הדמיה של מיטוכונדריה עצבית באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק-פנים סדרתי

קחו קטע רקמת מוח של עכבר קצוץ וממוטבע בשרף המכיל את ההיפוקמפוס.

החלק מוכתם במתכות כבדות כדי לשפר את הניגודיות במיקרוסקופ אלקטרונים.

הרכיבו את החלק על סיכת אלומיניום באמצעות דבק ציאנואקרילט.

צפו את דפנות הבלוק במשחת כסף קולואידית כדי ליצור נתיב מוליך לפין האלומיניום.

בדקו את בלוק הרקמה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק בלוק סדרתי (SBFSEM).

בתוך ה-SBFSEM, האולטרה-מיקרוטום פורס את הבלוק ברצף לשכבות דקות במיוחד בעוד קרן אלקטרונים במתח נמוך סורקת את המשטח החשוף.

גלאי אלקטרונים מפוזר לאחור לוכד תמונות דו-ממדיות ברזולוציה גבוהה, וחושף את המיטוכונדריה ואת המבנים התאיים שמסביב.

באמצעות תוכנה מתאימה, התאם את הבהירות והניגודיות כדי לשפר את בהירות התמונה.

יישר את התמונות הרציפות כדי לשחזר נפח תלת-ממדי של רקמת המוח. שחזור תלת מימד זה מאפשר מיפוי מדויק של המורפולוגיה המיטוכונדריאלית, ההתפלגות המרחבית והקשרים ביניהם בתוך תאים עצביים.

חתוך את הדגימות לאזור העניין והרכיב אותן על סיכת אלומיניום באמצעות דבק-על ציאנואקרילט ג'ל. לאחר מכן מצפים את הדגימה במשחת כסף קולואידית סביב צידי הבלוק כדי לספק נתיב מוליך לסיכת האלומיניום. בדוק את דגימות הרקמה באמצעות מערכת מיקרוסקופ אלקטרונים סורק המצוידת בשלב אולטרה-מיקרוטום בתוך החדר וגלאי אלקטרונים מפוזר לאחור בקילו-וולט נמוך.

צלמו את הדוגמאות עם הגדרות אלה. התחל את ה