Name: השתלת איי הלבלב לקופסית הכליה בעכברים סוכרתיים של (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-31T23:37:26.000+00:00
Duration: 10 min 43 s
Description: למד שיטת השתלת איי לבלב לקופסית הכליה בעכברים סוכרתיים. טכניקה זו ממזערת מתח על התאים והמושתלים ומשפרת תוצאות השתלה במחקר סוכרת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מרכז קליפורניה בסן פרנסיסקו סוכרת. NIH קליפורניה בסן פרנסיסקו DERC Core איילט. JDRF. LIfeScan חברת ג&#39;ונסון אנד ג&#39;ונסון החברה.

הכנת איי להשתלה (Tx) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ הפוכה, בחר ידנית איים באמצעות pipetman P200 ו טיפ pipet ישר מן איים בתרבית בצלחת 100mm. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרוזן איים 100 בכל פעם, להעביר לתוך הצינור כל microcentrifuge (~ 500 איים / צינור / עכבר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר ליישב איים אל החלק התחתון של הצינורות microcentrifuge. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצייר את אחד איון גלולה לתוך pipetman P200 (נקבע על 130ul) באמצעות קצה ישר קיר דק pipet. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח צינורית סיליקון מתאם על קצה המזרק. הכנס אורך צינורות PE50 לתוך מתאם סיליקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תלו את pipetman לצד מכסה המנוע הקלטת צינורות PE50 אל הקיר מכסה המנוע גבוה יותר איים בקצה. זה יאפשר איים להתיישב רק קצה פיפטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את האיונים לתוך צינורות PE50 על ידי לאט חיוג pipetman והזזת איים לתוך צינורות PE50, נזהר לא לגרש את האיונים מסוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך שריטה סוף משופעים של צינורות PE50. תוך שמירה על שריטה, נתק את צינור מתאם סיליקון מ pipetman ולאבטח את שריטה עם מתאם סיליקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את האיונים, ב PE50, צינורות סיליקון צינורות מכופף בצד מתאם למטה, לתוך 15 מ&quot;ל קונית עם pipet 5 מ&quot;ל לחתוך הקלטת צינורות PE50 על הצד של pipet 5 מ&quot;ל כדי למנוע מסתלסל של צינורות PE50 תוך centrifuging. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה conicals PE50/15mL עד 1000 סל&quot;ד ו לכבות צנטריפוגות. (לא להכין יותר מ -10 תכשירים איון בבת אחת). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח צינורית על הקרח. </li></ol> הכנת עכבר להשתלה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכברים עם isofluorane או עם קטמין / Xylexene (ראה פרוטוקול הכנה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הרדמה נקטה להשפיע, לגלח את האגף השמאלי של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספוגית העור של העכבר, מרכז החוצה, עם ספוגית יוד Povidone ולאחר מכן לנגב עם מטלית ETOH. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את הכליה השמאלית (בדיוק של הטחול). לעשות חתך קטן בעור, לחשוף את הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע חתך קטן הצפק חשיפת בכליות. שמירה על החתך קטן יסייע בשמירה על הכליות גדל חשוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל לחץ קל על שני הצדדים של החתך, להעלות או פופ הכליה מתוך העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמרו על לחות כליה על ידי יישום מלוחים נורמליים עם כותנה היטה ספוגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מזרק 23 או 25 מחט מד, לעשות שריטה קטנה באגף הימני של הכליה, יצירת nick ב הקפסולה כליות, לא עמוק מדי או גדול מדי. </li></ol> השתלה של איי הערה: בעוד העכבר שמכינים Tx, האדם השני צריך להכין את הבורג כונן השתלת המילטון מזרק איון. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט להסיר את צינורות מתאם סיליקון מ צינורות PE50 תוך שמירה על שריטה בצינור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הקצה השני של צינור PE50 לתוך צינורות סיליקון מתאם במקום מתאם סיליקון צינורות על קצה פיפטה מחוברת &quot;בורג כונן&quot; מזרק זכוכית המילטון. לאט לאט לשחרר את שריטה צינורות PE50, וודא כי האיים אינם לדלוף החוצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדם את האיונים לאט אל קצה צינור PE50 באמצעות מנגנון &quot;בורג&quot;, אבל לשמור על בועת אוויר קטן בחלק הקדמי של איים בצינור PE50. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Into ניק עשה בכליות, בזהירות להחליק את צינורות PE50 תחת הקפסולה, מה שהופך כיס קטן. היזהרו מאוד לא לנקר את הכליה או ניקוב באמצעות הקפסולה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זה עוזר לשמור את האזור לח הקפסולה עם כותנה מלוחים Gentamycin נורמלי ספוג ספוגית שקצהו: כמוסת יבש יקרע בקלות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להעביר את צינורות לכל הכיוונים, תוך יצירת &quot;כיס&quot; עבור איים המושתלים לנוח. זכור להחיל מחדש מלוחים נורמלי נוסף כדי לשמור על האזור לח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בניהולו של מי פתחה את העכבר מי הניח את צינורות PE50 תחת הקפסולה כליות, האדם השני, שהכין את העכבר מזרק המילטון השתלה, יהיה לאט להתקדם איים תחת הקפסולה, בתוך &quot;כיס&quot;, מאחורי בועת אוויר קטנה מועברים על ידי צינורות PE50, עד כל האיונים הם מושתלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט להסיר את צינורות PE50, לייבש את האזור עם ספוגית יבשה בזהירות לצרוב ברגע האחרון עם חום נמוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת צמר גפן יבש היטה ספוגית, ודא דימום כל הפסיקה. לאחר הדימום הפסיק, מחדש ללחלח את הכליה עם מי מלח סטריליים, בעדינות להחליף את הכליה לתוך הצפק לפני הסגירה את העכבר עם תפר ו סיכות העור. </li></ol> סגירת / התחייה של עכבר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הצפק עם תפר שפועל באמצעות 5-0 תפרים משי w / מחט C-6 19mm. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מלקחיים לצייר הן בצד של החתך בעור יחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העור סיכות יחד עם 2 או 3 סיכות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקו את העור של העכבר דם כל, באמצעות ספוגית כותנה היטה ו סליןה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לטפל בעכבר עם הזרקה תת עורית של Flunixin ואת עצירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר בכלוב, הממוקם על כרית חימום או מתחת מנורת חימום, עד העכבר אינו פעיל באופן מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את סיכות העור 2 שבועות. </li></ol>

<ol><li>Tang, Q., Henriksen, K. J., Bi, M., Finger, E. B., Szot, G., Ye, J., Masteller, E. L., McDevitt, H., Bonyhadi, M., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro-expanded+antigen-specific+regulatory+T+cells+suppress+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">In vitro-expanded antigen-specific regulatory T cells suppress autoimmune diabetes.</a> J Exp Med. 199, 1455-1465 (2004).</li>
<li>Rulifson, I. C., Szot, G. L., Palmer, E., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inability+to+induce+tolerance+through+direct+antigen+presentation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Inability to induce tolerance through direct antigen presentation.</a> Am J Transplant. 2, 510-519 (2002).</li>
<li>Lenschow, D. J., Zeng, Y., Hathcock, K. S., Zuckerman, L. A., Freeman, G., Thistlethwaite, J. R., Gray, G. S., Hodes, R. J., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+transplant+rejection+following+treatment+with+anti-B7-2+and+anti-B7-1+antibodies.+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Inhibition of transplant rejection following treatment with anti-B7-2 and anti-B7-1 antibodies. Transplantation.</a> Transplantation. 60, 1171-1178 (1995).</li>
<li>Lenschow, D. J., Zeng, Y., Thistlethwaite, J. R., Montag, A., Brady, W., Gibson, M. G., Linsley, P. S., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+of+xenogeneic+pancreatic+islet+grafts+induced+by+CTLA4lg%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Long-term survival of xenogeneic pancreatic islet grafts induced by CTLA4lg.</a> Science. 257, 789-792 (1992).</li>
</ol>

פרוטוקול זה מספק אפשרות מעשית ויעילה עבור נקייה בקלות ומספק איים או תאים תחת הקפסולה של הכליה בעכברים סוכרתיים או רגיל. הטכניקה של ריכוז pelleting איים או תאים לתוך צינורות האספקה ​​הסופי (PE50) המשמש השתלת התאים תחת הקפסולה כליות מציעה שיטה קלה ויעילה של השתלת תאים תוך צמצום כל לחץ חזק על התאים או העכבר.

<table><tbody><tr><td>כפפות כירורגיות</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-394-95(sz)</td><td></td></tr><tr><td>ספוגי קרצוף כירורגיים</td><td>Moore Medical</td><td>42940AK</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה</td><td>Miltex Inc.</td><td>6-114 ו-6-26</td><td>2 עם שיניים, 2 חלקים</td></tr><tr><td>מספרי ניתוח n=2</td><td>Miltex Inc.</td><td>5-290</td><td></td></tr><tr><td>מכונת גילוח Oster (להב גודל 40)</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-305-10B</td><td></td></tr><tr><td>פדי גזה סטריליים 4x4</td><td>Moore Medical</td><td>08252AK</td><td></td></tr><tr><td>פדי פובידון יוד</td><td>Moore Medical</td><td>08486AK</td><td></td></tr><tr><td>פדים עם אלכוהול</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-819-2</td><td></td></tr><tr><td>משטח חימום</td><td>Moore Medical</td><td>42508AK</td><td></td></tr><tr><td>מחטים בכי মাপ 23G או 25G</td><td></td><td></td><td>1&quot; ארוך</td></tr><tr><td>תמיסת Cidex</td><td>Moore Medical</td><td>07535AK</td><td>לניקוי/חיטוי מכשירים</td></tr><tr><td>צינורית פוליאתילן PE50</td><td>BD Biosciences</td><td>427411</td><td>PE50, קוטר חיצוני 0.965 מ"מ x קוטר פנימי 0.58 מ"מ.</td></tr><tr><td>תמיסת Cidex + 28 ימים</td><td>Moore Medical</td><td>35625AK</td><td></td></tr><tr><td>צינור סיליקון</td><td>ספקטרום כרומט.</td><td>123732</td><td>5/32&amp;#8221;OD x 1/32&amp;#8221; מזהה</td></tr><tr><td>מכל עיקור למכשירים</td><td>Moore Medical</td><td>39074AK</td><td></td></tr><tr><td>טיפים ישרים לפיפט</td><td>USA Scientific, Inc.</td><td>1111-0810</td><td>סטרילי</td></tr><tr><td>מזרק זכוכית עם הנעה בבורג</td><td>Hamilton Co</td><td>1001</td><td></td></tr><tr><td>כלי לצריבה</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS230</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>Moore Medical</td><td>41-067</td><td></td></tr><tr><td>משי 5-0</td><td>LOOK Surgical</td><td>754B</td><td>לתפר (6-C) </td></tr><tr><td>מקלון עם קצה כותנה</td><td>Moore Medical</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סניקר (stapler) של autoclip בגודל 9 מ"מ</td><td>BD Biosciences</td><td>7630</td><td></td></tr><tr><td>סיכות 9 מ"מ</td><td>BD Biosciences</td><td>7631</td><td></td></tr><tr><td>מסיר סיכות 9 מ"מ</td><td>BD Biosciences</td><td>7637</td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת איי הלבלב לקופסית הכליה בעכברים סוכרתיים של

Transplantation of Pancreatic Islets Into the Kidney Capsule of Diabetic Mice

פרוטוקול שלנו פותחה כדי נקייה בקלות לספק איים או תאים תחת הקפסולה של הכליה בעכברים סוכרתיים או רגיל. מצאנו כי זה היה קל יותר לרכז את איים או תאים לתוך כדורי בצינור האספקה ​​הסופי (PE50) המשמש השתלת התאים תחת הקפסולה כליות. טכניקה זו מספקת הן מהירות וקלות תוך צמצום כל לחץ חזק על התאים או העכבר. טוען: התיישבו, הרים יד, איים או תאים pelleted הם aspirated בזהירות את החלק התחתון של צינור microcentrifuge 1.5 מ&quot;ל באמצעות pipetteman p200 ו ישר, קיר דק קצה פיפטה. אורכו של צינור PE50 מחוברת בקצה פיפטה בעזרת צינור קטן מתאם סיליקון. תאים מותר להתיישב, בקצה, ולאחר מכן מועברים על ידי צינורות PE50 לאט חיוג pipetteman. לאחר התאים לקראת סוף צינורות PE50, שריטה נעשית ואת צינורות מתאם סיליקון מושם על שריטה. צינורות PE50 מועבר 15 מ&quot;ל חרוטי המכיל pipet 5 מ&quot;ל לחתוך, ואת צינורות PE50 הוא מודבק על הצד של pipet 5 מ&quot;ל כדי למנוע מסתלסל במהלך centrifuging. תאים מותר להגיע 1,000 סל&quot;ד ועצר. השתלה: עכברים מקבל מורדמים, מגולח, וניקה. חתך קטן עשה על האגף השמאלי של העכבר את הכליה חשוף. , כליה שומן, רקמת נשמרים עם ספוגית לחה מלח רגיל. סוף דיסטלי של PE50 מצורף מזרק כונן בורג המילטון, המכיל קצה פיפטה, באמצעות צינורות מתאם סיליקון. ניק קטן עשוי בצד האגף הימני של הכליה, לא גדול מדי ולא עמוק מדי. הסוף של צינורות משופעים PE50, הקרוב התאים, ממוקמת היטב תחת הקפסולה, צינורות הוא נע סביב בעדינות כדי לפנות מקום בעוד בשטיפת מלוחים נורמלי; כמוסת יבש יכול לקרוע בקלות. בועות אוויר קטנות מועבר תחת הקפסולה על ידי חיוג לאט את הכונן בורג מזרק. איי הם אז נמסר לאט מאחורי בועת אוויר. הומאוסטזיס כליה לאחר איים הועברו נשמרת קישוטים הוא צרוב עם חום נמוך. הכליה ממוקמת בחזרה לחלל הצפק ואת העור הם sutured בסיכות. עכברים מטופלים מיד עם Flunixin ואת עצירות מ&quot;ר והניח בתוך כלוב על כרית חימום.

פרוטוקול שלנו פותחה כדי נקייה בקלות לספק איים או תאים תחת הקפסולה הכליה של עכברים. תאים מרוכזים לתוך כדורי בצינור הסופי משמש השתלת התאים תחת הקפסולה כליות. הקלות של טכניקה זו מפחיתה את הלחץ על התאים ואת העכבר.

הפרוטוקול שלנו פותח כדי להחדיר איים או תאים בצורה נקייה ופשוטה תחת הקפסולה של הכליה בעכברים סוכרתיים או תקינים. מצאנו כי היה קל יותר...

שלום, שמי גרג זוד. אני נמצא במרכז לסוכרת של UCSF במעבדת בלוסטון, והיום אראה לכם כיצד להשתיל איליים ת"]; mirroring תחת קפסולת הכליה של עכברים עם סוכרת. הליך זה כולל לקיחת איליים שזוהרו מזן עכברים סינגני או אלוגני, ניקוי של אותם איליים, והשתלתם תחת קפסולת הכליה של עכברים עם סוכרת.עכברים שעשויים להיות סוכרתיים באופן טבעי כמו NOD, או עכברים שהפכו לסוכרתיים באופן מלאכותי באמצעות הזרקת streptozotocin. כעת אנו מוכנים לבחור את האיליים. אני אבחר את האיליים ואספור אותם תוך כדי שאיסוף שלהם באמצעות פפטה.אשאיר מאחור כל רקמה, וניתן לראות פשוט לפי האופן שבו האור נשבר ברקמה, מהו eyelet ומה אינו eyelet. לאחר מכן אספור את ה-eyelets. אשים אותם בתוך מיקרוצנטרי-טיוב (microcentrifuge tube) ואסוף אותם להשתלה.ללולאות יש מראה צפוף יותר, כמעט אדמדמה, ואילו ה-ace ב-R בהיר ופרוותי יותר. כמו כן, יש לו מראה מPayout לבננני. לכן, תשיגו מעט רקמת a ב-r בזמן שתדגמו את הלולאות, אך כל עוד תדגמו את רוב הלולאות, זה יהיה תקין.ניתן לראות שיש כאן חתיכה גדולה של רקמת R. וכאן יש eyelet יפה עם eyelet נוסף מעליו. עם זאת, יש מעט רצועות של R ביניהם, כך שניתן להזיז את הדברים וללכוד את ה-eyelets הבודדים.ושים לב, אני משתמש בקצה פיפטה שאינו קוני. קצה זה בעל דפנות דקות מאוד והוא ישר. דבר זה מאפשר כניסה ויציאה קלה יותר של העיניות מהקצה.היזהרו שלא לנסות לתפוס קשרי לימפה. אלו הם קשרי לימפה ספציפיים של הלבלב שעוברים עיכול וטיהור. אני מנסה לתפוס רק את האיים הלבלביים במידת האפשר ולהשאיר את קשרי הלימפה מאחור.לאחר שבחרתי ידנית את הלולאות, יש לי 500 לולאות חופשיות בתחתית מבחנת המיקרו-צנטריפוגה הזו. כעת אני עומד להעביר את הלולאות הללו לשפופרת P15 שלנו לצורך השתלה. אני עושה זאת על ידי שימוש בקצה פיפטה, בעזרתו אני שואב לאט את הלולאות מתחתית המבחנה.לאחר שהעיניות נמצאות בתוך קצה הפפיתה, אני לוקח את צינור הסיליקון המחובר לצינור B 50, ואני אתן להם כעת לשקוע בתוך קצה הפפיתה על ידי הצמדתם עם סרט דביק לדופן המכסוף. ברגע שהכדוריות שקעו בתוך קצה הפפיתה, נסיר את הפפיתה ונדחף את הכדורית באיטיות אל תוך הצינור באמצעות גלגלת הכיוון של הפפיתה, ולא באמצעות הבוכנה. ובזמן שאני מסובב את גלגלת הפפיתה, אני מזיז את הצינור.הם מאפשרים לכדורים להיכנס לצינור ה-P 50. כאשר הכדורים הגיעו למרחק של כאינץ' מקצה הצינור, קיפלתי את הצינור כדי להשאיר את הכדורים בתוכו. הסרתי את צינור הסיליקון והעברתי לקיפול.לאחר מכן, מעבירים זאת למבחנה לצנטריפוגה באמצעות פיפט של 5 מיליליטר שנקצץ. לאחר מכן, אני מקפל את הצינור ומדביק אותו לפיפט של ה-5 מיליליטר. כעת המערכת מוכנה לסנטריפוגציה.העכבר נגזז והורדם, ואנו נבדוק כדי לוודא שאין תגובה ללחיצה על בהו הבוהן. אני אנקה את העכבר באמצעות תחתי Iodine-propone. הניתוח מבוצע באופן אספטי, וכל קצותי המכשירים שלי סטריליים.מימין לטחול בצד שמאל של העכבר, אני עומד לבצע חתך קטן. כעת הרעיון הוא להשאיר את החתך הזה קטן כדי שיחזיק את הכליה למעלה. כאשר מבודדים את הכליה, יש לחתוך כעת דרך דופן הפריטונאום ממש מעל הכליה, תוך ביצוע חתך קטן.ובתנועה אחת, אני מרים את העור שמאלה ודוחף למעלה, לוחץ על הכליה ומוציא אותה החוצה בצורה כזו. אני שומר על הכליה לחה, עם מעט סליין וגנטמיצין, שהוא אנטיביוטיקה. באמצעות מחט 25 gauge, אני אבצע חריץ קטן בכליה במקום שבו ימוקם הפרוטור.אין לרצות לחרוץ עמוק מדי בכליה, אלא רק ליצור חתך קטן. תראו קו דם דק, ואז תדעו שהגעתם אל הקפסולה.באמצעות צינורית P 50 שנגזרה בזווית (bevel), אשחל את הקצה מתחת לשפה של החתך שביצעתי ואניח באיטיות את הצינורית מתחת לקפסולה. פבל שומר על הכליה לחה במהלך הליך זה, מכיוון שקפסולה יבשה תיקרע בקלות. ברגע שצינורית ה-P 50 תהיה מתחת לקפסולה, פבו יקדם את הגולה באמצעות מזרק Hamilton עם הברגה (screw drive).ניתן לראות את הגליל נכנס לאט כאן, באיטיות. אתם מכוונים את העברת ה-eyelet בהתבסס על ההנעה של הבורג. לאחר העברת ה-eyelets, אני לוקח טיפ של גזה יבשה, מייבש את האזור, ובאמצעות מכשיר כויית, אני אוטם את החתך ואת הכליה.באמצעות חוט משי במידה 5-0, תפסתי את הפריטונאום ותפרתי אותו. ביצעתי תפר רץ כדי לסגור את העכבר. אנו סוגרים את העור באמצעות סיכות עור.לפני שאני מעיר את העכבר, אני מזריק לו תסמיכי דלקת (bpro, amine ו-flu nixon) ומשכך כאבים תת-עורי. לאחר מכן, העכבר מוחזר לכלוב שלו על גבי פד חימום. כך הדגמתי לכם כיצד להשתיל איליים תחת קפסולת הכליה של עכברים.זהו מודל מצוין לבחינת סבילות להשתלה או לדרכי טיפול בסוכרת. באופן ספציפי במעבדה שלנו, אנו משתמשים במודל זה כדי לבחון את השפעותיהם של tregs על השתלת תאי אי-לתי (eyelet cells) או השראה של סבילות באמצעות מולקולות חסימה קו-סטימולטוריות שונות.

transplantation-pancreatic-islets-into-kidney-capsule-diabetic

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

השתלה של איים מבודדים הוצע להיות טיפול פוטנציאלי עבור סוכרת מסוג 1. כאן אנו מתארים שיטה לבודד איים מהעכבר pancreata ואת השתלת אותם למרחב subcapsular של הכליה.

שיטה בידוד איילט Murine והשתלות כליה Subcapsular

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול להשתלת איי לבלב אנושיים לתוך החדר הקדמי של עין העכבר כדי לפקח על רה-וסקולריזציה של שתלי איונים אנושיים in vivo. זה גם עוזר להבין את התרומה של תאים מקבלים לעומת תורם בקידום אנקפסולציה ו vascularization של השתל.

השתלת איי לבלב: שיטה להשתלת איי לבלב לתוך החדר הקדמי של עין העכבר להדמיית In Vivo

פרוטוקול זה מדגים בידוד איים Murine וזרע על פיגום decellularized. איים נתמך פיגומים הושתלו לתוך כרית שומן האפידידימלי של streptozotocin (STZ), המושרה עכברים סוכרתית. איים שרדו באתר ההשתלות והפכו את מצב ההיפרגליקמיה.

פיגום נתמך השתלת איים בשומן השומן האפידידימלי של עכברים סוכרתית

בין השתלת איברים מוצקים בטן, שתלי הלבלב נוטים לפתח איסכמיה חמורה פגיעה reperfusion שתל פציעה-הקשורים נזק, המוביל בסופו של דבר לירידה שתל מוקדם. פרוטוקול זה מתאר מודל של השתלת לבלב מאתר באמצעות טכניקה ללא תפר השרוול, אידיאלי עבור ניתוח נזקים אלה מוקדם, ברישול.

העכבר מודל עבור השתלת לבלב בטכניקה השינוי הצמיד

שיטה השתלת עם פגיעה של איים ב עכבר הוא הציג. איים מבודדים מעורבבים עם הידרוג, התערובת ימוקם לתיק עם פגיעה של עכבר סוכרתית. לאחר מכן, הסוכר מנוטר, מבוצע ניתוח חיסונית-פתולוגיה.

שיטת השתלת איון כדי Omentum העכבר

השתלת הלבלב איון היא דרך להשיג normoglycemia על סוכרת מסוג 1. מאמר זה מתמקד בטכניקה השתלת מהנתיב intraportal כדי לשמור על רמות גלוקוז נורמלי בעכברים סוכרתיים.

השתלת intraportal של לנגרהנס במודל עכבר

בפרוטוקול זה, שיטה של מורטין איון בידוד והשתלת לתוך רקמת השומן הלבן התת עורית מתוארת. האיים המבודדים של מורנה ממורג מושתלים לתוך המטופל מורין באמצעות קרום מרתף הידרוג'ל. רמת הגלוקוז בדם של המטופלים מנוטרים, ו ניתוח היסטולוגיה של שתלי איון מבוצע.

השתלת מודל שומן לבן תת-עורית (ISWAT) מדגם ההשתלה של איויין מורנה

מטרת הפרוטוקול היא לעקוב באופן רציף אחר הדינמיקה של תהליך הלבלב האנושי ועל הפונדקאי התורם לעומת תאי התורם. זה מושגת על ידי השתלת איונים אנושיים לתוך התא הקדמי של העין (ACE) של NOD. (Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4-Rag2-/-נמען העכבר ואחריו הדמיה חוזרת של 2 פוטין.

אורכי בהדמיית Vivo וכמת של השתלת אי הלבלב האנושי ותורם תאים מארחים בתא העין הקדמית

כאן אנו מציגים הליכים כירורגיים מעודנים על ביצוע מוצלח של השתלת איים תוך-ספורטיביים, הליך כירורגי רלוונטי מבחינה קלינית אך מאתגר מבחינה טכנית, בעכברים.

מזעור דימום וריד פורטל לאחר עירוי במהלך השתלת איים תוך-הפטיים בעכברים

אנו מספקים פרוטוקול זעיר-פולשני להשתלה תוך-שרירית של איי תאי גזע לבלב שמקורם בתאי גזע אנושיים לעכברים חסרי חיסון, לצורך השתלה ב-in vivo וניתוח בהמשך הזרם.

השתלה תוך-שרירית של תאי גזע פלוריפוטנטיים במקור תאי גזע בלבלב בעכברים

למד שיטת השתלת איי לבלב לקופסית הכליה בעכברים סוכרתיים. טכניקה זו ממזערת מתח על התאים והמושתלים ומשפרת תוצאות השתלה במחקר סוכרת.

השתלת איי הלבלב לקופסית הכליה בעכברים סוכרתיים של

גלה סרטונים נוספים