בידוד ותרבית של תאי קופפר עכבר

תאי קופפר הם מקרופאגים מקומיים הממוקמים בסינוסואידים בכבד המסייעים בהגנה על הכבד מפני זיהומים.

כדי לבודד תאי קופפר של עכברים, קח כבד עכבר טרי שנקטף בכלי המכיל מדיום. שלב זלוף הכבד עם קולגנאז מעכל את המטריצה החוץ-תאית, וגורם לדיסוציאציה של תאי הכבד.

קרע את קפסולת הכבד כדי לשחרר את תאי הכבד המנותקים, כולל תאים פרנכימליים, PCs ותאים שאינם פרנכימליים, NPCs, כולל תאי קופפר, תאי אנדותל, תאי כוכב ושאר האריתרוציטים.

סנן כדי להסיר פסולת. בצע צנטריפוגה דיפרנציאלית במהירות נמוכה על המסנן כדי לשקוע באופן סלקטיבי את המחשבים האישיים. אסוף את הסופרנטנט המכיל NPC. צנטריפוגה לריכוז התאים.

השעו מחדש את התאים במדיום ובשכבה על שיפוע צפיפות איזוטוני לא רציף עם שתי שכבות מדיה שיפוע בצפיפות שונה. בעזרת צנטריפוגה, התאים נפרדים על סמך צפיפותם ביחס למדיום השיפוע.

אסוף את שכבת ה-NPC המועשרת בשלב הביניים של שכבת השיפוע. מעבירים לצינור המכיל בינוני וצנטריפוגה. זרעו את ה-NPCs התלויים לצלחת מרובת בארות.

תוך דקות, תאי קופפר בתרחיף נצמדים בקלות למשטח באר הפלסטיק, בעוד NPCs אחרים נשארים במדיום. החלף את המדיום במדיום טרי כדי לתמוך בצמיחת תאי קופפר.

כדי לטהר את תאי קופפר, הניחו כבד אחד בצלחת פטרי עם 15 מיליליטר של מדיום בידוד תאי קופפר. בעזרת מספריים או פינצטה, קרעו את קפסולת הגליסון ושחררו את כל תאי הכבד למדיום. מסנ