מיון תאים מבוסס ציטומטריה של זרימה עבור אוכלוסיות שונות של תאי B במחזור הדם

0 views • 3:01 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בהתבסס על קולטני פני התא שלהם, תאי B אנושיים במחזור מסווגים כתאי B נאיביים חיוביים ל-CD19, תאי B זיכרון חיוביים ל-CD19 ו-CD27, ותאי פלזמה פלזמה חיוביים ל-CD19, CD27 ו-CD38.

כדי למיין את אוכלוסיות התאים הללו, קח תרחיף תאי B מטוהר. דגירה עם נוגדנים אימונוגלובולינים G אנושיים. הנוגדנים חוסמים את קולטני ה-Fc של תאי B, ומונעים קשירת נוגדנים לא ספציפיים.

הוסף נוגדנים עם תווית פלואורסצנטית המכוונים ל-CD19, CD27 ו-CD38.

הנוגדנים נגד CD19 נקשרים לקולטני CD19 המתבטאים בכל מקום בתאי B.

הנוגדנים נגד CD27 נקשרים לקולטני CD27 המתבטאים בתאי זיכרון B ותאי פלזמה פלזמבלסט.

הנוגדנים נגד CD38 נקשרים לקולטני CD38 המתבטאים בתאי פלזמה פלזמבלסט.

הוסף צבע קושר DNA פלואורסצנטי כסמן תאים מתים.

תאים מתים מציגים אובדן שלמות הממברנה, מה שמאפשר כניסה תאית של הצבע וקישור ל-DNA הדו-גדילי; תאים חיים נשארים לא מוכתמים.

צנטריפוגה להסרת נוגדנים וצבעים לא קשורים ולהשעיית התאים במאגר FACS. מסננים את התאים דרך מסננת כדי לקבל תרחיף הומוגני ולחסל גושים.

בעזרת ציטומטר זרימה, מיין את התאים המתים מאלה החיים. בתוך התאים החיים, ביטוי CD19, CD27 ו-CD38 מבחין בין תאי B נאיביים, תאי זיכרון B ותאי פלזמה פלזמבלסט.

לאחר ביצוע חסימה לא ספציפית, הוסף 1 מיקרוגרם מכל נוגדן בחירה לכל 1 x 106 תאים לצינור עם ערבוב עדין לדגירה של 30 דקות על קרח. במהלך חמש הדקות האחרונות של הדגירה, הוסף 5 מיקרוליטרים של 7-AAD לתאים. לאחר מכן, הוסף 2 מיליליטר PBS טרי לתאים, ומערבולת לפני הצנטריפוגה.

השעו מחדש את הגלולה במאגר מיון טרי בריכוז של 1 עד 5 x 107 תאים למיליליטר, וסננו את התאים דרך מסננת תאים של 40 מיקרון לתוך צינור פוליסטירן חדש של 5 מיליליטר. לאחר מכן, מיין את התאים לפי זרימה ציטומטרית לשלושה צינורות של 15 מיליליטר המכילים 5 מיליליטר של מדיום RPMI טרי כדי לאסוף את תאי B הנאיביים, תאי זיכרון B ותאי פלזמה פלזמבלסט.

11:06

הגנום כולו בתיווך ניתוח של HDAC מעכב אפנון של מיקרו Rna ו mRNAs ב B תאים המושרה Undergo מחלקה-מתג ה-DNA רקומבינציה, התמיינות תאים פלזמה

Related Videos

0 Views

08:25

שחקני המפתח unraveling Humoral חסינות: מתקדם וממוטב לימפוציט בידוד פרוטוקול טלאים מאתר של Peyer

Related Videos

0 Views

08:25

אפיון ציטומטרי זרימה של פיתוח תאי מורין B

Related Videos

0 Views

15:29

טיהור אוכלוסייה תאים ספציפיים על ידי מיון פלואורסצנטי תא פעיל (FACS)

Related Videos

0 Views

09:53

תמוגה אוטומטי Microfluidic דם פרוטוקול העשרה של מחזורי תאים גרעיני

Related Videos

0 Views

04:57

בדיקת ציטומטריית זרימה לזיהוי תת-קבוצות של תאי חיסון בתאים חד-גרעיניים היקפיים בדם

Related Videos

0 Views

11:08

ניתוח של המתלים תא מבודד מרקמות Solid ידי זרימת cytometry ספקטרלי

Related Videos

0 Views

09:34

הגישה קומבינטורית תא בודד כדי לאפיין את מולקולרית והטרוגניות Immunophenotypic של גזע האדם ואוכלוסיות קדמון

Related Videos

0 Views

09:57

אפיון Microbiome Dynamics – Cytometry זרימה מבוסס זרימות עבודה מתרבויות טהור לקהילות טבעי

Related Videos

0 Views

14:30

אימונופנוטיפינג ומיון תאים של חברי כנסת אנושיים ממקורות ראשוניים אנושיים או מובחנים במבחנה מאבות ההמטופיאטיים

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026