הזיקה של רטיבות פעילים Rho-GEFs שימוש GST-מתויג מוטנטי חלבון Rho (GST-RhoA (G17A)) מ lysates תא אפיתל

18.7K צפיות

צוטט 14 פעמים

11:28 דק׳

31 במרץ 2012

10.3791/3932-v

31 במרץ 2012

18.7K צפיות
 ,  ,  ,  , 

השיטה המוצגת כאן מתארת ​​assay לעקוב אחר ההפעלה של RhoA ספציפיים GDP / GTP גורמים חליפין (GEFs) בתאים בתרבית על ידי שימוש בחלבון RhoA GST היתוך מוטציה שיש לו זיקה גבוהה עבור GEFs מופעל. GEFs הם זירז מ lysates סלולריים, שזוהו על ידי סופג המערבי לכמת ידי צפיפות.

גלה סרטונים נוספים

הפעלת GEF

Chapters in this video

0:05

כותרת

1:46

טרנספורמציה של E. coli עם ה constructs pGEX-RhoA(G17A)

2:55

הכנת חרוזי GST-RhoA(G17A)

7:50

בדיקת Pulldown של GEF באמצעות חרוזי RhoA(G17A) נטולי נוקלאוטידים

10:11

תוצאות Pulldown מייצגות

11:03

סיכום

Related Videos