח חלקים בעובי ~5 מיקרומטר, הסר מהם והתייבש מחדש, אחזר את האנטיגן באמצעות מאגר ציטראט שחומם מראש והשאיר להתקרר למשך 30 דקות.
    3. נקו את המגלשות עם מגבוני מעבדה, סמנו את אזורי החתך בעט הידרופובי וסדרו את המגלשות בתא לח.
    4. דגרו את המגלשות למשך 10 דקות לאחר חסימה של פעילות פרוקסידאז אנדוגנית באמצעות מי חמצן. שוטפים את השקופיות עם PBS פעם אחת, מורחים את גוש החלבון ודוגרים למשך 10 דקות.
    5. שטפו את השקופיות עם PBS 2x, מרחו את הנוגדנים הראשוניים המתאימים (קספאז 3), דגרו את השקופיות למשך 45 דקות ושטפו 2x עם PBS.
    6. יש למרוח את הנוגדן המשני, לדגור למשך 25 דקות, לשטוף עם PBS 2x ולהוסיף את פולימר ה-HRP. חזור על מחזור הדגירה למשך 25 דקות ושטיפה פעמיים עם PBS.
    7. דגרו חלקים למשך 5 דקות במצע דיאמינובנזידין (DAB), שטפו פעמיים עם PBS, כתם נגד עם המטוקסילין ושטפו במים מזוקקים.
    8. מרחו תמיסת כחול על החלקים, שטפו, ייבשו, שקפו והרכיבו לבדיקה איכותית.
    9. בדוק את הרקמות תחת מיקרוסקופ אור וצלם פוטומיקרוגרפים בהגדלה של פי 100 ופי 400 עם מצלמה דיגיטלית המחוברת למיקרוסקופ.

4. ניתוח סטטיסטי

  1. בצע ניתוח סטטיסטי עם התוכנה הנבחרת. בצע מבחן אנדרסון-דרלינג, מבחן ד'אגוסטינו ופירסון ומבחן שפירו-וילק כדי לבדוק את הנורמליות.
  2. בצע מבחן t לא מזווג כדי לבדוק את ההבדל המובהק בין שתי הקבוצות: SO ו-T/D.
  3. הצג את הנתונים כממוצע ± שגיאת תקן של הממוצע. הגדר את רמת המובהקות ב-p < 0.05, p < 0.01 ו-p < 0.001 (כפי שדווח במקראי האיורים).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

פעילות XO, רמת MDA ופעילויות של SOD, קטלאז ו-GPx באשכים שימשו כסמנים של עקה חמצונית. פיתול/עיוות (T/D) הגדיל באופן ניכר את פעילות ה-XO ואת רמות ה-MDA והפחית את פעילות האשכים של SOD, קטלאז ו-GPx בחולדות T/D בהשוואה לחולדות שעברו ניתוח דמה (איור 1), המתאר את תפקיד העקה החמצונית בפגיעה הנגרמת על ידי T/D.

יתר על כן, TNF-α, מתווך דלקת, ו-MPO, אינדקס של חדירת נויטרופילים, שימשו כסמנים לדלקת. T/D גרם לעליי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מאמר זה והסרטון הנלווה נותנים תיאור מפורט שלב אחר שלב של האינדוקציה הכירורגית של TT לחקר IRI האשכים באמצעות גישת העיגון. השיטה שימושית במיוחד בכך שהיא מונעת את ההחצנה הממושכת של האשך הנגרמת על ידי טכניקות הידוק7 ובמקביל, מדגמת באופן הדוק יותר את ההצגה הקלינית של TT בבני אדם10,12.

כאשר איסכמיה נקבעה לפרק הזמן שנקבע, מבוצע רפרפוזיה על ידי הסרת תפר חוט הארנק כדי לקבל גישה לאשכים, ה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי אינטרסים להצהיר עליהם.

תודות

אנו מודים בזאת לעזרתו של מר אוג'נירן, ראש היחידה האודיו-ויזואלית של המכללה למדעי הבריאות, שסייע בצילום ובעריכה של ההליך.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
1 cc syringesלא חללא חללצורך הרדמה
2-0 chromic sutureלא חללא חללצורך ניתוח
Bard Parker knife handleלא חללא חללצורך ניתוח
Curved Mosquito artery forcepsלא חללא חללצורך ניתוח
Dissecting scissorsלא חללא חללצורך ניתוח
GraphPad Prism (version 8.0.2)
Ketamine injectionSwiss Parenterals LTD Gujarat India2321154הרדמה
Paracetamol injectionShanxi Zhongbao Pharmaceuticals, China220637משכך כאבים
PovidoneJAWA International limited Nigeria135Sשטיפה חיטוי
Procaine penicillin powderAnhui Chengshi Pharmaceutical Co Ltd China201906לצורך ניתוח
Surgical bladeלא חללא חללצורך ניתוח
Surgical glovesZhenjiang huayang latex products China210325
Stitch scissorsלא חללא חללצורך ניתוח
Toothed dissecting forcepsלא חללא חללצורך ניתוח
Xylazine injectionBioveta Czech Republic396228Aהרדמה
Light MicroscopeNovel Microscope, Chinaלא חללהערכה היסטופתולוגית
Digital CameraHayear, Chinaלא חללהערכה היסטופתולוגית
TNF-α kitElabscience, USAE-EL-H0109לצורך מבחן
Thermo Fischer kit (anti-mouse caspase 3 monoclonal for caspase 3 expression )Thermo Fischer Scientific Inc., USAלא חללהעברת אימונוהיסטוכימיה (caspase 3)

מקורות

  1. Obi, A. O., Okeke, C. J., Ugwuidu, E. I. Acute testicular torsion: A critical analysis of presentation, management, and outcome in southeast Nigeria. Niger J Clin Pract. 23 (11), 1536-1541 (2020).
  2. Yang, C., Song, B., Tan, J., Liu, X., Wei, G. H. Testicular torsion in children: a 20-year retrospective study in a single institution. Sci World J. 14 (11), 362-368 (2011).
  3. Ganjiani, V., Ahmadi, N., RaayatJahromi, A. Protective effects of Stevia rebaudiana aqueous extract on experimental unilateral testicular ischaemia/reperfusion injury in rats. Andrologia. 52 (2), e13469(2020).
  4. Afolabi, O., Alabi, B., Omobowale, T., Oluranti, O., Iwalewa, O. Cysteamine mitigates torsion/detorsion-induced reperfusion injury via inhibition of apoptosis, oxidative stress and inflammatory responses in experimental rat model. Andrologia. 54 (1), e14243(2022).
  5. Taskinen, S., Taskinen, M., Rintala, R. Testicular torsion: orchiectomy or orchiopexy. J Ped Urol. 4 (3), 210-213 (2008).
  6. Cost, N. G., Bush, N. C., Barber, T. D., Huang, R., Baker, L. A. Pediatric testicular torsion: demographics of national orchiopexy versus orchiectomy rates. J Urol. 185 (6S), 2459-2463 (2011).
  7. Akhigbe, R. E., Odetayo, A. F., Akhigbe, T. M., Hamed, M. A., Ashonibare, P. J. Pathophysiology and management of testicular ischemia/reperfusion injury: Lessons from animal models. Heliyon. 10, e27760(2024).
  8. Kehinde, E. O., et al. Significance of determining the point of reperfusion failure in experimental torsion of testis. Int J Urol. 12 (1), 81-89 (2005).
  9. Dokmeci, D., et al. Protective effect of L-carnitine on testicular ischaemia-reperfusion injury in rats: Cellular biochemistry and its modulation by active agents or disease. Cell Biochem Funct. 25 (6), 611-618 (2007).
  10. Ellati, R. T., Kavoussi, P. K., Turner, T. T., Lysiak, J. J. Twist and shout: a clinical and experimental review of testicular torsion. Kor J Urol. 50 (12), 1159-1167 (2009).
  11. Ranade, A. V., et al. Effect of vitamin E administration on histopathological changes in rat testes following torsion and detorsion. Sing Med J. 52 (10), 742-746 (2011).
  12. Jafari, A., Ghasemnejad-Berenji, H., Nemati, M., Ghasemnejad-Berenji, M. Topiramate: A novel protective agent against ischemia reperfusion-induced oxidative injury after testicular torsion/detorsion. Am J Em Med. 44, 257-261 (2021).
  13. Turner, T. T. Acute experimental testicular torsion: no effect on the contralateral testis. J Androl. 6 (1), 65-72 (1985).
  14. Baker, L. A., Turner, T. T. Leydig cell function after experimental testicular torsion despite loss of spermatogenesis. J Androl. 16 (1), 12-17 (1995).
  15. Salmasi, A. H., et al. Effect of morphine on ischemia-reperfusion injury: experimental study in testicular torsion rat model. Urology. 66 (6), 1338-1342 (2005).
  16. Karakaya, E., Ateş, O., Akgür, F. M., Olguner, M. Rosuvastatin protects tissue perfusion in the experimental testicular torsion model. Int Urol Nephrol. 42 (2), 357-360 (2010).
  17. Ikebuaso, A. D., Yama, O. E., Duru, F. I., Oyebadejo, S. A. Experimental testicular torsion in a rat model: effects of treatment with Pausinystalia macroceras on testis functions. J Repro Infertil. 13 (4), 218(2012).
  18. Esmaeilsani, Z., Barati, F., Mohammadi, R., Shams-Esfandabadai, N., Karimi, I. Effects of curcumin nanoparticles on the tissue oxidative stress following testicular torsion and detorsion in rat model. Iran J Vet Surg. 14 (2), 97-104 (2019).
  19. Samy, A., et al. The potential protective and therapeutic effects of platelet-rich plasma on ischemia/reperfusion injury following experimental torsion/detorsion of testis in the Albino rat model. Life Sci. 256, 117982(2020).
  20. Schumacher, J. Testis. Equine Surgery. Auer,, Stick, J. A., Saunders, J. A. W. B. , 775-810 (2006).
  21. Desser, R. K., et al. Guinea pig heterophil and eosinophil peroxidase. Arch Biochem Biophys. 148 (2), 452-465 (1972).
  22. Hp, M. The role of superoxide anion in the autoxidation of epinephrine and a simple assay for superoxide dismutase. J Biol Chem. 247, 3170-3175 (1972).
  23. Euler, H. V., Josephson, K. Uber catalase. IS European. J Org Chem. 452, 158-181 (1972).
  24. Rotruck, J. T., et al. Selenium: biochemical role as a component of glutathione peroxidase. Science. 179 (4073), 588-590 (1973).
  25. Akhigbe, R. E., et al. Testicular toxicity in cisplatin-treated Wistar rats is mitigated by Daflon and associated with modulation of Nrf2/HO-1 and TLR4/NF-kB signaling. J Trace Elem Med Biol. 85, 127489(2024).
  26. Ricken, A. M., Hamed, M. A., Akhigbe, R. E. Histopathological evaluation of infertility: Lessons from laboratory rodents. Histol Histopathol. 39, 671-690 (2024).
  27. Ajayi, A. F., Akhigbe, R. E. In vivo exposure to codeine induces reproductive toxicity: role of HER2 and p53/Bcl-2 signaling pathway. Heliyon. 6 (11), e05589(2020).
  28. Ricken, A. M., Hamed, M. A., Akhigbe, R. E. Histopathological evaluation of infertility: Lessons from laboratory rodents. Histol Histopathol. 39, 671-690 (2024).
  29. Aldhabaan, S., Hudise, J. Y., ALqarny, M., Alarfaj, A. Catgut versus polypropylene sutures for transcolumellar incision closure in open rhinoplasty: a retrospective cohort study. Cureus. 8, e9769(2020).
  30. Afolabi, O. A., et al. Atorvastatin-mediated downregulation of VCAM-1 and XO/UA/caspase 3 signaling averts oxidative damage and apoptosis induced by ovarian ischaemia/reperfusion injury. Redox Rep. 27 (1), 212-220 (2022).
  31. Akhigbe, R. E., et al. Omega-3 fatty acid rescues ischaemia/perfusion-induced testicular and sperm damage via modulation of lactate transport and xanthine oxidase/uric acid signaling. Biomed Pharmacother. 142, 111975(2021).
  32. Wei, S. M., Yan, Z. Z., Zhou, J. Curcumin attenuate ischemia-reperfusion injury in rat testis. Fertil Steril. 91, 271-277 (2009).
  33. Ritchey, M. L., Bloom, D. A. Modified dartos pouch orchiopexy. Urology. 45 (1), 136-138 (1995).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

איסכמיה של האשכיםפיתול חבל השכלההיסטולוגיה של האשכיםסמני עקה חמצוניתסמני דלקתסמני אפופטוזיסשק שכיתיהערכה היסטופתולוגית