בידוד של לויקוציטים בכבד שוליים מכבד עכבר

שוליים בכבד, MH, לויקוציטים, נמצאים דבוקים לדפנות כלי הדם המיוחדים בכבד או סינוסואידים, המרופדים בתאי אנדותל. לויקוציטים MH מגויסים לרקמה שמסביב בתגובה לדלקת.

כדי לקצור לויקוציטים MH, התחל עם עכבר שעבר המתת חסד במצב שכיבה. חותכים את חללי הצפק והחזה, וחושפים את קומפלקס הכבד והלב-ריאה.

עקור את המעיים כדי לחשוף את וריד הפורטל, המוביל דם מהטחול, מערכת העיכול והאיברים הקשורים אליו לכבד. הכנס מחט המחוברת למשאבה פריסטלטית לווריד הפורטל.

נתח את הווריד הנבוב התחתון - כלי דם עיקרי המוביל דם לא מחומצן מהכבד ללב - כדי לאסוף את הפרפוזה במהלך הזלוף.

לחלחל את הכבד דרך וריד הפורטל עם חיץ המכיל נוגד קרישה בקצב זרימה נמוך למשך זמן קצר. שלב זה מסייע בהוצאת דם עם תאים שאינם נדבקים מכלי הדם של הכבד דרך יציאת הווריד הנבוב התחתון. השליכו את הפרפוזה המזוהמת בדם.

כעת, חלחל בקצב זרימה גבוה יותר. הזלוף הכפוי בזרימה מוגברת ובקצב גזירה משבש את ההידבקות בין לויקוציטים MH לרירית הפנימית של כלי הדם, ובכך מנתק את לויקוציטים MH מהדופן הסינוסואידית.

אסוף והעביר את הפרפוזה המכילה לויקוציטים MH ותאי דם אחרים לתוך צינור טרי. צנטריפוגה. השעו מחדש את הגלולה המכילה לויקוציטים MH להמשך ניתוח במורד הזרם.

כדי לאסוף לויקוציטים בשולי הכבד של העכברים, מיד עם הפסקת הנשימה, השתמש במספריים סטריליים ובמלקחיים של רקמת השן כדי לבצע ח