פלואורסצנטיות של נוירונים בהיפוקמפוס חולדה בתוך שבב מיקרופלואידי

קחו למשל שבב מיקרופלואידי, המכיל תאי עצב בהיפוקמפוס של חולדות.

השבב כולל מאגרים סומטיים ואקסונליים, עם תאים המחולקים על ידי מיקרו-חריצים, ממידור יעיל של הנוירונים ומבודד את האזורים הסומטיים והאקסונליים.

הסר את המדיה והוסף פורמלדהיד. דגירה כדי לתקן את הנוירונים ולשמר את המבנה שלהם.

הסר עודפי פורמלדהיד ושטוף עם חיץ. לאחר מכן, הוסיפו חומר ניקוי כדי לחדור לתאי העצב.

החלף את חומר הניקוי בתמיסת חסימה כדי לחסום אתרי כריכה לא ספציפיים.

הסר את התמיסה החוסמת ודגר עם נוגדנים ראשוניים הנקשרים לסמנים סינפטיים עצביים ספציפיים, שהם חלבוני ממברנה אינטגרליים על שלפוחיות סינפטיות.

הסר את הנוגדנים הלא קשורים ושטוף עם חיץ.

דגירה עם נוגדנים משניים מתויגים פלואורופור הנקשרים לנוגדנים העיקריים המכוונים לסמנים סינפטיים.

הסר נוגדנים משניים לא קשורים ושטוף עם חיץ.

תחת מיקרוסקופ קונפוקלי, דמיין את השבב כדי לדמיין את הסמנים הסינפטיים העצביים הפלואורסצנטיים.

כדי להתחיל צביעה חיסונית פלואורסצנטית, הסר את רוב המדיה מהשבב, תוך שמירה על לחות התאים הפנימיים. מיד, הוסף 100 מיקרוליטר של תמיסת קיבוע לבארות העליונות של התאים האקסונליים והסומטיים.

לאחר דקה אחת, הוסיפו 100 מיקרוליטר של תמיסת קיבוע לבארות התחתונות, וקבעו את התאים למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר. הסר את רוב התמיסה מהבארות, והוסף מיד 150 מיקרוליטר PBS לכל אחת מ