העברת גרעין לתוך ביציות עכבר

אז אנחנו מבצעים העברה גרעינית של NU כי הקבוצה שלנו מעוניינת בתכנות מחדש. זהו תהליך מרתק בכך שניתן לתכנת מחדש את הגרעין הממויין למצב עוברי. אלה הם מקרה הריאגנטים SUM ו-HCCV וזה היאלורונידאז.

וראשית אני מכין מנה עם, וזה ילך לחממות כדי להשוות ל-CO2. אלה טיפות, הן כמה טיפות לטיורינג שמכוסות בשמן מינרלי. אז הם מכיילים את האטמוספירה של CO2.

עכשיו תוריד את HCZB. זה ישמש לכביסה. זה גבוה בימים ושוב מכוסה בשמן מינרלי זה.

ההשפעה הזו, זה יורד עם היאלורונידאז. החלק הזה כאן הוא רק טיפות HCCP. אלה מיועדים לכביסה.

זה מיועד להסרת תאי אולו מהצד O. השלב הזה מחומם כך שהוא יתחמם עד שאחזור ואקבל את סימני השמן מהעכברים ואכסה הכל בשמן מינרלי. הנה טיפות PVP לניקוי המחט ולהכנסת התאים לתוכה, וזה HCCB פלוס Cyla B.וכאן אני אעשה את המניפולציות.

אוקיי, הנה צבע מחט. מה שאני עושה עכשיו זה למשוך מחט. בסדר, עכשיו יש לי מחט נחמדה מאוד, דקה מאוד.

ועכשיו זה מיקרו זיוף. אני צריך לחתוך את המחט במיקום מסוים כדי לקבל את הגודל הנכון להחזיק פיפטה. אני מחמם את כדור הזכוכית, אני יורד עם המחט נמסה אליו, ועכשיו הוא שבור.

אני דוחף את זה. אתה רואה שהמחט השבורה מושלמת. עכשיו אני יורד לכאן, אני מגביר את החום.

עכשיו כדור הזכוכית יהפוך לאדום, הוא יימס, ידחוף את כדור הזכוכית ואותו, הוא עושה עקומה. זה מספיק. אני מסיר אותו.

אתה מבין, ואז אני מחדיר את המחט. פשוט גרמנו לפיפטה המחזיקה להכניס אותה לראש הזה. כעת הכנס אותו בחזרה למיקרוסקופ.

מיקרו פיפטה, נימי ואני טעונים בכספית. העמסתי אותו לטיפ הזה. מרקורי טוען את הנימים האלה כאן בכספית.

זה נכנס פנימה. הניחו את המחט כאן בראש הזה. הברג חזק, משוך אותו לאחור.

סיבוב עם כיוון השעון כאן ידחוף את הכספית כאן קדימה כך שתוכלו לראות אותה. ועכשיו הקצה לתוך השמן. ראה? אז עכשיו אני זז במורד המחט כדי לקבל את החזון.

הוציאו כמה טיפות כספית ושאבו קצת QVP. זה בסדר. ואז להזיז אותו שוב למעלה.

אני הולך ל-HCCB וממשיך במורד הבור. הראש שלי, אני הולך ל-P, שהוא פיפטת העכבר. אני צריך להכין נימי כדי להכניס אותו לכאן. תודה.כבר.טוב.

אז הכינו קצת נימים. בסדר. ובצינור. אני לי.

אני בא משוויץ והתחלתי את העבודה הזו לפני שנה והגעתי למעבדה של K'S והתחלתי ללמוד העברה גרעינית. זה באמת, זה מקום נהדר כאן וזה נהדר לעבוד כאן. וכמובן שמדובר בניסוי מורכב מאוד ועלולות להתעורר בעיות רבות תוך כדי עשייתו.

אז כשאתה מתחיל, אתה עלול להיתקל בבעיות כמו תאים רבים שמתפרקים בזמן שאתה מתגרען או בזמן שאתה מבצע את ההעברה. או אז אתה מגלה שלמרות שאתה מעביר בהצלחה, הם לא מתפתחים. ותמיד יכולות להיות סיבות רבות.

אני מתכוון שאתה יכול להתחיל ממערכת התרבות של כל האתרים. אז תמיד צריך כמה בקרות כמו חלקי הבקרה הגנטית או כמה קיסרים מופרים כדי לבחון את מערכת הגידול, את האינקובטורים. ואז אתה צריך גם לשפר את כישורי המיקרוסקופ.

אז זה פשוט דורש הרבה תרגול עד שאתה יכול לסדר את הקבוצה בצורה אמינה ואז להעביר בחזרה. זה רק עניין של תרגול ואנחנו ניקח כמה שבועות או חודשים עד שתהיו טובים בזה. וחוץ מזה הוא מוכן לניסויים ארוכים.

אז זה טוב לשריין לזה יום שלם. ואז משהו מסובך בהתחלה הוא גם פיפטינג העכבר. אז לא לעשות בועות, לשלוט בו היטב ולא לאבד את הפיקוח או במיוחד אתה יכול גם לפגוע בשיבוט, במיוחד בגלל שהשכבה החיצונית, ה-so של לוסיטה פתוחה, זה למעשה אפשרי כשאתה פה, אתה פוגע בשיבוט הזה וזה סוג של דולף החוצה מהסונאר הזה לוסיטה.

אז מתי גם צריך להיזהר שלא יהיה שמן בצינור הפה. לא למצוץ יותר מדי ולא לנשוף יותר מדי, אבל זה נרכש בקלות יחסית, המיומנות הזו.