אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:56 דק׳ • July 8th, 2025
ניתן לתכנת מחדש גנטית תאים סומטיים בוגרים כדי להשיג תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים, iPSCs, המציגים מצבים לא ממוינים ושגשוג דמויי תאי גזע.
כדי להבדיל בין iPSCs אנושיים למקרופאגים - תאי דם לבנים שפגוציטוז, פתוגנים ופסולת תאית - התחילו עם לוחית תרבית עם משטח דבק שאינו תאי.
הוסף מדיה המכילה את גורמי הגדילה חלבון מורפוגנטי של העצם, גורם תאי גזע וגורם גדילה אנדותל כלי דם. זרעו את ה-iPSCs ודגרו.
המשטח הלא דביק מונע הצמדת iPSC ושומר על התאים בתרחיף, מה שמקל על הצטברות לגופים עובריים תלת מימדיים, EBs. גורמי הגדילה יוזמים התמיינות iPSC בתוך ה-EBs לתאי שושלת מזודרמלית.
העבירו את ה-EBs המובחנים לצינור צנטריפוגה. אפשר להם להתיישב באמצעות כוח הכבידה. השעו מחדש את ה-EBs במדיה טרייה המכילה אינטרלוקין-3, IL3 וגורם מגרה מושבת מקרופאגים, CSF1. צלחת את ה- EBs על צלחת תרבית תאים מצופה ג'לטין.
ג'לטין - חלבון מטריצה חוץ-תאי - מקל על היצמדות EB. IL3 מגרה את ה-EBs להתמיין לתאי גזע המטופויאטיים, מה שמוליד תאים מיאלואידים. CSF1 תומך בשגשוג תאים מיאלואידים ובהתמיינות שלהם לקודמני מקרופאגים המשתחררים ונשארים בתרחיף בתקשורת.
אוספים את תאי ההשעיה והצנטריפוגה. השעו מחדש את התאים במדיה בתוספת CSF1.
צלחת את התאים על צלחות תרבית לא מצופות.
CSF1 גורם להתמיינות סופית של מבשרי המקרופאגים למקרופאגים בוגרים מתפקדים במלואם.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים