Name: הערכת מאזן מוטורי ותיאום עכברים באמצעות קרן איזון (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: למדו הערכת מאזן מוטורי ותיאום עכברים באמצעות קרן איזון צרה. שיטה זו מודדת זמן חצייה ומספר החלקות כף רגל, ומאפשרת זיהוי ליקויי תיאום עדינים במודלים נוירולוגיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אמבר Southwell להגדיר את מנגנון הכשרה המחברים בשימוש בה. המימון ניתן על ידי מענק מטעם NINDS ל פול פטרסון.

1. פרוטוקול זה מבוסס על אלו של Southwell et. אל. (2009) וקרטר et. אל. (2001). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המנגנון מורכב קרן 1 קורות מטר עם משטח שטוח של 12 מ"מ או 6 מ"מ רוחב) נחים 50 ס"מ מעל פני השולחן על שני קטבים. קופסה שחורה ממוקם בקצה הקורה כנקודת הסיום. (עץ לבוד וסוגים אחרים של עץ על קורות, מוטות, ותיבת ניתן למצוא בחנויות החומרה ביותר). חומר קינון מהכלובים הבית ממוקם הקופסה השחורה למשוך את העכבר אל נקודת הסיום. מנורה (עם נורת 60 וואט אור) משמש כדי להאיר מעל נקודת ההתחלה ומשמש לגירוי מרתיעה. השעה לחצות את 80 ס"מ במרכז נמדדת על ידי שני גלאי תנועה (מפוברק על ידי Visopia): אחד בכל ס"מ 0 שמתחיל טיימר ואחד 80 ס"מ זה מפסיק את הטיימר. ערסל ניילון (אשר ניתן להשיג בחנות בדים מקומי) נמתח מתחת הקורה, ~ 7.5 ס"מ מעל השולחן, על כרית כל נופל. מצלמת וידאו מוגדר על חצובה כדי להקליט את הביצועים. המנגנון המשמש בהפגנה זו נבנה באתר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבוצה של לפחות 10 עכברים לכל מצב מומלץ לבדוק את זה. עכברים הם שוכנו כקבוצות, כאשר הדבר אפשרי, באור 12 שעות (19:00 07:00-) / מחזור כהה acclimated אל הכלובים במתקן התנהגותיים לפחות 2 שבועות לפני תחילת הבדיקה. כ 10 דקות לפני אימון / בדיקות, העכברים יכול להיות מועבר לחדר המכיל את המנגנון הקורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בימי אימון, עכבר כל חוצה את אלומת 12 מ"מ 3 פעמים ואז 6 מ"מ 3 פעמים הקורה. קורות רחב של רוחבי (כלומר 28 מ"מ) יכול לשמש עכברים שאינם מסוגלים לחצות את אלה צר או עכברים גדולים. עכברים ממוקמים בקצה אחד של הקורה ואת הזמן הנדרש לעבור לתיבת לברוח בקצה השני (80 ס"מ ממנו) נמדד על ידי גלאי תנועה. טיימר הוא אשר נכתבו על ידי האף של העכבר נכנס למרכז 80 ס"מ, ונעצרה כאשר החיה מגיעה לסוף של 80 ס"מ. שאר העכברים דקות 10 בכלובים בביתם בין האימונים על שתי הקורות. במהלך תקופה זו intertrial, עכברים עוד 3-4 ניתן לאמן לעשות שימוש יעיל של הזמן. C57BL עכברים / 6 בדרך כלל לעבור את הקורה עם כמות מינימלית של עצירה או השתהות. עם זאת, כאשר הם עושים דוכן, להריח או להסתכל מסביב ללא הליך קדימה, החוקר צריך לעודד העכבר כדי להמשיך לנוע קדימה על ידי דרבון, מחטט, או דוחף אותה מאחור עם אצבעות בכפפות. לאחר העכברים נמצאים בתיבה בטוח, הם רשאים קצת זמן (~ 15 שניות) לנוח שם לפני המשפט הבא. אחרי כל אימון, עכברים מוחזרים ישירות בכלובים בביתם ונלקחו לחדר הדיור שלהם. ראוי לציין, עכברים עשויה לעכב יותר אם הם מעל מאומן להכיר גם עם המשימה ומכשירים. מצד שני, יכול להיות אימון נמשך ימים נוספים אם העכברים עדיין לא חוצה את קרן שלמה בהצלחה לאחר 2 ימי אימונים. אם טיפולים מוחלים על עכברים, מדד הבסיס של ביצועים יש לקבל לפני הטיפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום הבדיקה, פעמים לחצות כל קרן נרשמות. שני ניסויים מוצלחים שבו העכבר לא דוכן על הקורה הם ממוצעים. הקלטות וידאו ניתן להשתמש לצורך ניתוח מדויק יותר של החלקה ושאר גירעונות מנוע הנצפה. דרך חלופית להערכת הליכה הקורה על ידי מערכת העצבים 1,2 הניקוד, אשר מדרג את חוסר היכולת לחצות את הקורה כמו ציון של "1" ואת היכולת לעבור את הקורה בדרך כלל עם שתי רגליים על פני הקורה ופחות מ בשני תלושים רגל בתור "7". להחליק מוגדר הרגל הקרובה את החלק העליון של הקורה. במערכת זו אינדוקס, ציון של "3" יתאים למעבר אלומת ידי גרירת גפיים. בעל חיים זה עשרות 1 על שני ניסויים אינו להערכה מחדש. תיאור הביצועים על הקורה הקשורים עשרות אחרים ניתן למצוא פיני et al. (1982) וקרטר et al. (2001). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קורות תיבת מנקים של גללי עכברים וניגב עם מגבות ספוגות אתנול 70% ולאחר מכן מים לפני הקורה הבא מושם על המנגנון. </li></ol> 2. נציג תוצאות: <img src="/files/ftp_upload/2376/2376fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. פעמים לחצות C57Bl6 אופיינית של זכר ונקבה על הקורות 6 מ"מ ו 12 מ"מ. במדגם של 9-11 הישן בשבוע עכברים C57BL/6-NCRL WT נבדקו על הקורות הן לאחר 2 ימי אימונים. פעמים בממוצע חוצים את קרן 12 מ"מ היו 4.6 ± 0.4 שניות לגברים (n = 14), 3.3 ± 0.3 שניות הנקבות (n = 11). טיימס על הקורה 6 מ"מ היו 6.8 ± 0.7 שניות לגברים (n = 13) ו - 5.9 ± 0.5 שניות הנקבות (n = 10) (השגיאות הן כפי שדווח SEM).

<ol><li>Feeney, D. M., Gonzalez, A., Law, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphetamine%2C+haloperidol%2C+and+experience+interact+to+affect+rate+of+recovery+after+motor+cortex+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Amphetamine, haloperidol, and experience interact to affect rate of recovery after motor cortex injury.</a> Science. 217, 855-857 (1982).</li>
<li>Carter, R. J., Morton, J., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+coordination+and+balance+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor coordination and balance in rodents.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, (2001).</li>
<li>Wallace, J. E., Krauter, E. E., Campbell, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+reflexive+behavior+in+the+aging+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Motor and reflexive behavior in the aging rat.</a> J Gerontol. 35, 364-370 (1980).</li>
<li>Brooks, S. P., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tests+to+assess+motor+phenotype+in+mice%3A+a+user%27s+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide.</a> Nat Rev Neurosci. 10, 519-529 (2009).</li>
<li>Fox, G. B., Fan, L., Levasseur, R. A., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+sensory%2Fmotor+and+cognitive+deficits+with+neuronal+apoptosis+following+controlled+cortical+impact+brain+injury+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Sustained sensory/motor and cognitive deficits with neuronal apoptosis following controlled cortical impact brain injury in the mouse.</a> J Neurotrauma. 15, 599-614 (1998).</li>
<li>Buccafusco, J. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBuccafusco%2C+JJ+%22Methods+of+behavioral+analysis+in+neuroscience%22">Methods of behavioral analysis in neuroscience</a>. , 2nd edn, CRC Press. (2009).</li>
<li>Southwell, A. L., Ko, J., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrabody+gene+therapy+ameliorates+motor%2C+cognitive%2C+and+neuropathological+symptoms+in+multiple+mouse+models+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Intrabody gene therapy ameliorates motor, cognitive, and neuropathological symptoms in multiple mouse models of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 29, 13589-13602 (2009).</li>
<li>Carter, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+progressive+motor+deficits+in+mice+transgenic+for+the+human+Huntington%27s+disease+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation.</a> J Neurosci. 19, 3248-3257 (1999).</li>
<li>Gulinello, M., Chen, F., Dobrenis, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+deficits+in+motor+coordination+and+cognitive+dysfunction+in+a+mouse+model+of+the+neurodegenerative+lysosomal+storage+disorder%2C+Sandhoff+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Early deficits in motor coordination and cognitive dysfunction in a mouse model of the neurodegenerative lysosomal storage disorder, Sandhoff disease.</a> Behav Brain Res. 193, 315-319 (2008).</li>
<li>Stanley, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+beam+walking+assay+offers+improved+sensitivity+over+the+mouse+rotarod+in+determining+motor+coordination+deficits+induced+by+benzodiazepines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">The mouse beam walking assay offers improved sensitivity over the mouse rotarod in determining motor coordination deficits induced by benzodiazepines.</a> J Psychopharmacol. 19, 221-227 (2005).</li>
</ol>

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי טיפול קלטק מוסדיים בעלי חיים ועדת שימוש (IACUC).

ביצועים על בקורה הוא מדד שימושי של תיאום איזון עדין ויש לו אומתו על ידי מחקרים קודמים. המבחן הקורה יכול לזהות ליקויים המנוע עקב גיל, העצבים המרכזית `נגעים syst, ומניפולציות גנטיות תרופתי במכרסמים צעירים מבוגרים 2,3,4. עכברים עם נגעים השפעת קליפת המוח מפגינים לעתים קרובות הנגדי החלקה על הקורה 5,6. המבחן קרן שימש גם כדי לבדל את המוטוריקה של wild-type (WT) ו הנטינגטון המחלה (HD) מודלים העכבר לאורך זמן על מנת להעריך שיפורים בעכברים HD עם טיפול 7,8. נוס...

<ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קורות: 1-m רצועות עץ חלקה עם רבועים קטנים, בינוניים וגדולים (כלומר, 6, 12 ו 28 מ&quot;מ רוחב) חתכים </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמיכה לעמוד לקיים את סעיף להתחיל הקורה העלה (~ 1.5 ס&quot;מ חתך, 50 ס&quot;מ גובה) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתיבה יעד (20 ס&quot;מ מכל צד) רכוב על דוכן תמיכה (3 ס&quot;מ חתך, 50 ס&quot;מ גובה) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ערסל-~ 7.5 ס&quot;מ מעל השולחן </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 60 וואט (W) מנורת השולחן </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצלמת וידאו, חצובה, קלטות וידאו ריק </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> , אתנול מגבות נייר, חומרי ניקוי </li></ul>

הערכת מאזן מוטורי ותיאום עכברים באמצעות קרן איזון

Assessment of Motor Balance and Coordination in Mice using the Balance Beam

פגיעה מוחית, מניפולציות גנטיות, טיפולי תרופתי יכול לגרום לשינויים של מיומנויות מוטוריות אצל עכברים. קואורדינציה מוטורית איזון פיין ניתן להעריך על ידי assay ההליכה הקורה. מטרתו של מבחן זה מיועד העכבר כדי להישאר זקוף לחצות קרן צר מוגבה על פלטפורמה בטוח. בדיקה זו מתבצעת על פני 3 ימים רצופים: 2 ימי אימונים 1 יום של בדיקות. ביצועים על הקורה הוא לכימות על ידי מדידת הזמן שלוקח העכבר כדי לעבור את הקורה ואת מספר תלושי כפה המתרחשות בתהליך. כאן אנו מדווחים על פרוטוקול המשמש במעבדה שלנו, והתוצאות נציג מקבוצה של עכברים C57BL / 6. משימה זו שימושית במיוחד לאיתור ליקויים קלים המוטוריקה ואיזון כי לא ניתן לזהות על ידי בדיקות מוטוריות אחרות, כגון Rotarod.

ליקויים בתיאום מוטוריקה עדינה ניתן להעריך במבחן קרן האיזון. ביצועים על הקורה הוא לכימות על ידי המהירות שבה הוא חוצה את אלומת האור ואת מספר הפעמים העכבר מחליק על הקורה.

פגיעות מוחיות, מניפולציות גנטיות וטיפולים פרמקולוגיים עלולים להוביל לשינויים במיומנויות מוטוריות בעכברים. קואורדינציה מוטורית עדינה ו...

המטרה הכללית של הליך זה היא להעריך קואורדינציה מוטורית ושיווי משקל בעכברים. השלב הראשון הוא הרכבת קורה לשיווי משקל עם גלאי תנועה במיקום המאפשר רישום של זמן התגובה (latency) לחציית הקורה, כדי להתחיל את האימון; המכרסם ממוקם בנקודת ההתחלה של קורת שיווי המשקל ומורשה לחצות אותה אל פלטפורמה בטוחה. לעיתים יש צורך לעודד את בעל החיים להתקדם לאורך הקורה לעבר נקודת הסיום.לאחר מרווח של 10 דקות בין ניסוי לניסוי, הם אומנו לאחר מכן על קורה צרה יותר כדי לאפשר רגישות גבוהה יותר. השלב האחרון של הפרוצדורה הוא בדיקת בעלי החיים המאומנים על קורות ברוחבים שונים. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות ליקויים בקוורדינציה מוטורית ובשיווי משקל.שלום, אני Tim Luong ונ candidate לתואר MD PhD במחלקה לביולוגיה במכון הטכנולוגי של קליפורניה. אני Holly Carlisle וחוברת כפוסט-דוקטורנטית במחלקה לביולוגיה במכון הטכנולוגי של קליפורניה, והיום נראה לכם כיצד להעריך שיווי משקל וקואורדינציה מוטורית בעכברים באמצעות מבחן קורת השיווי משקל. כעת, היתרון המרכזי של טכניקה זו בהשוואה לשיטות אחרות, כגון rotor rod, הוא שמבחן קורת השיווי משקל נוטה להיות רגיש יותר אפילו לליקויים קלים בקואורדינציה המוטורית.שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום ההתנהגותי, כגון האם הקואורדינציה המוטורית והשיווי משקל שלנו מושפעים במודלים מסוימים

assessment-motor-balance-coordination-mice-using-balance

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

פרוטוקולים מוצגים לשתי הוקמו משימות מוטוריות קואורדינציה, בר rotarod והאופקי המואץ, גם שתי בדיקות שפותחו באוקספורד לאחרונה, מוטות סטטיים ומקבילים. בדיקות אלו יכולות לזהות ליקויים מוטוריים פוטנציאל של עניין בזכות עצמם, כמו גם להיות משתנים אפשריים במבחנים בתחומים אחרים של התנהגות.

מדידת קואורדינציה מוטורית בעכברים

בסרטון זה, אנו מתארים את הליך בדיקת טביעת הרגל וניתוח קשור כדי להעריך הליכה וקואורדינציה מוטורית בעכברים.

הערכת הליכה לפי ניתוח טביעת רגל: שיטה לבדיקת קואורדינציה מוטורית בעכברים

בהפרעות ומחל פרקינסון תנועה באופן כללי, מבחני התנהגות רגישים ואמינים הם חיוניים לבדיקה הרפוי פוטנציאלי חדשה. כאן, אנו מתארים לניהול סוללה של בדיקות הסנסורית לעכברים שרגישים לדרגות שונות של פגיעה במערכת nigrostriatal ושימושית למחקרים פרה.

הערכת התפקוד הסנסורית בעכברי מודל של מחלת פרקינסון

שליטה מוטורית וביצועי איזון ידועים להידרדר עם גיל. מאמר זה מציג מספר המבחנים סטנדרטיים פולשנית התנהגותיות עם התוספת של גירוי סיבובי פשוט לאתגר את שיווי המשקל במערכת ולהראות שינויים בביצועי איזון במודל עכברי של הזדקנות.

התנהגות הערכה של מערכת שיווי המשקל עכבר ההזדקנות

בדיקה התנהגותית משמש בניסויים קליניים כדי להעריך את ההשפעות פנוטיפי של מחלה או טיפול על רווחתם של חיה. כדי להעריך באופן גלובלי תפקוד מוטורי, בחרנו בדיקות כלליות גפיים, כוח השרירים של תיאום: במגרש הפתוח מבחן, הבדיקה רשת, ואת הבדיקה rotarod, בהתאמה.

סוללה של התנהגות בדיקות להערכת גנרל גפיים, כוח השרירים, תיאום בעכברים

הפרוטוקולים מוצגים על מנת להעריך את ההשפעות האוטונומיות וההתנהגותית של תנועה פסיבית במכרסמים באמצעות תנועה אנכית של מעלית וסיבוב גלגל פריס.

הערכת השפעות אוטונומיות והתנהגותיות של תנועה פסיבית בחולדות באמצעות תנועה אנכית המעלית סיבוב הגלגל הענק

צינור ניסיוני לתיאור כמותי של דפוס הלוקומוטור של עכברים ההולכים בחופשיות באמצעות ארגז הכלים MouseWalker (MW) מסופק, החל מהקלטות וידאו ראשוניות ומעקב ועד ניתוח לאחר כימות. מודל פגיעה בחוט השדרה בעכברים משמש כדי להדגים את התועלת של מערכת MW.

שימוש בהליכון עכבר לכימות תפקוד לקוי של מנוע עכבר במודל עכבר של פגיעה בחוט השדרה

כאן אנו מציגים פרוטוקול למבחן התנהגות ורסטילי שפותח לאחרונה, מבחן קרן הסולם. לבדיקה זו יש יתרון של גילוי אטקסיה צרבלרית עדינה הנגרמת על ידי פגם בפעילות הורמון בלוטת התריס במערכת העצבים המרכזית על פני מבחני ההתנהגות הקונבנציונליים להערכת ביצועים מוטוריים.

שיטה התנהגותית רב-תכליתית לחקר ההשפעות של הורמוני בלוטת התריס על תפקוד המוח הקטן

מאמר זה מציג פרוטוקול לביצוע הרעיון של יחידת שבץ עכבר (mSU) בעכברים בעלי פעימות גדולות ומוכח באופן עצמאי. הוא גם מספק פרוטוקול סטנדרטי לביצוע סולם שבץ ניסיוני מוקד בעכברים, אשר מעריך ליקויים מוקדיים שבץ שזוהו אפילו לטווח ארוך.

פרוטוקול יחידת שבץ עכבר עם ניקוד נוירולוגי סטנדרטי למחקרי שבץ עכבר תרגומיים

אנו מתארים פרוטוקול לבחון את התפתחותם של hyperalgesia מושרה אופיואידים וסובלנות בעכברים. המבוסס על המדידה של תגובות nociceptive תרמיים ומכאניות של בעלי חיים תמימים וטופל במורפיום, היא מאפשרת לכמת את העלייה ברגישות לכאב (hyperalgesia) ולהפחית בכאבים (סובלנות) הקשורים לממשל אופיום כרוני.

הערכה של סובלנות hyperalgesia ומשככי כאבים הנגרם מורפיום בעכברים באמצעות שיטות nociceptive תרמיים ומכאניות

למדו הערכת מאזן מוטורי ותיאום עכברים באמצעות קרן איזון צרה. שיטה זו מודדת זמן חצייה ומספר החלקות כף רגל, ומאפשרת זיהוי ליקויי תיאום עדינים במודלים נוירולוגיים.

הערכת מאזן מוטורי ותיאום עכברים באמצעות קרן איזון

גלה סרטונים נוספים