אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 5:06 דק׳ • July 8th, 2025
כדי ליצור מהגרים תימיים שמקורם ב-iPSC, iTEs מתאי T לא בשלים במערכת תרבית איברים תימית תלת מימדית, קח דאוקסיגואנוזין, אונות תימיות עובריות של עכברים שטופלו ב-dGUO במדיה מתאימה.
dGUO נכנס לסביבה התימית והורס לימפוציטים תימיים אנדוגניים, ומונע את הפרעתם לתאי T לא בשלים שמקורם ב-iPSC במהלך תרבית משותפת.
בצע חתך עמוק במרכז כל אונה תימית. העבירו את האונות לצלחת תרבית טרייה המכילה מדיום בתוספת גורם תאי הגזע של גורמי הגדילה, ליגנד FLT3 ואינטרלוקין-7.
פיפטה את המדיה המכילה אונה תימית לתוך הבארות של צלחת תרבית תלת מימדית. הוסף תאי T לא בשלים שמקורם ב-iPSC. דגירה. תאי ה-T נודדים לאונות התימוס דרך החתך.
בתוך הסביבה התימית, גורמי הגדילה FLT3 ligand ו-IL-7 נקשרים לקולטנים שלהם על תאי T לא בשלים, מה שמוביל להפעלת גורמי שעתוק וביטוי של גנים ספציפיים.
כתוצאה מכך, תאי ה-T הלא בשלים עוברים סדרה של שינויים ורוכשים מאפיינים ספציפיים, ובסופו של דבר מבשילים לתאי CD8αβ+ T המבטאים מולקולות CD8, קולטני תאי T ומולקולות MHC Class I על פני השטח שלהם.
הסר את תאי ה- T הלא בשלים שלא הצליחו לנדוד לתוך האונות.
ה-iTEs הבוגרים נודדים מתוך האונות התימיות שניתן לדמיין כתבנית דמוית הילה המקיפה את האונות תחת מיקרוסקופ אור.
ביום השביעי של טיפול dGUO, הוציאו ארבע מנות חדשות של 10 סנטימטרים. ממלאים כל מנה במיליליטר מדיה שלמ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים