בידוד לימפוציטים ממדבקה של עכבר

מדבקות פייר, PPs, אגרגטים של רקמות לימפה מאורגנות בדופן המעי הדק, מכילות תאים חיסוניים כולל לימפוציטים B, לימפוציטים T, תאים דנדריטיים ומקרופאגים.

כדי לבודד לימפוציטים מ-PPs של עכברים, התחל עם עכבר שעבר המתת חסד. חותכים את דופן הבטן וחושפים את חלל הצפק. אתר את הצקום. נתח את הצומת האילאוצקלי כדי להפריד את הצקום מהמעי הדק.

כרתו את המזנטריה וחתכו את המעי הדק בתריסריון כדי להסיר את המעי הדק מחלל הצפק. מניחים את המעי הדק בצלחת מרובת בארות המכילה מדיום צונן ושוטפים כדי להסיר פסולת.

מקם את המעי הדק כשהצד המזנטרי פונה כלפי מטה, והרטיב במדיום כדי לשמור על לחות הרקמות. זהה את ה-PPs - אגרגטים לבנים מרובי אונות בצד האנטי-מזנטרי של דופן המעי.

כרתו בזהירות את ה- PPs, למעט רקמת המעי שמסביב. מעבירים לצינור המכיל מדיום. דגירה תחת תסיסה מתמדת. שלב תסיסה זה מנתק את הריר, פסולת התאים וכל חומר צואתי מה-PPs, ובכך משפר את ההתאוששות של לימפוציטים PP.

לאחר מכן, העבירו את הרקמה למסננת תאים בגודל רשת מתאים. לשבש בעדינות את ה-PPs ולשחרר תאים. יש לשטוף עם מדיום דרך המסננת כדי לקבל תרחיף לימפוציטים חד-תאיים. צנטריפוגה את המתלה בטמפרטורה נמוכה כדי לשמור על יציבות התא.

השהה מחדש את הלימפוציטים במדיום, והשתמש לניתוח נוסף.

התחל בהנחת עכבר במצב שכיבה, ועיקור הבטן עם 70% אתנול. בצע חתך בטן בקו האמצע דרך העור והצפק מה