מאמר שיטה

הקמת מודל פרי-אימפלטיטיס של עכברים באמצעות מיקום שתל טיטניום בלסת עליות ואינדוקציה של פורפירומונאס חניכיים-ליגטורה

DOI:

10.3791/69682

⸱

6 במרץ 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Prosthodontics, The Affiliated Stomatological Hospital, Southwest Medical University, 2School of Stomatology, Southwest Medical University, 3Institute of Stomatology, Southwest Medical University, 4Orofacial Reconstruction and Regeneration Laboratory, Southwest Medical University, 5The First People's Hospital of Yibin, 6The Second People's Hospital of Deyang, 7Department of Periodontics & Oral Mucosal Diseases, The Affiliated Stomatology Hospital, Southwest Medical University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה קבע מודל חולדה של דלקת פרי-אימפלנטיטיס באמצעות שתלי טיטניום מקסילריים, שכלל עקירת שיניים, השתלה כירורגית של גופי טיטניום, והשראת אובדן דלקתי של עצם באמצעות הצבת רצועת Porphyromonas gingivalis סביב צוואר השתל לאחר ההחלמה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרי-אימפלנטיטיס (PI) היא סיבה מובילה לכשל שתלים דנטליים, המאופיינת בנגעים דלקתיים ברקמות רכות ואובדן עצמות מתקדם, מה שמחייב מודלים בעלי חיים אמינים למחקר מכני וטיפולי. מחקר זה קבע מודל עכברוש חדשני שמשלב בסינרגיה גירוי מכני עם זיהום חיידקי כדי לחקות טוב יותר את הפתוגנזה של PI אנושי. לאחר הוצאת הטוחנים הראשונים של הלסת העליונה ב-12 זכרים של חולדות ספרג-דולי (בן 4 שבועות) ותקופת החלמה של 8 שבועות, הונחו שתלי טיטניום. לאחר 4 שבועות של אינטגרציה אוסיאו, קבוצת ה-PI (n = 6) קיבלה קשירות ספוגות ב-Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) סביב צוואר השתל, בעוד שקבוצת הביקורת השלילית (NC) (n = 6) לא קיבלה טיפול קשירה. שבועיים לאחר ההשראה, ניתוחים באמצעות מיקרו-CT והיסטולוגיה חשפו אובדן משמעותי של עצם אלוואולרי ודלקת קשה ברקמות רכות, כולל חדירה בולטת של תאי דלקת והרס רקמות, בקבוצת ה-PI לעומת קבוצת NC. המודל המאומת הזה סיכם ביעילות תכונות מרכזיות של PI קליני. המגבלות שלו כוללות אתגר מונופתוגן מפושט ומסלול מחלה מואץ בהשוואה ל-PI אנושי. עם זאת, הוא מספק כלי חזק ורלוונטי קלינית למחקרים חקירתיים וטיפוליים.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עם ההתקדמות ברפואת שיניים פרוסטטית, שתלים דנטליים זוכים ליישום קליני מתרחבכל הזמן. עם זאת, פרי-אימסטליטיס (PI), כסיבוך השכיח ביותר, פוגע משמעותית בהישרדות ארוכת הטווח של שתלים דנטליים ומוביל להשפעות מזיקות מתמשכות על בריאות הפהשל המטופלים 2. PI הוא מצב דלקתי פתולוגי של רקמות סביב השתל, המונע בעיקר על ידי דיסביוזה של מיקרוביום הביופילם של הפלאק, ומאופיין בדלקת מתקדמת ברקמות הרכות סביב השתל ובאובדן עצם תומכת 3,4. עם שיעורי שכיחות ברמת המטופל וברמת השתלים המוערכים ב-19.53% ו-12.53% בהתאמה,ובהתחשב באופיו המורכב והיקר של ניהולו, PI מהווה נטל קליני ובריאותי ציבורי משמעותי6.

הבהרת הפתוגנזה המורכבת של PI ופיתוח טיפולים יעילים נשענים באופן יסודי על מודלים בעלי חיים חזקים המשכפלים בנאמנות את המחלה האנושית 7,8. בעוד שמודלים של בעלי חיים גדולים כמו כלבים ומיניפיגים מציעים דמיון אנטומי, השימוש בהם בחקירה מכנית עמוקה מוגבל בשל עלויות גבוהות, דאגות אתיות ודיור, ומחסור בכלים מולקולריים ייחודייםלמין 9. לעומת זאת, מודלים של מכרסמים מציגים יתרונות של חסכוניות, טיפול קל יותר ומניפולציה גנטית שופעת, המסייעים לחקירה מפורטת של מסלולים מולקולריים10. עם זאת, מודל העכבר מוגבל לעיתים קרובות בשל גודלו הקטן והאתגרים הטכניים של הליכים כירורגיים11. מגבלות אלו מחמירות בשל בעיות פרוצדורליות בשיטות מוכרות, כגון אופי המוקד ואובדן קשירה מוקדם הנפוצים במודלים של פריודונטיטיס בעכברים12. העכברוש מתגלה כפשרה פרגמטית, ומציע שדה ניתוח רחב יותר, תועלת מבוססת במחקר ריפוי עצם, וזמינות זנים טרנסגניים לחקירת גורמים גנטייםספציפיים 13, מה שהופך אותו למועמד מתאים מאוד למידול PI. למרות הפוטנציאל שלו, אימוץ מודלים של PI לעכברים מוגבל בשל מורכבויות טכניות בהליכים כירורגיים, כולל עקירת שן אמינה ומיקום שתלים עקבי.

טכניקות השראת מודל חולדות קיימות כוללות מיקום רצועת משי14,15, חיסון פתוגןמקומי 16, והזרקת ליפופוליסכריד17. מודלים קודמים של זיהום שהסתמכו על שטיפת חיידקים דרך הפה לעיתים קרובות גורמים להיווצרות ביופילם לא יציבה ותגובות דלקתיות לא עקביות18. שיטת הקשור המשי נפוצה לקידום הצטברות מהירה של פלאק. עם זאת, הקשיכה לבדה מהווה פגיעה מכנית לא פיזיולוגית ואינה כוללת אתגר פתוגני מבוקר, מה שאינו מייצג כראוי את האטיולוגיה של מחלות זיהומיות של PI19. לעומת זאת, מונוזיהום בפתוגנים כמו P. gingivalis, לעיתים קרובות מתקשה ליצור ביופילם יציב ועלול לא לגרום לדלקת חזקה באופן עקבי. אנו משערים כי הליך הקשירה גורם לשני פגיעות, התפר המשי משמש כמגרה מכני וכפיגום ליצירת ביופילם מורכב, בעוד שהפתוגן המרכזי המועבר, P. gingivalis, מעורר ומנציח תגובה דלקתית דיסביוטית21. כדי לסכם ויזואלית את הגישה המשולבת הכפולה הפתוגנית ואת התקדמותה הזמנית, מסופק סקירה סכמטית של ההליך הניסויי וציר הזמן להקמת מודל העכבר המשולב של P. gingivalis-ligation (איור 1). מאמר זה מפרט את הקמתו ואישורו של מודל הקישור המשולב של P. gingivalis, שנועד לשחזר באופן אמין את הפתולוגיה הקריטית של העצם והרקמות הרכות של PI אנושי, ובכך לשפר את הרלוונטיות הקלינית והשימושיות של המודל למחקר קדם-קליני.

איור 1
איור 1: דיאגרמה סכמטית של ציר הזמן של ההליך הניסויי להקמת מודל פרי-ایمלנטיטיס בעכברוש שנגרם על ידי שיטת קשירת תפרים טעונת חיידקים. אנא לחצו כאן לצפייה בגרסה רחבה יותר של איור זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

גודל המדגם נקבע בהתבסס על פרקטיקות נפוצות במודלים שפורסמו בעבר במודלים של דלקת פרי-אימפלטיטיס (PI) של מכרסמים ומגבלות המשאבים הזמינים22. שנים-עשר זכרים בני 4 שבועות (סופקו על ידי המרכז לבעלי חיים ניסיוניים של אוניברסיטת הרפואה דרום-מערבית, מספר רישיון: SCXK (Chuan) 2024-0046) שימשו לעקירת שיניים, הצבת שתל והשראת PI. כל העכברים נשמרו במתקן סטנדרטי ללא מחסום ייחודי (SPF), כאשר בעלי חיים מקבוצות ניסוי שונות שוכנו בנפרד. מיקומי הכלובים בתוך המדף היו אקראיים מדי שבוע. העכברים הוקצו לקבוצת הביקורת השלילית (NC) או לקבוצת PI (n = 6 לכל קבוצה) באמצעות מחולל מספרים אקראיים. סדר ההליכים הניתוחיים לכל העכברים הוא אקראי. כל ההליכים מאושרים על ידי ועדת האתיקה למחקר בעלי חיים של אוניברסיטת סאות'ווסט לרפואה (אישור מס' 20241111-012) ועומדים בהנחיות רווחת בעלי חיים. מחקר זה מתבצע בהתאם לעקרונות 3R (החלפה, הפחתה, עידון) למחקר אתי בבעלי חיים. החומרים והציוד בהם משתמשים מופיעים בטבלת החומרים.

1. הכנה לפני ההוצאה

  1. חטא את כל כלי הניתוח (#5 חוקר שיניים, מחזיק מחט, מלקחיים עיניים, מטושי כותנה רפואיים, מלקחיים לרקמה וכו') באמצעות אוטוקלב. בצע את כל ההליכים הבאים בתוך ארון בטיחות ביולוגית מסוג Class II לשמירה על תנאים אספטיים.
  2. מתן הזרקה תוך-צפונית של טריברומואתנול (250 מ"ג/ק"ג) להרדמת העכברים23 (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד). אשר את עומק ההרדמה על ידי היעדר רפלקס גמילה בתגובה לצביטה של כף רגל אחורית.
  3. מרחו חומר סיכה עיניים למניעת ייבוש בקרנית במהלך ההליכים.
  4. חטא היטב את כל משטחי העבודה באמצעות תמיסה של 75% אתנול.
  5. מקם את העכברוש בשכיבה על פלטפורמת ניתוח יציבה. למשוך את חותכות הלסת העליונה והלסת התחתונה באמצעות גומיות להשגת פתיחת הפה המקסימלית ולשמור עליהן. האירו את חלל הפה עם פנס ניתוחי.
  6. אחז בלשון בעדינות עם מלקחיים ומשך אותה לצד אחד. ודאו שהלשון מוחזקת היטב כדי לשמור על ראייה ברורה וללא הפרעה לשירי השיניים העליונות.

2. הליך עקירת שן

  1. חטא את אתר הניתוח עם פובידון-יוד. מקם חוקר שיניים #5 על פני השטח הדיסטלי של הטוחנת הראשונה של המקסילריה (המרחב הבין-פרוקסימלי בין הטוחנת הראשונה לשנייה), והפעל כוח מזיודיסטלי להשגת פריקה ראשונית (איור 2A).
  2. הזזת את החוקר למשטח המזיאלי של הטוחנת הראשונה, והפעילו מחדש כוח מזיודיסטלי כדי להניע את השן (איור 2B).
  3. הכניסו את קצה החוקר לתוך החריץ החניכיים החכם. הפעילו שילוב של תנועה סיבובית עדינה של בוקו-פלטל ולחץ חסימה מתמשך לאורך הציר הארוך של השן. המשיכו עד שהשן מתנתקת לחלוטין מהשקע (איור 2C,D).
  4. בדקו בקפידה את השן העקורה בראייה ישירה כדי לוודא שכל השורשים שלמים ואין שברים. שטוף בעדינות את השקע הריק בזרם של מי מלח רגילים ממזרק סטרילי כדי להסיר כל קרישי דם או שאריות דם (איור 2E,F).
  5. השגת המיסטזיס על ידי הפעלת לחץ סטרילי של מטלית כותנה למשך דקה. החזיר את הלשון למצב אנטומי. שמרו את החיה על כרית החימום עד להחלמה מלאה מההרדמה.
  6. ספק תזונה רכה ומי שתייה עם תוספים אנטיביוטיים (אמוקסיצילין 250 מ"ג/ק"ג) למשך שבוע.
    הערה: הפעילו כוח מבוקר ומתקדם במהלך הפריקה והימנעו מתנועות פתאומיות כדי למנוע שבר שורש או נזק לעצם האלוואולרי.

איור 2
איור 2: הליך עקירת שיניים. גלאי שיניים הוכנס לחלקים הדיסטליים והפרוקסימליים של הטוחנת הראשונה של החולדה כדי לשחרר את הרצועות החניכיות (A,B). הפעלת כוחות סיבוביים ואוקלוזליים בפלטת השן (C,D). השקע נבדק בקפידה לאיתור שאריות שורש (E). מוצג טוחנת ראשונה שלמה של המקסילריה של חולדה (F). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

3. ניתוח הנחת שתלים

  1. שמונה שבועות לאחר ההוצאה, צור חתך מזיודיסטלי בקוטר 5 מ"מ מעל הרכס הדנטולי באמצעות להב סטרילי בקוטר 12c, החודר אל פני העצם (איור 3A).
  2. השתמשו ב-#5 explorer לניתוח קהה כדי להרים את דפי המוקופריוסטיל בעובי מלא, וחשיפת אתר הניתוח (איור 3B).
  3. חבר מקדחת קרביד טונגסטן (קוטר 1.5 מ"מ) למתאם מברג ידני ובצע אוסטאוטומיה באמצעות סיבוב ידני בכיוון השעון עם השקיה לסירוגין במי מלח לשליטה תרמית, הכנת אתר השתלה בעומק 4 מ"מ בתוך שקע החילוץ המתאושש תוך שמירה על משוב מישושי רציף למניעת חור קורטיקלי (איור 3C).
  4. הכנס שתל טיטניום מותאם אישית (קוטר 1.8 מ"מ, אורך 3.2 מ"מ, משטח מעובד) באמצעות סיבוב עם כיוון השעון. אמת יציבות על ידי היעדר ניידות ביישום החקר (איור 3D-F).
  5. יש לאפשר תקופת החלמה של שבוע עם המשך דיאטה רכה וטיפול אנטיביוטי כפי שתואר קודם.
    הערה: השתמשו בטכניקת ניתוח עדינה והימנעו מכוח אקסיאלי מופרז כדי למנוע ניקוב איאטרוגני ברצפת הסינוס המקסילרי.

איור 3
איור 3: הליך הנחת השתלים. חתך מזיודיסטלי נעשה באמצעות להב מעוקל מס' 12 (A). הפלאפל הרירי הוחזר באמצעות גלאי דנטלי (B). אוסטאוטומיה בוצעה באמצעות מקדח קרביד טונגסטן בקוטר 1.5 מ"מ שמחובר למקדחה ידנית (C). השתל הותקן בעצם הלסת באמצעות נשא שתל מותאם אישית (D). לאחר ההשתלה, השתמשו בגלאי לבדיקת ניידות (E,F). שתל טיטניום מותאם אישית (חוט חלק על פני השטח, קוטר 1.8 מ"מ, אורך 3.2 מ"מ), נושא שתל מתאים (G,H), ומקדחה ידנית קטנה (I). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

4. הכנת תפרים קשורים ל-P. gingivalis

  1. תרבית P. gingivalis אנאירובית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס במרק BHI של 5 מ"ל עד להגיע ל-109 CFU/mL (OD600 =1.0).
  2. העבר את המתלה ב-1:20 לדילול ל-10 מ"ל BHI בינוני טרי.
  3. טבלו תפרי משי סטריליים 3-0 במדיום מחוזן לחלוטין. דגרו אנאירובית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 48-72 שעות כדי ליצור ביופילם בוגר.

5. השראה ל-PI

  1. ארבעה שבועות לאחר ההשתלה, קשור תפר ספוג ב-P. gingivalis סביב צוואר השתל באמצעות מחזיק מחט סטרילי. מאובטח עם קשר משולש הסמוך לרקמת החניכיים (איור 4A-D).
  2. שמור על קשורה למשך שבועיים תוך מעקב אחר התקדמות דלקתית.
  3. בצע בדיקת קשירה יומית. החליפו אם התרופפו או אבדו באמצעות טכניקה אספטית.
    הערה: בעת קשירת קשרים, הפרדו בעדינות את הרקמה הרכה כדי למנוע קריעה, וודאו שקשר התפר ממוקם מתחת לחניכיים.

איור 4
איור 4: הליך PI מושרה על ידי תפרים: חוט התפר המוכן (3-0) הוצב במצב התת-חניכיים בקצה המרוחק של השתל (A). הקשר הראשון נקשר ומאובטח עם מחזיק מחט כדי למנוע ניתוק קשר (B). לאחר מכן, קושרים קשר משולש למניעת החלקת התפר (C,D). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

6. המתת חסד ואיסוף דגימות

  1. לאחר תקופת אינדוקציה של שבועיים, יש להמתים את בעלי החיים באמצעות ניתוק צווארי תחת הרדמה איזופלורנית עמוקה (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד). נתח את הלסת העליונה השלמה עם השתלים באמצעות כלים חדים.
  2. טבלו מיד דגימות ב-4% פאראפורמלדהיד לקיבוע של 24 שעות. הסר רקמה רכה שנותרה עם השקיה של PBS ואחסן ב-70% אתנול.
    הערה: ניתן להשהות את הניסוי בשלב זה עם אחסון ארוך טווח באתנול של 70% בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.

7. ניתוח מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת (micro-CT)

  1. סריקה של דגימות באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת לפי המתודולוגיה המקובלת24.
  2. הפעל את הסורק והמחשב. השיק את תוכנת הרכישה. לחצו על סמל בטיחות הקרינה ואפשרו חימום של 15 דקות.
  3. פתח את תא הסריקה. התקן את הדגימה בצינור חרוטי בקוטר 15 מ"ל המיוצב בקצף בצפיפות נמוכה, ואז אבטח את הצינור על השלב הסיבובי ומקם אותו בתוך תא הסריקה.
  4. הפעל את מקור קרני הרנטגן (90 קילווולט, 80 מיקרואמפר). לחצו על סמל התצוגה המקדימה כדי לאשר מיקום מיטבי. הגדר את הפרמטרים: רזולוציה של 12 מיקרון , חשיפה של 20 הרץ , 4000 פריימים בסך הכל.
  5. שחזור תמונות באמצעות תוכנת Recon 1.7.4.0.
  6. נתחו את פרמטרי העצם הבאים בתוכנת Avatar 1.7.4.0 על ידי הגדרת ROI באזור הטוחן הראשון של המקסילריה: שבר נפח העצם (BV/TV), יחס פני העצם לנפח העצם (BS/BV), עובי טרבקולר (Tb.Th), ומספר טרבקולר (Tb.N).

8. עיבוד היסטולוגי

  1. דקאלציפיי דגימות קבועות ב-10% EDTA (pH 7.4) עם החלפות תמיסה כל 72 שעות במשך 4 שבועות. אמת את ההשלמה באמצעות בדיקת חדירה עם מחט.
  2. ייבוש דגימות באמצעות סדרת אתנול: 75% אתנול ל-4 שעות, 85% אתנול ל-2 שעות, 90% אתנול ל-2 שעות, 95% אתנול לשעה, ושתי החלפות של 100% אתנול למשך 30 דקות כל אחת.
  3. דגימות שקופות בקסילן עם שתי החלפות ל-10 דקות כל אחת. לחדור עם פרפין עם שלושה שינויים לשעה כל אחד.
  4. הטמעת רקמות בפרפין מותך וקירור בשלב הקפאה של מינוס 20°C. גזום את הבלוקים ואחסן בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס במשך 10 שעות לפני החיתוך.
  5. בלוקי פרפין חתך בעובי 5 מיקרון. מקטעי ציפה על אמבט מים בטמפרטורה של 45 מעלות צלזיוס ומורכבים על מגלשות זכוכית. מגלשות יבשות ב-37 מעלות צלזיוס למשך שעה.
  6. דה-פרפין של חלקים עם שני החלפות קסילן למשך 5 דקות כל אחת. הידרציה מחדש דרך סדרת אתנול מדורגת: 100% אתנול ל-5 דקות, 90% אתנול ל-5 דקות, 80% אתנול ל-5 דקות, ו-70% אתנול ל-5 דקות.
  7. שטוף חלקים במים מזוקקים למשך דקה. צבעו עם המטוקסילין במשך 8 דקות, ואז שטפו במי ברז זורמים.
  8. להבדיל בין אלכוהול חומצי 1% למשך 3 שניות. שטוף במי ברז זורמים להחלמה. צבע נגד עם אאוזין למשך 5 דקות.
  9. ייבוש מקטעים באמצעות סדרת אתנול מדורגת: 70% אתנול ל-10 שניות, 80% אתנול ל-10 שניות, 90% אתנול ל-10 שניות, ו-100% אתנול ל-10 שניות. נקי בשתי החלפות של קסילן למשך 5 דקות כל אחת.
  10. התקן כיסויי כיסוי עם בלסם ניטרלי ובדקו תחת מיקרוסקופ קל.
    הערה: קסילן מסוכן. להשתמש במכסה אדים עם ציוד מגן אישי מתאים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל שנים-עשר חולדות ספרג-דאולי בני 4 שבועות שנרשמו למחקר השלימו בהצלחה את כל ההליכים הכירורגיים והראו אינטגרציה אוסאואית-יציבה לפני הקשירה, תוך עמידה בקריטריון ההכללה המוגדר מראש של החלמה ללא סיבוכים. אף בעל חיים לא נכלל בניתוח. חולדות משובצות באקראי לקבוצת NC או PI (n = 6 לכל קבוצה) באמצעות מחולל מספרים אקראיים. חוקרים המבצעי כימות מיקרו-CT והערכות היסטופתולוגיות נשארים עיוורים לשיבוצים קבוצתיים לאורך כל תקופת הערכת התוצאה וניתוח הנתונים. כל השתלים שומרים על יציבות במהלך שלב האינטגרציה של 4 שבועות ושלב הקשירה של שבועיים,...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחקר הנוכחי מדגים את היתכנות השראת PI במודל חולדה באמצעות תפרים שספוגים ב-P. gingivalis, ומספק תיעוד מפורט של ההליכים הכירורגיים הנלווים. מודלים של מכרסמים, במיוחד בחולדות, מבוססים היטב במחקר דנטלי לחקר פריודונטיטיס ודלקת חניכיים (PI), בזכות נגישותם, עלות תחזוקה נמוכה ויעילות רבייתית גבוהה, כפי שנתמך בספרות קיימת15,25. למרות שרוב ההליכים הכירורגיים בעכברים ניתנים לביצוע בראייה ישירה ללא צורך במיקרוסקופ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מאשרים כי אין ניגודי עניינים פוטנציאליים שעשויים להשפיע על העבודה המדווחת במאמר זה.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכת על ידי מענקים מהאגודה הרפואית של סצ'ואן (מענק מס' S2024052); לשכת המדע והטכנולוגיה של לוז'ואו (מענק מס' 2024JYJ070), ובית החולים הסטומטולוגיה המשויך של אוניברסיטת הרפואה דרום-מערבית (מענק מס' 2025DS03). המחברים גם מודים בהכרת תודה על הסיוע הטכני שמספק מרכז הניסויים בבעלי חיים של אוניברסיטת הרפואה דרום-מערבית. התרשים המדעי נוצר באמצעות BioRender.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
#5 דנטל אקספלוררג'נגג'ואו קנגדטאי Medical Co., בע"מ, ג'נגג'ואו, CN6970327120856עקירת שן ועקירת שן
1% אלכוהול חומציSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd, שנגחאי, CN10000018 (אתנול) & 10000118 (Hcl)התמיינות המטוקסילין
10% EDTA (pH 7.4)Servicebio Technology Co., Ltd, ווהאן, CNG1105דה-קלציפיקציה בעצם
תמיסת 100% אתנולחברת Macklin Biochemical Technology בע"מ, שנגחאי, סיןE708068התייבשות מלאה והכנת ממס
להב 12C וסקלפל ניתוחיטיאנדה מדיקל בע"מ, חואיאן, CN6951933811154יצירת דש מוקופריוסטיל
ליגטורות משי 3-0ג'ינחואן מדיקל, שנגחאי, CNNC9201232ליגטורה
4% פאראפורמלדהידBiosharp, Hefei, CNBL539Aקיבוע רקמות
70% אתנולהכנה למעבדה-אחסון דגימות
תמיסת 75% אתנולחברת Macklin Biochemical Technology בע"מ, שנגחאי, סיןE885996חיטוי פני השטח והתייבשות ראשונית
אמוקסיצילין 50 & mu; g/mLנורת' צ'יינה פארמה בע"מ, שיג'יאג'ואנג, CNH13020635תוספת אנטיביוטיקה במי שתייה
תוכנת אווטארAvatar Integrated Systems Inc, מינכן, דלאוור-ניתוח פרמטרי עצם
BHI מדיוםCrown Lab Supplies Inc, קולומביה הבריטית, קליפורניה110052תרבות P. gingivalis
CT-Voxelחברת ברוקר, בילריקה, מסצ'וסטס, ארה"ב-ויזואליזציה של תמונות מיקרו-CT
אאוסיןמדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג Technology Co., Ltd, בייג'ינג, CN
G1100		צביעת ציטופלזמה
סדרת אתנול (80%, 90%, 95%)הכנה למעבדההתייבשות/הידרציה הדרגתית של רקמות
פריזמת GraphPadGraphPad Software, Inc., סן דייגו, קליפורניה, ארה"בגרסה 9.0.0ניתוח סטטיסטי ויצירת גרפים
פנס ראשחברת Shenzhen Supfire Lighting בע"מ, שנזן, CNHL23-Xתאורה תוך-אורלית
המטוקסיליןמדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג Technology Co., Ltd, בייג'ינג, CNH8070צביעה גרעינית
נשא שתלחברת סצ'ואן וייסידה למכשירים רפואיים, בע"מ, סצ'ואן, CNמוצר ייחודיהנחת שתלים ידנית
איזופלוראןRWD Life Science בע"מ, שנזן, CNR510-22-10 תחזוקת הרדמה שאיפתית
מתאם מברג ידניDiqin Decorative Materials Co., Ltd, האנגג'ואו, CNDQ-80013אוסטאוטומיה
מטשיות כותנה רפואיותקקאנג פארמה בע"מ, סוז'ואו, CNHN-02המוסטזיס
סורק מיקרו-CTServicebio Technology Co., Ltd, ווהאן, CNVNC-102μ סריקות CT
מחזיק מחטShanghai Medical Instruments Co., Ltd, שנגחאי, CNJ32110קשירת תפרים
בלסם נייטרלימדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג Technology Co., Ltd.
בייג'ינג, CN		G8590הרכבת חתך היסטולוגי
מלקחיים עינייםSolingmed Technology Co., Ltd, שנזן, CNSS-5002מיקום ליגטורה
פרפיןאמין נורי ג'נרל טריידינג בע"מ, דובאי, AE8012-95-1הטמעת רקמות
PBSפרוסל לייף סיינס & Technology Co., Ltd, ווהאן, CNPB180327שטיפת רקמות
Porphyromonas gingivalisמקבילה-השראה דלקתית
פובידוניאודיןחברת התרופות צ'נגדו יונגאן בע"מ, צ'נגדו, CNH51023539חיטוי
תוכנת סיורRecon Technology Ltd, איי קיימן, בריטניהגרסה 1.7.4.0שחזור תמונות מיקרו-CT
גומייהחברת ג'ג'יאנג יואיי מוצרי גומי בע"מ, טאיז'ואו, CNVYR43*1.4אחיזה וקיבוע הלסת
חולדות SDמרכז בעלי החיים הניסיוניים של אוניברסיטת דרום-מערב לרפואה, לוז'ואו, CNSCXK(צ'ואן)2024-0046הליכים כירורגיים
מספריים כירורגיים חדיםחברת הונאן קופואה לטכנולוגיה רפואית, בע"מ, צ'אנגשה, CN1.0806E+13חיתוך חוטים
מלקחיים רקמתייםכלי מדעים מדויקים, פוסטר סיטי, קליפורניה, ארה"ב11000-12משיכה וקיבוע של הלשון
שתלי טיטניום (Ø 1.8&f; 3.2 מ"מ)חברת סצ'ואן וייסידה למכשירים רפואיים, בע"מ, סצ'ואן, CNמוצר ייחודישתל טיטניום
טריברומואתנול (אברטין)הנאן סאיהו ביוטכנולוגיה בע"מ, ג'נגג'ואו, CN-הרדמה תוך-צפיקית
קסילןSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd, שנגחאי, CN10023418ניקוי רקמות והסרת שעווה

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gupta, R., Gupta, N., Weber, D. K. Dental implants. , StatPearls Publishing LLC. Treasure Island (FL). Copyright 2025 (2025).
  2. Lee, C. T., Huang, Y. W., Zhu, L., Weltman, R. Prevalences of peri-implantitis and peri-implant mucositis: Systematic review andmeta-analysis. J Dent. 62, 1-12 (2017).
  3. Berglundh, T., et al. Peri-implant diseases and conditions: Consensus report of workgroup 4 of the 2017 world workshop on the classification of periodontal and peri-implant diseases and conditions. J Clin Periodontol. 45 (Suppl 20), S286-S291 (2018).
  4. Schwarz, F., Derks, J., Monje, A., Wang, H. L. Peri-implantitis. J Clin Periodontol. 45 (Suppl 20), S246-S266 (2018).
  5. Diaz, P., Gonzalo, E., Villagra, L. J. G., Miegimolle, B., Suarez, M. J. What is the prevalence of peri-implantitis? A systematic review and meta-analysis. BMC Oral Health. 22 (1), 449(2022).
  6. Herrera, D., et al. Prevention and treatment of peri-implant the EFP S3 level clinical practice guideline. J Clin Periodontol. 50 (Suppl 26), 4-76 (2023).
  7. Fu, J. H., Wang, H. L. Breaking the wave of peri-implantitis. Periodontol. 84 (1), 145-160 (2020).
  8. Sant'anna, H. R., et al. Peri-implant repair using a modified implant macrogeometry in diabetic rats: Biomechanical and molecular analyses of bone-related markers. Materials (Basel). 15 (6), 2317(2022).
  9. Ribitsch, I., et al. Large animal models in regenerative medicine and tissue engineering: To do or not to do. Front Bioeng Biotechnol. 8, 972(2020).
  10. He, Q., et al. Development of a rat model for type 2 diabetes mellitus peri-implantitis: A preliminary study. Oral Dis. 28 (7), 1936-1946 (2022).
  11. DeAraújo Silva, D. N., et al. Experimental model of ligature-induced peri-implantitis in mice. J Vis Exp. (207), e66316(2024).
  12. Chadwick, J. W., Glogauer, M. Robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils. J Vis Exp. (155), e59667(2020).
  13. Kantarci, A., Hasturk, H., Van Dyke, T. E. Animal models for periodontal regeneration and peri-implant responses. Periodontol. 68 (1), 66-82 (2000).
  14. Varon-Shahar, E., et al. Peri-implant alveolar bone resorption in an innovative peri-implantitis murine model: Effect of implant surface and onset of infection. Clin Implant Dent Relat Res. 21 (4), 723-733 (2019).
  15. Hiyari, S., et al. Ligature-induced peri-implantitis and periodontitis in mice. J Clin Periodontol. 45 (1), 89-99 (2018).
  16. Tzach-Nahman, R., Mizraji, G., Shapira, L., Nussbaum, G., Wilensky, A. Oral infection with Porphyromonas gingivalis induces peri-implantitis in a murine model: Evaluation of bone loss and the local inflammatory response. J Clin Periodontol. 44 (7), 739-748 (2017).
  17. Pirih, F. Q., et al. Ligature-induced peri-implantitis in mice. J Periodontal Res. 50 (4), 519-524 (2015).
  18. Pirih, F. Q., et al. A murine model of lipopolysaccharide-induced peri-implant mucositis and peri-implantitis. J Oral Implantol. 41 (5), e158-e164 (2015).
  19. Reinedahl, D., Chrcanovic, B., Albrektsson, T., Tengvall, P., Wennerberg, A. Ligature-induced experimental peri-implantitis-a systematic review. J Clin Med. 7 (12), 492(2018).
  20. Gao, L., Yu, X. Q., Cai, Y. Effect of molar ligation and local Porphyromonas gingivalis inoculation on alveolar bone loss in the mouse. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 49 (1), 31-35 (2017).
  21. Wongtim, K., et al. Overexpression of PD-L1 in gingival basal keratinocytes reduces periodontal inflammation in a ligature-induced periodontitis model. J Periodontol. 93 (1), 146-155 (2022).
  22. Koutouzis, T., Eastman, C., Chukkapalli, S., Larjava, H., Kesavalu, L. A novel rat model of polymicrobial peri-implantitis: A preliminary study. J Periodontol. 88 (2), e32-e41 (2017).
  23. Veríssimo, L. F., et al. Cardiovascular effects of early maternal separation and escitalopram treatment in rats with depressive-like behaviour. Auton Neurosci. 256, 103223(2024).
  24. Kim, Y., Brodt, M. D., Tang, S. Y., Silva, M. J. MicroCT for scanning and analysis of mouse bones. Methods Mol Biol. 2230, 169-198 (2021).
  25. Kuraji, R., Hashimoto, S., Ito, H., Sunada, K., Numabe, Y. Development and use of a mouth gag for oral experiments in rats. Arch Oral Biol. 98, 68-74 (2019).
  26. Lu, S., et al. Effect of ovariectomy on tissue-level changes in rat maxilla. Int J Oral Maxillofac Implants. 34 (4), 865-872 (2019).
  27. Heitzer, M., et al. Establishing a new periodontitis-like intrabony maxillary defect in rats for investigation on bone regeneration. Sci Rep. 15 (1), 39358(2025).
  28. Moiseev, D., et al. A new way to model periodontitis in laboratory animals. Dent J (Basel). 11 (9), 219(2023).
  29. Marchesan, J., et al. An experimental murine model to study periodontitis. Nat Protoc. 13 (10), 2247-2267 (2018).
  30. Nasution, D. L. I., Tjahajawati, S., Indriyanti, R., Amaliya, Anti-inflammatory effectiveness of Peperomia pellucida (l.) kunth in rats induced with periodontitis. Biochem Biophys Rep. 40, 101856(2024).
  31. Meng, L. W., et al. Comparison of three methods for establishing rat peri-implantitis model. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 55 (1), 22-29 (2023).
  32. Zhang, H., et al. Application of immediate implant placement techniques in peri-implantitis modeling. J Craniofac Surg. 34 (8), 2544-2550 (2023).
  33. Ortiz-Sánchez, B. J., Juárez Avelar, I., Rodriguez-Sosa, M. Murine model of advanced periodontitis induced by nylon ligature in the second upper molar. J Vis Exp. (219), e67848(2025).
  34. Lafaurie, G. I., et al. Microbiome and microbial biofilm profiles of peri-implantitis: A systematic review. J Periodontol. 88 (10), 1066-1089 (2017).
  35. Zhang, Q., Liu, J., Ma, L., Bai, N., Xu, H. Lox-1 is involved in TLR2-induced RANKL regulation in peri-implantitis. Int Immunopharmacol. 77, 105956(2019).
  36. Qiao, S., et al. Oral microbial profile variation during canine ligature-induced peri-implantitis development. BMC Microbiol. 20 (1), 293(2020).
  37. De Avila, E. D., Van Oirschot, B. A., Van Den Beucken, J. Biomaterial-based possibilities for managing peri-implantitis. J Periodontal Res. 55 (2), 165-173 (2020).
  38. Iizumi, T., et al. Effect of antibiotic pre-treatment and pathogen challenge on the intestinal microbiota in mice. Gut Pathog. 8, 60(2016).
  39. Heitz-Mayfield, L. J. A., Salvi, G. E. Peri-implant mucositis. J Clin Periodontol. 45 ((Suppl 20)), S237-S245 (2018).
  40. Javed, F., Romanos, G. E. Efficacy of photobiomodulation in the management of experimentally-induced peri-implant osseous defects: An evidence-based review of studies on animal models. J Dent. 159, 105833(2025).
  41. Yu, S., et al. Adjunctive diode laser therapy and probiotic lactobacillus therapy in the treatment of periodontitis and peri-implant disease. J Vis Exp. (183), e63893(2022).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Micro CT
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים