הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

ניתוח שונה של תכולת החומרים המזינים והמטבוליזם של קמליה אוליפרה בתקופות גידול שונות

159 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69560

⸱

17 במרץ 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1College of Resources and Environmental Engineering, West Anhui University, 2Anhui Provincial Engineering Laboratory for Conservation and Sustainable Utilization of Traditional Chinese Medicine Resources, West Anhui University, 3Anhui Key Laboratory of Biomimetic Sensing and Detection Technology, West Anhui University, 4College of Forestry and Landscape Architecture, Anhui Agricultural University, 5College of Life Sciences, Anhui Agricultural University, 6Traditional Chinese Medicine Institute of Anhui Dabie Mountain, West Anhui University

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מציג פרוטוקול שיספק את הדוח הראשון על תכולת החומרים התזונתיים והמסלולים המטבוליים הקשורים לעלים של C. oleifera בשלושה שלבי גדילה והתפתחות, ולספק בסיס להבנת המנגנון המולקולרי של הזדקנות העלים.

תקציר

כדי להצביע על השינויים בתכולת החומרים התזונתיים, ביטוי הגנים הקשור למטבוליזם החנקן, והמטבוליזם של עמילן וסוכרוז ב-C. oleifera בתקופות גידול שונות, נאספו עלים מזן C. oleifera 'Dabieshan 1' בשלב הצעיר ( C. oleifera בן שנתיים), בשלב הפרי המוקדם ( C. oleifera בן 6 שנים) ובשיא הפרי ( C. oleifera בן 10 שנים) ובשלבי שיא הפרי (C. oleifera בן 10 שנים)), שנבחרו כחומרים ניסיוניים. קביעת תכולת החומרים התזונתיים וניתוח רצף הטרנסקריפטומים בוצעו על דגימות עלים בשלב הפריחה המוקדם, תוך חקר שיטתי של תכולת החומרים המזינים והמסלולים המטבוליים הקשורים של C. oleifera בתקופות גידול שונות. התוצאות הבחינו בין 9 גנים הומולוגיים הקשורים למטבוליזם חנקן ו-24 הקשורים למטבוליזם של עמילן וסוכרוז, בהתאמה, לאחר השוואת עלי C. oleifera שנאספו הן בשלב הצעיר והן בשלב שיא הפרי להשוואה במאגר KEGG. עם עליית גיל העצים, שינויים במטבוליזם החנקן ובמסלולים המטבוליים של עמילן וסוכרוז בעלים של C. oleifera. C. oleifera משפרת הן את מסלול פנילאלנין של אמוניה-ליאז והן את הביוסינתזה של סוכרוז. בסופו של דבר, אלה הובילו לעלייה ברמות החלבונים וסוכרים מסיסים בעלים של C. oleifera . מחקר זה מספק תובנות חדשות לגבי מנגנוני השינויים במטבוליזם החנקן, מטבוליזם של עמילן וסוכרוז, ותכולת החומרים המזינים במהלך המעבר של C. oleifera מצמיחה וגטטיבית לצמיחה רבייתית. הוא מציע מקורות תיאורטיים להבנת תקופת הפרי שלו וליישום דשנים עלים לצמחים לקידום הפריחה והפרי.

מבוא

בשלב הנעורים שלה, ל-C. oleifera בדרך כלל יש גבעול ראשי לא מחולק והוא עובר בעיקר צמיחה צמחית, ללא יכולת רבייה לתהליכים רבייתיים כמו התמיינות ניצני פרחים ופריחה1. בעת השתלת שתילים של C. oleifera, נהוג להשתמש בניצני אביב הנכנסים לשלב הבוגר כצאצאים, שכן יש להם יכולת לעורר פריחה 2,3,4. עם זאת, בשלב השתילה המוקדם, C. oleifera בשלב הצעיר שלה עלול להתקשות ליצור ניצני פרח ולעבור התמיינות בשל צמיחה צמחית נמרצת, שכן תנאי הסביבה עלולים להגביל את היווצרות ניצני הפרח. עם זאת, ככל ש-C. oleifera מתקדמת בשלב הצעיר שלה לתקופת הפרי הראשונית ולבסוף מגיעה לשיא הפרי שלה, היא מפתחת בהדרגה את היכולת לעבור יצירת ניצני פריחה ופריחות תקינה. ל-C. Oleifera יש מאפיין של צורה מורכבת, פירות ופרחים בו-זמניים5. בשלב הפרי הראשוני, C. oleifera עשוי להניב כמה פרחים, אך כאשר הוא מגיע לשלב שיא הפריחה, הוא מייצר כמות גדולה יותר של פרחים. בשלב שיא הפרי של C. oleifera, הצמיחה הרבייתית הופכת לדומיננטית, מלווה בדרישה מוגברת לאור, טמפרטורה, מים וחומרים מזינים. ברור שעצי פרי מעוץ, כמו C. oleifera, חוברים תקופת צמיחה צמחית ארוכה לפני הפריחה, מה שמגביל את האפשרות לקצר את מחזור הגידול ולהשיג פריון גבוה מוקדם6.

חנקן חשוב מאוד לאופן שבו צמחים גדלים ומתפתחים. סוגי צמחים שונים מכילים כמויות שונות של חנקן, ואפילו בתוך אותו מין קיימים פערים משמעותיים בתכולת החנקן בתקופות גידול שונות. כאשר הצמחים עוברים לשלב הצמיחה הרבייתי, החנקן מצטבר בהדרגה באיברים כמו פרחים, פירות וזרעים7. חנקן חיוני לאנזימים, חלבונים, הורמונים ספציפיים, חומצות גרעין וחומרים חיוניים נוספים, ובכך מתאם פעילויות מטבוליות8. תהליך ההבדלה של ניצני הפרחים מהווה נקודת מפנה מרכזית, שמובילה את הצמחים משלב הצמח לשלב הרבייה, וכוללת תהליך התפתחותי מורכב. הצטברות החומרים המזינים משמשת כבסיס יסודי להבדלת ניצני הצמח9. הקונצנזוס הנוכחי קובע כי התמיינות מוצלחת של ניצני פרחים תלויה בהצטברות פחמימות10. במהלך התמיינות ניצני הפרחים, תנודות בתכולת הסוכר המסיס משפיעות ישירות או בעקיפיןעל התהליך. מחקרים הראו מתאם קרוב בין רמות הפחמימות בעלי Prunus salicina לבין התמיינות ניצני הפרח, שכן רמות הסוכר המסיס גבוהות יותר בשלב ההתמיינות הפיזיולוגי של ניצני הפרח מאשר בתקופת ההתמיינות המורפולוגית של ניצני הפרח, שכן P. salicina עברה ירידה מהירה בפחמימות במהלך התמיינות ניצניהפרח 11. עם זאת, ישנם דיווחים המצביעים על כך שלא נצפתה תנודה משמעותית בתכולת העמילן המסיס ב-Ficus carica במהלך התמיינות ניצניהפרחים 12. צמחי עד צוברים עמילן בתוך השחלה במהלך תקופת האביב של התמיינות ניצני הפרח, בעוד שצמחים נושרים עלים מאחסנים עמילן בתקופת תרדמת הניצנים13. בהתבסס על המידע לעיל, ניתן להסיק שיש הבדלים במסלולי השינויים בתכולת הפחמימות בין מינים שונים במהלך התמיינות ניצני הפרח. Ying ואח' ניתחו את דפוסי הביטוי של גנים מרכזיים של אנזימים המעורבים בתהליכים בסיסיים במסלולים מטאורולוגיים, כגון מטבוליזם חנקן ומטבוליזם של סוכרוז ועמילן, בשני שלבים שונים של התמיינות ניצני פרחים ב-Vernicia fordii. ניתוח זה שולב עם השינויים הדינמיים במדדים הפיזיולוגיים והביוכימיים של ניצני הפרחים של עץ הטונג, וסיפק הבהרה מפורטת של הצטברות, ניצול, העברה והפצה של חומרי הזנה במהלך התמיינות ניצני הפרחיםשל עץ הטונג 8,14. מחקר של ליי צ'נגצ'ון ואח' מצא שהסרת שני עלים יכולה לווסת את הגנים המובעים: סוכרוז פוספט סינתאז (SPS), אינברטאז נייטרלי (NI), אינברטאז דופן התא (CWI) ו-α-אמילז (AMY), ובכך מעודד סינתזת סכרוז והצטברות עמילן שלאחר מכן, ומספק את המסגרת התזונתית החיונית להבשלת הפרי, נביטת הניצנים והפריחה13,15.

עם זאת, מחקרים על שינויים בתכולת החומרים התזונתיים, חילוף החומרים של חנקן ומטבוליזם של עמילן וסוכרוז ב-C. oleifera בשלבים שונים דווחו לעיתים רחוקות. רוב המחקרים התמקדו בבניית מפות פולימורפיזם של נוקלאוטידים בודדים (SNP), פיתוח סמנים של SSR ופירוק התגובות הפיזיולוגיות והמולקולריות של C. oleifera בתנאי טמפרטורה נמוכה או גבוהות 16,17,18,19,20. לכן, במחקר זה נבחר הזן הנפוץ של C. oleifera "Dabieshan 1", ונאספו דגימות עלים של נצרי אביב בתקופות גידול שונות (שלב צעיר, שלב פרי ראשוני ושלב פרי שיא) של C. oleifera לניתוח ריצוף תזונתי וטרנסקריפטום. המטרה הייתה לזהות הבדלים בתכולת החומרים המזינים, במטבוליזם של חנקן, ובמטבוליזם של ביטוי גנים של סוכרוז ועמילן לאורך שלבי הגדילה וההתפתחות השונים שנצפו בעלים של C. oleifera. הבהרת מסלולי חילוף החומרים של חנקן, סוכרוז ועמילן, והקשרים שלהם עם חומרים מזינים קשורים, יכולה להניח את היסודות לחקר מנגנון התמיינות ניצני הפרחים של C. oleifera ולהאיר את המנגנונים המולקולריים שמאחורי פריחת C. oleifera.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. חומרים ניסיוניים

C. oleifera עלי 'דבישאן 1' נאספו בשלושה שלבים מרכזיים של התפתחות: שלב הצעיר, בסביבות גיל שנתיים; הנבדק מתקדם לשלב פרי מוקדם בגיל כ-6 שנים, ולבסוף מגיע לתקופת שיא הפרי כשהוא בן כ-10 שנים. כל צמחי C. oleifera בשלושת שלבי ההתפתחות הנ"ל נשתלו באמצעות שתילים שגודלו במיכלים בעלי מפרט זהה ל-C. oleifera 'Dabieshan 1'. התכונות הפיזיקליות והכימיות של הקרקע ביערות C. oleifera הוצגו בטבלה 1.

2. סקירת אתר האוסף

חומרים ניסיוניים נאספו מעיירת הפינג, הממוקמת בלב מחוז אנחווי. מחוז שוצ'נג נמצא באזור המרכזי של המחוז, השייך לאזור הפרפריאלי של הרי דאבי. הקואורדינטות הן 31°11′צפון, 116°47′מזרח, עם גובה ממוצע של 90 מטר. הקרקע מסווגת כאדמה צהובה-חומה. לאזור יש דפוס אקלים מונסון סובטרופי לח, השומר על טמפרטורה שנתית ממוצעת של 15.6°C ובדרך כלל יורד כ-1,100 מ"מ גשם בשנה, נהנה מכ-1,969 שעות שמש בשנה, ויש לו תקופה ללא כפור שנמשכת 224 ימים.

3. איסוף דגימות וטיפול מקדים

הדגימות נבחרו בתקופת שלפני הפריחה (סוף ספטמבר). לכל שלב התפתחותי נבחרו צמחי C. oleifera בעלי צמיחה דומה, עקבית וחזקה. מכל צמח הוסר העלה השלישי מלמעלה למטה, שהיו ניצנים אביביים שגדלו במידה מתונה מכיוונים מזרחיים, מערביים, דרומיים וצפונים של החלק החיצוני של כתר C. oleifera . הדגימות סומנו באותיות סידוריות ומספרים: YAT1, YAS2 ו-YAT3 עבור עלי C. oleifera בשלב הצעיר, הנבדק מתקדם לשלב פרי מוקדם ולתקופת שיא הפרי בהתאמה. אלה נאספו ואוחסו בחנקן נוזלי. חמישה עצי דגימות אקראיים נבחרו מכל שלב כרפיל ביולוגי אחד, ושלושה שכפולים ביולוגיים הוקמו בכל השלבים. הדגימות שנבחרו הובאו באותו יום למעבדה ונשמרו בטמפרטורה של -80°C.

4. קביעת אינדקס פיזיולוגי

תכולת הסוכר המסיס נקבעה באמצעות שיטת הקולורימטריה של אנתרון21. תכולת הפחמן האורגני נקבעה על ידי חמצון דיכרומט אשלגן - שיטת טיטרציה של סולפט ברזל22. תכולת החלבון המסיס הושגה באמצעות שיטת Coomassie brilliant blue23. ריכוז החנקן הכולל נמדד בשיטת קיילדאל22.

5. בוצעה בידוד RNA מלא, ולאחר מכן בוצעה ספריית DNA משלים (cDNA) וריצוף לאחר מכן

סך ה-RNA הופק מעלי C. oleifera בשלבים שונים באמצעות ערכת חילוץ RNA של הצמח. ריכוז ה-RNA הכולל נקבע על ידי ספקטרופוטומטר אולטרה-סגול-נראה בספקטרום מלא. שלמות ובהירות ה-RNA נקבעו על ידי אנליזציה ביולוגית. לאחר בניית ואימות ספריית ה-cDNA, בוצע ריצוף טרנסקריפטומי באמצעות פלטפורמת רצף אחר רצף בתפוקה גבוהה. תהליך הריצוף יצר קריאות בודדות, כל אחת על פני 100 זוגות בסיסים 24,25,26. תוצאות יישור תהליכי הרצף עברו ניתוח סטטיסטי באמצעות תוכנת RSEM27. גנים לביטוי שונה (DEGs) בשלבי התפתחות שונים של C. oleifera זוהו באמצעות תוכנת הניתוח הדיפרנציאלי DESeq28,29.

6. הרכבת דה נובו והערות UniGene

SeqPrep http://github.com/jstjohn/SeqPrep) ו-Sickle (http://github.com/najoshi/sickle) שימשו לסינון הנתונים הגולמיים, כולל הסרת רצפים באיכות נמוכה ומתאמים מזוהמים. לאחר מכן, הקריאות הנקיות שהושגו מכל דגימה הורכבו באמצעות תוכנת טריניטי30,31. כל התמלולים שנאספו נחשפו ליישור BLASTX מול ה-Swiss-Prot, אשכולות של קבוצות אורתולוגיות לגנום מלא של אאוקריוטים, ולמסדי נתונים של KEGG בסדר רציף. ערך E חיתוך טיפוסי (ערך E <10−5) הוגדר כדי לשחזר את ההערות הפונקציות שלהם. ה-KEGG יושם לניתוח מסלולים מטבוליים קשורים32.

7. אנוטציה פונקציונלית של גנים וניתוח גנים מבוטאים באופן שונה

שפע גנים ואיזופורמים נותח סטטיסטית באמצעות תוכנת RSEM27. נקבע סף (P < 0.05, FDR < 0.01, |log2FC|>1) לזיהוי גנים מבוטאים באופן שונה (DEGs). המספר הצפוי של קטעים לכל קילו-בייט של תמלול למיליון מקטעים ממופים (FPKM) הוא השיטה הנפוצה ביותר להערכת רמות ביטוי גנים28. ערכי FPKM של כל הגנים משלושת שלבי הצמיחה וההתפתחות השונים (YAT1, YAS2 ו-YAT3) חושבו. בוצע ניתוח אשכולות היררכי כדי לבחון את רמות הביטוי הגנטיות המבדלות. בינתיים, מסלול KEGG הוכן לזיהוי DEGs מועשרים משמעותית במסלולי מטבוליה ב-P מתוקן ב-Bonferroni ≤ 0.05 לעומת כל הטרנסקריפטום באמצעות KOBAS29.

8. שיטות אנליטיות

הנתונים הוצגו באמצעות אקסל לחישוב ערכי ממוצע וסטיות תקן. ניתוח שונות (ANOVA) שימש לניתוח סטטיסטי באמצעות תוכנת SPSS, ומבחן הטווחים המרובים של דאנקן שימש להערכת הבדלים משמעותיים בתכולת החומרים המזינים בין שלושת השלבים. לאחר מכן, נקבעו הבדלים מובהקים בין קבוצות באמצעות השוואות מרובות לאחר מכן בשיטת ההבדל המינימלי (LSD). גרפים ותרשימים נוצרו באמצעות תוכנת Origin להמחשת ממצאים ניסיוניים ואנליטיים. לא סומנה מובהקות סטטיסטית ב-'ns' (P > 0.05). הבדלים מובהקים סטטיסטית סומנו על ידי '*' (P < 0.05), '**' (P < 0.01), '***' (P < 0.001) ו-'****' (P < 0.0001), בהתאמה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

השוואת תכולת תרכובות החנקן בעלים של C. oleifera בתקופות גדילה שונות

חנקן היה חיוני להקל על צמיחה והתפתחות הצמחים, והשפיע עמוקות על תהליכי הרבייה שלהם. לכן, הבנת תכולת החנקן הכוללת בצמחים חשובה מאוד למאמצי מחקר. תכולת החנקן הכוללת בעלים של C. oleifera הראתה ירידה הדרגתית ככל שהצמח מתבגר מהשלב הצעיר ועד תחילת הפרי ואז לשיא הפרי, עם מדידות של 14.76 גרם לק"ג, 13.84 גרם לק"ג ו-13.21 גרם לק"ג, בהת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

סוכרים מסיסים משמשים כמקורות אנרגיה חיוניים ורכיבים מבניים בצמחים, ומזינים פעילויות פיזיולוגיות שונות ותהליכים ביוסינתטיים10. שינויים בתכולת הסוכר המסיס משפיעים ישירות או בעקיפין על תהליך הפיכת ניצנים צמחיים לניצני פרחים בעצי פרי10. מחקרים מסוימים מצאו כי הצורך בסוכרים מסיסים בשפע היה לצורך הבחנה של ניצני פרי33. חלבונים ממססים ממלאים תפקיד מרכזי בסינתזת חומרים. נצפה כי הצטברות משמעותית של חלבונים מסיסים מתרחשת בענפים...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן למדעי הטבע של מחוז אנחווי לחוקרים צעירים (2008085QC135), פרויקט מחקר תחנת מחקר פוסט-דוקטורט של מכללת ואנשי (WXBSH2020003), תוכנית מחקר מדעי פוסט-דוקטורט של מחוז אנהוי (2024A767), תוכנית ההשאלה לעסקים בפקולטה למדעי אנחווי (2024jsqygz79), ופרויקט מחקר וחדשנות יערנות של מחוז אנחווי, מסמך מס' 4 [2024].

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
ביואנלייזר 2100Agilent Technologies, Inc. (ארה"ב)—משמש להערכת שלמות ובהירות ה-RNA
תוכנת DESeqקוד מקור3.2משמש לניתוח ביטויים דיפרנציאליים
ערכת EASYspin Plus (בידוד RNA מלא)חברת Aidlab Biotechnology בע"מ (סין)RN 28 (Aidlab)משמש להפקת RNA מלאה מעלים של C. oleifera
פלטפורמת ריצוף HiSeq 2000אילומינה (סין)—משמש לרצף טרנסקריפטום, אורך קריאה 100 bp
Kjeldahl method/Kjeltec 2300פוס טקטור (שוודיה)—לריכוז החנקן הכולל (באו 2007)
שיטה לקביעת חלבון מסיסחומצה גופרתית מרוכזת6104-58-1 (אלאדין)שיטה שפותחה על ידי צ'ן ג'יאנשון (צ'ן ואח' 2015)
שיטה לקביעת סוכר מסיסאנתרון90-44-8 (מקלין)ג'אנג ג'ילאנג' שיטת s (ז'אנג ואח' 2003)
חמצון דיכרומט אשלגן - שיטת טיטרציה של סולפט ברזלדיכרומט אשלגן סולפט ברזלNA (אלאדין) 7782-63-0 (אלאדין)לקביעת פחמן אורגני (באו 2007)
תוכנת RSEMקוד מקור1.2.3משמש לניתוח סטטיסטי של יישור רצפים
ספקטרופוטומטר Thermo Scientific NanoDrop 2000C  ABI(ארה"ב)—משמש לקביעת ריכוז ה-RNA

מקורות

  1. Cao, Z. H., Shu, Q. L., Dong, C. Y., Zhang, X. Variation in physiological and chemical characteristics at developmental stage in different disease-resistant varieties of Camellia oleifera. Pak J Bot. 46 (1), 207-212 (2014).
  2. Hu, J. J., et al. Comparison of dynamic changes in endogenous hormone level, water content, and water-soluble sugars in Camellia oleifera of different ages. Pak J Bot. 49 (1), 25-32 (2017).
  3. Hu, J. J., et al. Morphological, physiological and biochemical responses of Camellia oleifera to low-temperature stress. Pak J Bot. 48 (3), 899-905 (2016).
  4. Zhuang, R. L. Chinese Camellia oleifera. , China Forestry Press. Beijing. (2008).
  5. Li, Z. R., et al. Mechanics vibration model of fruit tree analysis and generalized coordinate system establishment for Camellia oleifera branches. For Mach Woodw Equip. 53 (2), 70-74 (2025).
  6. Wu, W., et al. Study on the chemical components of shoots and leaves of Camellia oleifera from different elevations. Pak J Bot. 47 (3), 1111-1114 (2015).
  7. Tan, B. Z., Close, D. C., Quin, P. R., Swarts, N. D. Nitrogen use efficiency, allocation, and remobilization in apple trees: uptake is optimized with pre-harvest N supply. Front Plant Sci. 12, 657070(2021).
  8. Luo, J., et al. Net fluxes of ammonium and nitrate in association with H⁺ fluxes in fine roots of Populus popularis. Planta. 237, 919-931 (2013).
  9. Zhang, Y. H., Liu, B. H., Kong, F. J., Chen, L. Y. Nutrient-mediated modulation of flowering time. Front Plant Sci. 14, 1101611(2023).
  10. Zhang, W. N., Li, J. J., Zhang, W. L., Njie, A., Pan, X. J. The changes in C/N, carbohydrate, and amino acid content in leaves during female flower bud differentiation of Juglans sigillata. Acta Physiol Plant. 44, 1-12 (2022).
  11. Lee, H. B., Jeong, S. J., Lim, N. H., An, S. K., Kim, K. S. Correlation between carbohydrate contents in the leaves and inflorescence initiation in Phalaenopsis. Sci Hortic. 265, 265109270(2020).
  12. Wan, X., et al. Auxin and carbohydrate control flower bud development in Anthurium andraeanum during early stage of sexual reproduction. BMC Plant Biol. 24 (1), 159(2024).
  13. Mesejo, C., Martínez-Fuentes, A., Reig, C., Agustí, M. The flower to fruit transition in Citrus is partially sustained by autonomous carbohydrate synthesis in the ovary. Plant Sci. 285, 224-229 (2019).
  14. Sun, Y., Liu, R., Luo, M., Li, J. A. Molecular response of Tunglfy gene to exogenous hormones in flower buds differentiation period. J Cent South Univ For Technol. 34 (4), 25-29 (2014).
  15. Lai, C. C., et al. Effect of shoot pinching on growth, sucrose and starch metabolism in 'Kyoho' grape. J Trop Subtrop Bot. 30 (5), 623-635 (2022).
  16. Cao, R. L., et al. Identification of NAC gene in Camellia oleifera and analysis of its response to drought stress. Acta Agric Univ Jiangxi. 43 (6), 1357-1370 (2021).
  17. Lin, P., Wang, K. L., Yao, X. H., Ren, H. D. Development of DNA molecular ID in Camellia oleifera germplasm based on transcriptome-wide SNPs. Sci Agric Sin. 56 (2), 217-235 (2023).
  18. Song, J. M., Li, X. Y., Zhang, S. H., Lai, H. Development and evaluation of SSR markers based on transcriptome sequencing of Camellia in Hainan Province. Mol Plant Breed. 20 (20), 6791-6801 (2022).
  19. Tang, R. Y., Sun, M. H., Wu, L. L., Li, J. A., Wang, N., Xiong, L. Alleviating effect of different exogenous substances on floral organs of Camellia oleifera under low temperature stress. Plant Physiol. 59 (1), 219-230 (2023).
  20. Guo, H. Y., Tan, X. J., Tian, F., Zhong, Q. P. The relationship between floral initiation and spring-shoot growth in Camellia oleifera. For Res. 35 (3), 123-130 (2022).
  21. Zhang, Z. L., Qu, W. J. Plant Physiology Laboratory Manual. , Higher Education Press. Beijing. (2003).
  22. Bao, S. D. Soil Chemical Analysis. , China Agricultural Press. Beijing. (2007).
  23. Chen, J. X., Wang, X. F. Plant Physiology Laboratory Manual. , South China University of Technology Press. Guangzhou. (2015).
  24. Himanshu, S., et al. Identification and cross-species transferability of 112 novel unigene-derived microsatellite markers in tea (Camellia sinensis). Am J Bot. 133, e133-e138 (2011).
  25. Knight, M. R., Knight, H. Low-temperature perception leading to gene expression and cold tolerance in higher plants. New Phytol. 195 (4), 737-751 (2012).
  26. Weiser, C. Cold resistance and injury in woody plants: knowledge of hardy plant adaptations to freezing stress may help us to reduce winter damage. Science. 169 (3952), 1269-1278 (1970).
  27. Iseli, C., Jongeneel, C. V., Bucher, P. ESTScan: A program for detecting, evaluating, and reconstructing potential coding regions in EST sequences. Intell Syst Mol Biol. 99, 138-148 (1999).
  28. Sung, S., Amasino, R. M. Vernalization in Arabidopsis thaliana is mediated by the PHD finger protein VIN3. Nature. 427 (6970), 159-164 (2004).
  29. Xie, C., et al. KOBAS 2.0: A web server for annotation and identification of enriched pathways and diseases. Nucleic Acids Res. 39 (suppl_2), W316-W322 (2011).
  30. Zhang, Y., Liu, Q. L. Research progress on the molecular mechanisms of plant flower development. Chin Bull Bot. 20 (5), 589-601 (2003).
  31. Schmitz, R. J., Hong, L., Michaeles, S., Amasino, R. M. FRIGIDA-ESSENTIAL 1 interacts genetically with FRIGIDA and FRIGIDA-LIKE 1 to promote the winter-annual habit of Arabidopsis thaliana. Development. 132, 5471-5478 (2005).
  32. Kanehisa, M., Goto, S. KEGG: Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes. Nucleic Acids Res. 27 (1), 29-34 (1999).
  33. Fan, W. G., et al. Study on the changes of endogenous hormones, carbohydrate and nitrogen nutrition at the flower bud differentiation stage of Rosa roxburghii. J Fruit Sci. 20 (1), 40-43 (2003).
  34. Chen, J. Z. Southern Version of Pomology Cultivation Theories. , 4th Edition, China Agriculture Press. Beijing. (2003).
  35. Liu, Z. L., Lin, S. Q., Chen, H. B. Dynamics of protein during flower-bud formation in Eriobotrya japonica. Subtrop Plant Sci. 37 (2), 6(2008).
  36. Poorter, L., Bongers, F. Leaf traits are good predictors of plant performance across 53 rain forest species. Ecology. 87 (7), 1733-1743 (2006).
  37. Lv, Q., Chen, Y. Y., Yu, Z. D., Ma, J. L. Functional traits and stoichiometric analysis of Camellia osmantha at the early fruiting stage. Mol Plant Breed. , 1-12 (2023).
  38. Li, J. X., Huang, H. L., Zhao, Y. C., Qiao, X. Y. Status of Camellia oleifera germplasm resources and breeding directions in Guangdong. Guangdong Agric Sci. 38 (20), 34-35 (2011).
  39. Li, W. Q., Fan, X. L., Lin, C. H. Effects of nitrogen on flowering of fruit trees. Chin J Soil Sci. (06), 1203-1207 (2007).
  40. Thiele, J., Jørgensen, R. B., Hauser, T. P. Flowering does not decrease vegetative competitiveness of Lolium perenne. Basic Appl Ecol. 10 (4), 340-348 (2009).
  41. Peña, L., et al. Constitutive expression of ArabidopsisLEAFY or APETALA1 genes in citrus reduces their generation time. Nat Biotechnol. 19 (3), 263-267 (2001).
  42. Pillitteri, L. J., Lovatt, C. J., Walling, L. L. Isolation and characterization of LEAFY and APETALA1 homologues from Citrus sinensis L. Osbeck 'Washington'. J Am Soc Hortic Sci. 129 (6), 846-856 (2004).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.