אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:58 דק׳ • July 8th, 2025
כדי לבצע הפרדה שלילית אימונומגנטית של תאי B, אסוף דם היקפי אנושי בצינור המכיל נוגדי קרישה כדי למנוע קרישת דם. הוסף כדוריות דם אדומות, RBC, מאגר ליזה כדי ליז את ה-RBCs מבלי להשפיע על תאי דם אחרים.
צנטריפוגה כדי לשקוע את תאי הדם השלמים והצפופים יותר מ-RBCs הליזה הפחות צפופים, שנשארים בסופרנטנט. השליכו את הסופרנטנט. השעו מחדש את הגלולה במדיום טרי.
העבירו את התאים לצלחת תרבות. דגירה כדי לאפשר למקרופאגים ולמונוציטים להיצמד לצלחת בזמן שהתאים שאינם נצמדים, כולל תאי B, נשארים בתרחיף.
אוספים את התאים בתרחיף לצינור טרי. צנטריפוגה כדי לגלול את התאים ולהשעות אותם מחדש במאגר.
הוסף תמיסת קוקטייל המכילה נוגדנים ביוטיניליים ספציפיים לתאי דם שאינם תאי B. הנוגדנים נקשרים לאנטיגנים על פני השטח של תאים שאינם B, ומשאירים את תאי B ללא תווית.
צנטריפוגה. השליכו את הסופרנטנט המכיל נוגדנים לא קשורים.
הוסף תמיסה של חרוזים מגנטיים מצומדים סטרפטווידין. במהלך הדגירה, הסטרפטווידין על המיקרו-חרוזים נקשר בחוזקה לנוגדנים הביוטיניים הקשורים לתאים שאינם B, ויוצר קומפלקסים.
הנח את הצינור בשדה מגנטי כדי להדביק את התאים שאינם B הקשורים בחרוזים מגנטיים לדפנות הצינור, והשאיר את תאי B בתרחיף. העבירו את הסופרנטנט שמכיל תאי B טהורים לשפופרת.
צנטריפוגה והשעיית תאי B בתווך להמשך ניתוח במורד הזרם.
מיד לאחר קבלת דגימת דם של 10 מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים