Method Article

הערכת תפקוד החדר הימני במודלים ניסיוניים של יתר לחץ דם עורקי ריאתי

DOI:

10.3791/68248

⸱

June 27th, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory of Pulmonary Investigation, Institute of Biophysics Carlos Chagas Filho, Federal University of Rio de Janeiro

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הצגת שיטות מפורטות להערכת תפקוד החדר הימני תשפר את האיכות והאמינות של מחקר יתר לחץ דם ריאתי, תציע מסגרת חזקה למחקרים עתידיים ותשפר את יכולת השחזור במעבדות שונות.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

יתר לחץ דם ריאתי (PH) הוא מצב כרוני הקשור להישרדות מופחתת, מה שהופך אותו לתחום מחקר קריטי. מודלים ניסיוניים של PH שיפרו משמעותית את הבנתנו את הפתופיזיולוגיה שלו והקלו על תכנון ניסויים תצפיתיים וקליניים קטנים. עם זאת, חיוני לבסס מתודולוגיות סטנדרטיות כדי להבטיח השוואה בין מחקרים ניסויים וקבוצות מחקר שונות. סטנדרטיזציה לא רק משפרת את יכולת השחזור אלא גם מטפחת שיתוף פעולה בין צוותי מחקר.

בסרטון זה, אנו מתארים את השלבים המתודולוגיים הנדרשים לניתוח מדויק של הפרמטרים הפונקציונליים של PH. אלה כוללים הערכה אקו לב, ניקוב חדר ימין פולשני (RV) וחישוב מדד פולטון. לגבי אקו לב, מדידת זמן התאוצה העורקית הריאתית ויחס זמן הפליטה הריאתי, כמו גם חישוב תפוקת הקרוואנים, מוצגים בפירוט. לגבי מדידות פולשניות, מתוארים נהלים חיוניים, כולל פרוטוקולי הרדמה, מיקום אופטימלי של בעלי חיים, מערך אוורור מכני, פתיחה מדויקת של דופן החזה, הדמיה של הקרוואן וטכניקות ניקוב קרוואנים.

המתודולוגיה לדיסקציה חדרית (אינדקס פולטון) מוסברת בפירוט, כמו גם חישוב יחס הקרוואן/חדר השמאלי פלוס המחיצה, מתוקן למשקל גופו של בעל החיים. אנו מאמינים שמתן הצגה מפורטת של שיטות אלה ישפר את האיכות והאמינות של מחקר PH, יציע מסגרת חזקה למחקרים עתידיים וישפר את יכולת השחזור במעבדות שונות.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מדידה תפקודית נאותה של תפקוד החדר הימני (RV) בבעלי חיים קטנים הפכה חיונית מאז העלייה במחקרים המשתמשים במודלים של בעלי חיים במדעי הנשימה והלב. ישנם מספר מודלים של בעלי חיים של יתר לחץ דם ריאתי (PH), המשתמשים במונוקרוטלין1, היפוקסיה2 או Sugen + היפוקסיה3. הם שימשו היטב לחשיפת מסלולים פתופיזיולוגיים חדשים 1,4 ולחקורטיפולים פרמקולוגיים פוטנציאליים חדשים5 ולא תרופתיים ל-PH. עם זאת, למרות הגורם הסיבתי המוביל לפנוטיפ ה-PH, קיים חשש לגבי המדידה התפקודית של ביצועי RV, בעיקר מכיוון שתפקוד RV בדרך כלל (....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול המחקר אושר על ידי ועדת האתיקה לשימוש בבעלי חיים (CEUA) של האוניברסיטה הפדרלית של ריו דה ז'ניירו בתהליך מספר 043/22. כל הנהלים עמדו בעקרונות הטיפול בחיות מעבדה ובמדריך האקדמיה הלאומית למדעים של ארה"ב לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. המחקר פעל בהתאם להנחיות ARRIVE11.

1. הכנת בעלי חיים ופרוטוקול ניסוי

  1. חשב את מספר בעלי החיים כפי שדווח קודם לכן12.
    הערה: בהתחשב בכך שההבדלים ב-RVSP בין CTRL ל-PAH השיגו גודל אפקט של d = 3.95, בהנחה שיחס גודל מדגם של 1 וכוח סטטיסטי (1-β = 0.8) כדי לזהות הבדלים משמעותיים (α = 0.05), שלושה בעלי חיים לקבוצה היו נחוצים בפרוטוקול זה.
    2. ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

לצורך הניתוחים הסטטיסטיים, כל משתנה נבדק לנורמליות ושונות באמצעות מבחן שפירו-וילק. הנתונים מוצגים כאמצעים ± סטיית תקן. מבחן t הלא מזווג שימש להשוואת ריכוזי החלקיקים בקבוצות הביקורת (CTRL) ויתר לחץ דם עורקי ריאתי (PAH) (p<0.05).

שינויים אקו לב במודל החי של PAH
איור 4 מראה כי יחס ה-PAT/PET היה נמוך יותר בבעלי חיים עם PAH (0.43 ±-0.01 אלפיות השנייה) מאשר בחיות CTRL (0.26 ±-0.02 אלפיות השנייה, p = 0.0003), מה שמצביע על כך שהתנגדות מוגב.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

PAH היא מחלה מתקדמת המאופיינת בשיפוץ מוגזם של כלי הדם, המקדם עלייה בהתנגדות כלי הדם הריאתיים, וכתוצאה מכך עומס מוגבר של קרוואנים14. בהתאם לכך, ה-RVSP מייצג משתנה פונקציונלי שמתאם ישירות עם חומרת PAH15. עם הזמן, התגובה האדפטיבית של הקרוואן היא היפרטרופיה קונצנטרית מפצה (נמדדת על ידי מדד פולטון)16 והתרחבות חדרית (נמדדת על ידי קוטר יציאת הקרוואנים)17. בנוסף, תנגודת מוגברת של כלי הדם הריאתיים משנה.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין ניגודי אינטרסים להצהיר עליהם.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מודים למר אנדרה בנדיטו דה סילבה על התמיכה בניסויים, לגב' ורוניקה כריסטינה דוס סנטוס לימה על הטיפול בבעלי חיים, ולגב' לורנה או'בריאן על תיקון הדקדוק באנגלית. מחקר זה נתמך על ידי קרן המחקר הממלכתית של ריו דה ז'ניירו (FAPERJ E-26/202.766/2018, E-26/010.001488/2019).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
<חזק>ריאגנטים
אלכוהול 70%מונטנגרוALC70-001
ג'ל מוליךMercorCG-002
תמיסת מלח (NaCl 0,9%)BioPharmaSAL-009
Instruments
19 G סטורידים בקרקפתDescarpackSVS-19G
מלקחיים מעוקלים קליABC instrumentos cirurgicosCKF-003
מלקחיים קליABC instrumentos cirurgicosKF-004
מחטים (18, 22 ו-26 גרם)DescarpackNDL-MIX
צלחת פטריGlassLabPD-150
סכין גילוחABC instrumentos cirurgicosRB-005
אזמלABC instrumentos cirurgicosSC-006
מספרייםABC instrumentos cirurgicosSCIS-007
קו תפריםABC instrumentos cirurgicosSUT-008
מזרקים (1, 3 ו-5 מ"ל)DescarpackSYR-135
צינורית טרכאוסטומיהMedTechTC-010
פינצטהABC instrumentos cirurgicosTWZ-011
Drugs
Dextroketamine hydrochloride 5%Cristá liaDXT-00587.5 מ"ג/ק"ג איזופלורן תוך-צפקי
1 מ"ל/מ"ל 240 מ"לקריסט ואקווט; liaISO-2402.5% תמיסת אינהלציה
לידוקאין הידרוכלוריד 1%Cristá ליהLID-001400 ומיקרו; L תת עורי מקומי
מונוקרוטליןסיגמא-אולדריץ'C240160 מ"ג/ק"ג פנקורוניום ברומיד תוך-צפקי
2 מ"ג/מ"לכריסט ואקוטי; liaPAN-0022 מ"ג/ק"ג נתרן הפרין תוך ורידי
5000 IU/mLCristá liaHEP-5000מדולל 1:4 ב 1 מ"ל
קסילזין הידרוכלוריד 2%SyntecXYL-00212.5 מ"ג/ק"ג תוך-פריטונאלי
<חזק>ציוד
GraphPad פריזמה 9GraphPad תוכנה, IncGP9
רשת Multiparameter Veterinary Monitor LifeWindow 9xDigicare Animal HealthLW9x
תוכנת LabViewNational Instruments, Corp.LV-2019
MATLAB R2019a (גרסה) תוכנהThe MathWorks, Inc.MATLAB-2019
צג ומתמר אותותMedTechMST-015
בקנה מידה מדויקSartoriusPS-020
R540 עכברים& מכונת הרדמה לבעלי חיים חולדהRWD Life Schience Co., LTDR540-ANA
בקנה מידהOhausSCL-025
Servo-i מכונת הנשמה מכנית Getinge ABSERVO-IFiO2 = 21%; נפח גאות = 8 מ"ל/ק"ג, קצב נשימה = 70 פעימות לדקה, ו-PEEP = 3 סמ"ק<>2O
תוכנת SonoViewSONOTEC Ultraschallsensorik Halle GmbHSV-2020
UGEO HM70A system סמסונג Eletrô nica da Amazô nia LTDAHM70A
G*Power 3.1.9.7אוניברסיטת Dü sseldorf, גרמניהgpower

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gomez-Arroyo, J. G., et al. The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302 (4), L363-L369 (2012).
  2. Zhu, Z., et al. Echocardiographic assessment of right ventricu....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Pulmonary HypertensionRight Ventricular FunctionEchocardiographic AssessmentRight Ventricular PunctureFulton IndexPulmonary Arterial AccelerationPulmonary Ejection TimeRight Ventricular HypertrophyHemodynamic MeasurementsVentricular Dissection

Related Articles