הערכת אינטראקציות בין חיידקים לתאים מארחים באמצעות חרוזים ביומימטיים

קח צלחת מרובת בארות המכילה תרבית תאי אפיתל של יונקים.

בבארות הבדיקה, הוסף פתוגן חיידקי יחד עם חרוזי פולימר יחד עם חלבוני פני השטח של חיידקים.

בבארות הבקרה מוסיפים את הפתוגן והחרוזים חסרי חלבוני פני השטח של החיידקים. דגירה.

בבארות הבדיקה, החרוזים מחקים את משטח החיידקים ומתחרים בפתוגן על קשירה לחומצה פוספטית של קרום תא האפיתל, ומפחיתים את התקשרות החיידקים.

בבארות הבקרה, חרוזים אינם משפיעים על התקשרות חיידקים.

הסר את המדיה ושטוף עם מאגר כדי למנוע רכיבים לא מאוגדים.

דגירה עם חומר ניקוי לא יוני כדי לשחרר את התאים, ולשחרר חיידקים וחרוזים המחוברים לממברנה.

פיפטה את הליזאט ליצירת תרחיף הומוגני, ולדלל באופן סדרתי את ההומוגנאט באמצעות חיץ.

מעבירים את הדילולים לצלחות אגר, מדגרים כדי לאפשר היווצרות מושבות וסופרים את המושבות.

לוחית הבדיקה מציגה פחות מושבות מאשר הבקרות, מה שמעיד על אינטראקציות מופחתות בין חיידקים למארח.

הכן אמצעי זיהום על ידי דילול תרביות חיידקים ל-DMEM חסר צבע ללא תוספים.

מחומם מראש ל -37 מעלות צלזיוס המכיל 10% נפח לנפח מתלה חרוזים. כדי לתת MOI של 10, הכינו מיליליטר אחד לבאר ו-10 עד 20% נפח עודף לדגימה. מוציאים את המדיום הישן מהבארות ושוטפים את תאי ה-HeLa המתורבתים על ידי הוספת מיליליטר אחד של PBS סטרילי ל-37 מעלות צלזיוס. הסר את ה-PBS והוסף מיליליטר אחד של מדיום זיהום לכל באר.