Name: מודל עכברים של שיבוש מחסום דם מוח כדי לאפשר ממוקד Therapeutics Neurovascular (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: למדו שיבוש מחסום דם מוח בעכברים באמצעות מניטול תוך עורקי לשיפור אספקת תרופות למוח. שיטה זו מאפשרת מסירת תרופות שאינן חודרות את המחסום בדרך כלל.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי קרן JB מרשל.

1. הכן את בעלי חיים וציוד לנוהל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני תחילת ניתוח, להכין את אזור הניתוח ובעלי החיים. הפוך את הקטטר התרדמה על ידי החדרת מחט בוטה 23-מד לקצה אחד של 12 &quot;של PE50 צינורות. חותך פוע ° כ 45 בקצה השני של הצנתר. לעקר את הציוד לפני ההליך. תלבש מצנפת שיער, מסיכת מנתחים , וכפפות סטריליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח כרית חימום על פני השטח שבו בצע את הניתוח. להפעיל אותו ולאפשר לו להתחמם. לכסות את האזור עם כרית ספסל סופגת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שיש לי מניטול 25% בפתרון ללא גבישים. אם גבישים קיימים, לפזר אותם על ידי נחת הבקבוקון באמבט מים חם ב 80 ° C ולהסעיר מעת לעת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את מסתו של בעל החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך דילול propofol למסירה על 0.8 מ&quot;ג / ק&quot;ג / דקה בשיעור של 0.1 מ&quot;ל / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר בתיבת האינדוקציה עבור 3 דקות. הגדרות: 5% isoflurane, 2 ליטר / דקהקצב זרימה במנשים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על גבי מגבת חד פעמית, לגלח את הצוואר ושתי הירכיים הפנימיות. </li></ol> 2. לצנרר העכברוש <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את גב החיה בתיבת האינדוקציה עבור 3 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את צינור endotracheal עם קטטר IV. לגודל והזן של עכברים הזה, אנו משתמשים בצנתר 18 גה. הצינור חייב להיות גדול מספיק כדי לאפשר זרימת אוויר מספק, אך קטן מספיק כדי להתאים לקנה הנשימה מבלי לגרום ניזק. משוך את המחט של צנתר הפלסטיק ולשבור כ המחט בזהירות. 1 סנטימטר מהקצה החד שלה. מחט bunted תהיה החרט שלך. החזר את המחט לקטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתלות את החולדה על ידי שיניה על משטח זווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להאיר אור ישירות נגד צווארו של בעל החיים ונעמד בין אוזניו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס כ מרית קטנה. 3 סנטימטרים לתוך הלוע התחתון. הרם כלפי מעלה ומושך בעדינות את הלשון מחוץ לפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו הפתיחה של קנה הנשימה. אתה יהיה seחור קטן ea לפתוח ולסגור בכל נשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בעדינות קטטר לתוך החור. לפעמים אתה יכול להרגיש את הפלסטיק להזין את הסחוס של קנה הנשימה. קנה הנשימה היא רגישה. אל תכריח את הקטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את מכונת ההנשמה ל1 ליטר / דקה ו 60 פעימות לדקה וisoflurane עד 2%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר קטטר להנשמה וקלטת הצינור למשטח ההפעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא החיה מורדמת על ידי ביצוע קמצוץ בוהן. </li></ol> 3. להקים הרדמת IV Propofol <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אבטח את החולדה על ידי הדבקה בכל הארבעה הגפיים והזנב למשטח ההפעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשפשף את עורפו המגולח ואתרי מפשעה עם כלורהקסידין סבון שלוש פעמים. ואז לשפשף עם כלורהקסידין לשטוף שלוש פעמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מזרק של פרופופול לסט ההארכה רביעית. הר את המזרק במשאבת עירוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות אזמל, לחתוך דרך העור של הירך המגולחת. הימנע מחיתוך שרירים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את החתך בכוחנ.ב. כדי להמחיש את וריד הירך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למשוך את הרקמה על העורק כדי לחשוף את הכלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר 26 ga monoject הווטרינרים רביעי אל וריד. כאשר מחט החורים בקיר של הווריד אתה תרגיש את זה יהיה קל יותר ללחוץ. לחזור בו המחט ולדחוף את הקטטר אל תוך הספינה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל עירוי פרופופול על 0.1 מ&quot;ל / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 3-5 דקות לאחר תחילת עירוי פרופופול, לעבור את גז ההרדמה לתערובת של 50% O 2 ו 50% N 2 O וכיבה isoflurane. </li></ol> 4. לחשוף את ההתפצלות של עורק התרדמה המשותף <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קו אמצע בצוואר עם להב סכין מנתחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך בין שתי בלוטות הרוק הגדולות עם מספריים או סכין מנתחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלק את הרקמה לרוחב לקו האמצע לחשוף את העורק הראשי. השתמש במלקחיים כדי לפתוח שכבות של רקמות. אתה יכול להשתמש במספריים כדי להסיר חלקים שאתה חושף את עם מלקחיים ולקבוע להיות minimally כלי דם. שליטה בדימום בגזה, צמר גפן, וכווייה במידת צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק IP 3 המ&quot;ל סליין אם חלתי בינוני עד דימום כבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש מפשק להתרחק מרקמת עורק הראש. מצא הסתעפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף את העורק רק דיסטלי להסתעפות העורפי. לצרוב אותו בין מלקחיים ולהפריד אותו עם electrocautery. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במלקחיים כדי לחשוף את הסתעפות עורק התרדמה וכמה שיותר מECA ככל האפשר באופן מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף את עורק התריס המעולה מסתעף ECA דיסטלי לעורק העורפי. לצרוב אותו בין מלקחיים ולהפריד אותו עם electrocautery. </li></ol> 5. צנטר עורקי התרדמה החיצוניים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח 2 אורכים של 4/0 משי תחת ECA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפוס אורך 1 של תפר עם המלקחיים שלך ולחזור בי ECA חזרה caudally (לכיוון הרגליים של העכברוש). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח תפר האחר ולקשור ככל cranially (לכיוון הפה של החולדה) כw אפשריהקשר של ith מנתח. זה מהווה קשירת קבע להקריב ECA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המלקחיים הראשונים (זו שהייתה החלת מתח זנב) ולתפוס את התפר האחר (אחד שהוא קשור סביב ECA) ולהחיל מתח עדין cranially עם המלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור קשר של מנתח אחר רופף (לא לאבטח - לעזוב בקושי קשור) דיסטלי להסתעפות וסמוך לקשירת הקבע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשקות עם 1% לידוקאין להירגע העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא קטטר עם מי מלח heparinized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח קליפ כלי רכב זמני קרוב ככל האפשר להסתעפות. קליפ הכלי פלייס בזווית כדי להגדיל את השטח לצנתור. הסט את הקשר הרופף לקליפ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך arteriotomy קטן (חתך) בECA פשוט הפרוקסימלי לקשירה באמצעות microscissors. לא צריך להיות שום דימום אם קליפ ורצועת החיבור מאובטחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים כדי לשלוט על קירות ECA, להאכיל הסוף הקטום של קטטר לתוך כלי הקיבול. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> Secure את הקטטר עם הקשר הרופף התפר. לקשור את העורק סביב קטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הסרטון ולנקות את האזור עם צמר גפן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדם את הצנתר לכ 1 מ&quot;מ דיסטלי להסתעפות. החזק את העורק עם מלקחיים הפרוקסימלי לקשר כדי להבטיח את הספינה היא משותקת. </li></ol> 6. לנהל מניטול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא 8 &quot;סט הארכה רביעית ומזרק 6 מ&quot;ל עם מניטול, מבלי ליצור כל בועות אוויר בחנות זו בחממה ב 37 ° C. הערה: עבודה במהירות עם מניטול - אותו בקלות תזרז מתוך פתרון בטמפרטורת חדר.. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להמחיש BBBD, ייתכן לנהל אוונס הכחול לצבוע ולצפות בו הכנס את האזורים במוח שבו המחסום שובש. כדי לעשות זאת, לתת את חית 2 מ&quot;ל / ק&quot;ג של 2% אוונס הכחול דרך האתר רביעי חדש על רגל נגדית לעירוי פרופופול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף הסיומת מוגדרת 5 מיקרומטר לסנן ולמלא אותו עם מניטול להסיר האוויר bubמשודכים. לאחר מכן, לצרף את זה לברזלים ללא יצירת בועות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל מניטול ב0.09 מ&quot;ל / שני ל 25 שניות. Watch עבור מניטול להגיע שיווי משקל עם הזרימה בעורק תרדמה משותף בנקודה בדיוק הפרוקסימלי ליק&quot;א. הוא אמור להופיע לפעום בקצב הלב של החולדה. אם מניטול פשוט זורם במורד לכיוון הלב שיש לך להתגבר על לחץ הדם של החולדות. זה יכול לגרום לסיבוכים מסכני חיים וBBBD עני. </li></ol>

<ol><li>Abbott, N. J., Patabendige, A. A. K., Dolman, D. E. M., Yusof, S. R., Begley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+disease%22%5BJournal%5D)">Structure and function of the blood-brain barrier.</a> Neurobiology of disease. 37, 13-25 (2010).</li>
<li>Smith, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Blood-Brain+Barrier%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The Blood-Brain Barrier.</a> 89, 193-208 (2003).</li>
<li>Kroll, R. A., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outwitting+the+blood-brain+barrier+for+therapeutic+purposes%3A+osmotic+opening+and+other+means%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Outwitting the blood-brain barrier for therapeutic purposes: osmotic opening and other means.</a> Neurosurgery. 42, 1083(1998).</li>
<li>Kroll, R. A., Pagel, M. A., Muldoon, L. L., Roman-Goldstein, S., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+volume+of+distribution+to+the+brain+with+interstitial+infusion%3A+dose%2C+rather+than+convection%2C+might+be+the+most+important+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Increasing volume of distribution to the brain with interstitial infusion: dose, rather than convection, might be the most important factor.</a> Neurosurgery. 38, 746-754 (1996).</li>
<li>Butt, A. M., Jones, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+histamine+and+antagonists+on+electrical+resistance+across+the+blood-brain+barrier+in+rat+brain-surface+microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+research%22%5BJournal%5D)">Effect of histamine and antagonists on electrical resistance across the blood-brain barrier in rat brain-surface microvessels.</a> Brain research. 569, 100-105 (1992).</li>
<li>Inamura, T., Black, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bradykinin+selectively+opens+blood-tumor+barrier+in+experimental+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Bradykinin selectively opens blood-tumor barrier in experimental brain tumors.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 14, 862-870 (1994).</li>
<li>Matsukado, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+tumor+uptake+of+carboplatin+and+survival+in+glioma-bearing+rats+by+intracarotid+infusion+of+bradykinin+analog%2C+RMP-7%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Enhanced tumor uptake of carboplatin and survival in glioma-bearing rats by intracarotid infusion of bradykinin analog, RMP-7.</a> Neurosurgery. 39, 125(1996).</li>
<li>Kroll, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+drug+delivery+to+intracerebral+tumor+and+surrounding+brain+in+a+rodent+model%3A+a+comparison+of+osmotic+versus+bradykinin+modification+of+the+blood-brain+and%2For+blood-tumor+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Improving drug delivery to intracerebral tumor and surrounding brain in a rodent model: a comparison of osmotic versus bradykinin modification of the blood-brain and/or blood-tumor barriers.</a> Neurosurgery. 43, 879(1998).</li>
<li>Kinoshita, M., McDannold, N., Jolesz, F. A., Hynynen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+localized+delivery+of+Herceptin+to+the+mouse+brain+by+MRI-guided+focused+ultrasound-induced+blood-brain+barrier+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Noninvasive localized delivery of Herceptin to the mouse brain by MRI-guided focused ultrasound-induced blood-brain barrier disruption.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 103, 11719-11723 (2006).</li>
<li>Neuwelt, E. A., Dahlborg, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotherapy+administered+in+conjunction+with+osmotic+blood-brain+barrier+modification+in+patients+with+brain+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neuro-oncology%22%5BJournal%5D)">Chemotherapy administered in conjunction with osmotic blood-brain barrier modification in patients with brain metastases.</a> Journal of neuro-oncology. 4, 195-207 (1987).</li>
<li>Doolittle, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+efficacy+of+a+multicenter+study+using+intraarterial+chemotherapy+in+conjunction+with+osmotic+opening+of+the+blood-brain+barrier+for+the+treatment+of+patients+with+malignant+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Safety and efficacy of a multicenter study using intraarterial chemotherapy in conjunction with osmotic opening of the blood-brain barrier for the treatment of patients with malignant brain tumors.</a> Cancer. 88, 637-647 (2000).</li>
<li>Guillaume, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+chemotherapy+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption+for+aggressive+oligodendroglial+tumors%3A+results+of+a+phase+I+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial chemotherapy with osmotic blood-brain barrier disruption for aggressive oligodendroglial tumors: results of a phase I study.</a> Neurosurgery. 66, 48(2010).</li>
<li>Remsen, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+anesthetic+choice%2C+PaCO2%2C+and+other+factors+on+osmotic+blood-brain+barrier+disruption+in+rats+with+brain+tumor+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+%26+Analgesia%22%5BJournal%5D)">The influence of anesthetic choice, PaCO2, and other factors on osmotic blood-brain barrier disruption in rats with brain tumor xenografts.</a> Anesthesia & Analgesia. 88, 559-559 (1999).</li>
<li>Nilaver, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+herpesvirus+and+adenovirus+to+nude+rat+intracerebral+tumors+after+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Delivery of herpesvirus and adenovirus to nude rat intracerebral tumors after osmotic blood-brain barrier disruption.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 92, 9829(1995).</li>
<li>Fortin, D., McCormick, C. I., Remsen, L. G., Nixon, R., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unexpected+neurotoxicity+of+etoposide+phosphate+administered+in+combination+with+other+chemotherapeutic+agents+after+blood-brain+barrier+modification+to+enhance+delivery%2C+using+propofol+for+general+anesthesia%2C+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Unexpected neurotoxicity of etoposide phosphate administered in combination with other chemotherapeutic agents after blood-brain barrier modification to enhance delivery, using propofol for general anesthesia, in a rat model.</a> Neurosurgery. 47, 199(2000).</li>
<li>Neuwelt, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+CNS+lymphoma+treated+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%3A+prolonged+survival+and+preservation+of+cognitive+function%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+clinical+oncology%22%5BJournal%5D)">Primary CNS lymphoma treated with osmotic blood-brain barrier disruption: prolonged survival and preservation of cognitive function.</a> Journal of clinical oncology. 9, 1580(1991).</li>
<li>Remsen, L. G., Trail, P. A., Hellström, I., Hellström, K. E., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+delivery+improves+the+efficacy+of+a+tumor-specific+doxorubicin+immunoconjugate+in+a+human+brain+tumor+xenograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Enhanced delivery improves the efficacy of a tumor-specific doxorubicin immunoconjugate in a human brain tumor xenograft model.</a> Neurosurgery. 46, 704(2000).</li>
<li>Neuwelt, E. A., Pagel, M. A., Kraemer, D. F., Peterson, D. R., Muldoon, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+chemoprotection+without+compromise+of+chemotherapy+efficacy+in+a+rat+brain+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Bone marrow chemoprotection without compromise of chemotherapy efficacy in a rat brain tumor model.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 309, 594-599 (2004).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

יש כמה אמצעים למקסם את היעילות של BBBD. חשוב למזער את הדימום בשלב קצץ. לחץ דם וקצב לב יכולים להיות מושפע מדימום משמעותי וגורמים אלה ידועים בהשפעתם על מידת BBBD 13. דימום יכול להיות מופחת על ידי שימוש בתפרים לקשור כלי דם גדולים, כגון בלוטת תריס המעולה ועורקים עורפיים, אשר חייב להיות מחולק. בנוסף, ניתן להשתמש electrocautery לחלק כולים לנתח ואזורים שיש להם אספקת דם עשירה. כמו כן, חשוב לשמור על אוויר ומוצק מכל הקווים שהונחו לבעלי החיים - במיוחד קטטר התרדמה. עבודה במהירות עם...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם חומר </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> הערה </td></tr><tr><td> לונג חולדת אוונס </td><td> מעבדות הרלן </td><td></td><td> 210-250 גרם, גברי </td></tr><tr><td> PE 50 אבובים </td><td> Beckton-דיקינסון </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 18 מד x 2.5 &quot;קטטר IV </td><td> Terumo </td><td></td><td> לצינור ET </td></tr><tr><td> 30 &quot;ההארכה הרביעית קובעת </td><td> אבוט </td><td></td><td></td></tr><tr><td> קטטר IV וטרינרי מד 26 </td><td> Monoject </td><td></td><td></td></tr><tr><td> אוונס הכחול צבע </td><td> סיגמא </td><td> E2129 </td><td></td></tr><tr><td> דו קוטבי </td><td> Codman </td><td></td><td></td></tr><tr><td> סינון, 5 מיקרומטר </td><td> בראון </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

מודל עכברים של שיבוש מחסום דם מוח כדי לאפשר ממוקד therapeutics neurovascular

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

תאי האנדותל עם צומת הדוקים יחד עם קרום המרתף ורגלי קצה astrocyte מקיפים כלי דם מוחיים כדי ליצור את מחסום דם מוח 1. המחסום סלקטיבי אינו כולל מולקולות מהמעבר בין הדם והמוח המבוססים על הגודל ועל אחריותן. פונקציה זו יכולה לעכב את המשלוח של תרופות לטיפול בהפרעות נוירולוגיות. מספר התרופות כימותרפיות, למשל, לא יעיל לחצות את מחסום דם המוח כדי להגיע לתאים סרטניים 2. לפיכך, שיפור אספקת סמים ברחבי מחסום דם המוח הוא אזור של עניין. השיטות הנפוצות ביותר לשיפור המשלוח של תרופות למוח הן עירוי מוחי ישיר ושיבוש 3 מחסום דם מוח. ערבויות עירוי intracerebral ישירות שטיפולים להגיע למוח, עם זאת, לשיטה זו יש יכולת מוגבלת לפיזור התרופה 4. שיבוש מחסום דם מוח (BBBD) אלתרופות מורדות לזרום ישירות ממערכת הדם למוח ובכך באופן יעיל יותר להגיע לתאים סרטניים מפוזרים. שלוש שיטות של שיבוש מחסום כוללות שיבוש האוסמוטי מכשול, הפרעת מחסום תרופתית, ואולטרסאונד הממוקד עם microbubbles. שיבוש אוסמוטי, חלוץ ידי Neuwelt, משתמש בפתרון של hypertonic מניטול 25% שמייבש את התאים של מחסום דם המוח וגורם להם להתכווץ ולשבש צומת החזקים שלהם. שיבוש גדר גם יכול להיות מושלם פרמקולוגית עם תרכובות vasoactive כגון היסטמין 5 ו 6 bradykinin. שיטה זו, עם זאת, היא סלקטיבית בעיקר למחסום מוח גידול 7. בנוסף, RMP-7, אנלוגי של פפטיד bradykinin, נמצא כנחות בהשוואת הראש בראש עם BBBD אוסמוטי עם מניטול 25% 8. שיטה נוספת, אולטרסאונד ממוקד (FUS) בשיתוף עם סוכנים בניגוד אולטרסאונד microbubble, כן הוכחההפיך לפתיחת מחסום דם מוח 9. בהשוואה לFUS, אם כי, מניטול 25% יש לו היסטוריה ארוכה של בטיחות בחולים אנושיים שהופכת אותו לכלי מוכח למחקר translational 10-12. על מנת להשיג BBBD, מניטול יש להעביר בשיעור גבוה באופן ישיר למחזור העורקים של המוח. בבני אדם, קטטר endovascular מונחה למוח שבו ניתן להשיג זרימה מהירה וישירה. פרוטוקול מודלים האנושיים הזה BBBD ככל האפשר. בעקבות קצץ להסתעפות של עורק התרדמה המשותף, צנתר מוחדר מדרדר לECA ומשמש להעברת מניטול ישירות לתוך עורק התרדמה הפנימי (הרשפ&quot;ת) במחזור. Propofol והרדמת O N 2 משמשים ליכולתם למקסם את האפקטיביות של שיבוש מחסום 13. אם מבוצע כראוי, הליך זה יש את היכולת בבטחה, ביעילות, והפיך לפתוח את מחסום דם המוח והאלתורדואר המשלוח של תרופות שאינם רגיל להגיע למוח 8,13,14.

<img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/50019/50019fig1.jpg" /> איור 1. Visualizing שיבוש מחסום דם מוח באמצעות extravasation אוונס הכחול הצבע. אוונס הכחול צבע הוא פיגמנט שנקשר לאלבומין ולא extravasated לתוך המוח בתנאים פיסיולוגיים. שיבוש של מחסום דם המוח בצד אחד של המוח מאפשר אוונס כחול להיכנס וכתם הכחול האונה שבשה בעוד שההמיספרה שאינם המופרת, נותרת ללא שינוי. לכן, זה סמן שימושי של שיבוש מחסום דם מוח. האיור 1A</s...

שיבוש מחסום דם מוח מסייע למשלוח של תרופות מסוימות למוח. מניטול נמסר תאים מתכווצים סביב כלי דם התוך arterially כדי פיזי לשבש את המכשול.

מודל עכברים של שיבוש מחסום דם מוח כדי לאפשר ממוקד Therapeutics Neurovascular

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לשבש את מחסום הדם-מוח. זה מושג על ידי הכנסת החיה תחילה להרדמה IV עם נתיב אוויר אנדוטרכאלי. לאחר מכן, נחשף הפיצול של עורק הצוואר המשותף.לאחר מכן מוחדר קטטר לעורק הצוואר החיצוני. לבסוף, מניטול ניתן. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות הפרעה במחסום הדם-מוח באמצעות אקסטרוואזציה של הצבע הכחול של אוון.היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני השיטות הקיימות של טיפול תוך עורקי הוא שהיא מאפשרת לתרופות להיכנס למוח, שבדרך כלל אינן חוצות את מחסום הדם-מוח בתנאים פיזיולוגיים. יש לכך השלכות בתחום מדעי המוח מכיוון שהוא מאפשר לנו לבחון טיפולים חדשים שיש להם יכולת ירודה לחצות את מחסום הדם-מוח. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על נוירו-אונקולוגיה מכיוון שחומרים כימותרפיים רבים אינם חוצים את מחסום הדם-מוח.ובכן, למרות ששיטה זו מספקת לנו תובנה לגבי אונקולוגיה חדשה, היא יכולה גם לספק לנו מידע על הפרעות נוירולוגיות אחרות המטופלות על ידי תרופות עם חדירות לקויה של מחסום הדם-מוח. אנו מקווים שההדגמה החזותית של השיטה הזו תאפשר לחוקרים ומכירים את הכירורגיה של בעלי חיים להשתמש בטכניקה הזו במעבדות שלהם. כדי להתחיל, הכינו תמיסה של 25% מניטול וודאו שאין גבישים.אם קיימים גבישים, ממיסים אותם על ידי הנחת הבקבוקון באמבט מים של 80 מעלות צלזיוס ומערבבים. רשום מעת לעת את מסת החיה והכין שני מזרקים של 12 סמ"ק פרופופול שיסופקו בקצב של 0.1 מיליליטר לדקה. לאחר הרדמת החיה בתא אינדוקציה, הניחו אותה על מגבת חד פעמית וגלחו את צווארה וירכיה הפנימיות.החזירו את החיה לתא האינדוקציה למשך שלוש דקות. כדי להתכונן לאינטובציה כדי להחדיר את החולדה, התחל בהכנת צינור אנדוטרכיאלי עם קטטר IV. הצינור חייב להיות גדול מספיק כדי לאפשר זרימת אוויר נאותה, אך קטן מספיק כדי להיכנס לקנה הנשימה מבלי לגרום נזק.להכנת חרט, משוך את המחט מקטטר הפלסטיק ושבר בזהירות את המחט. כסנטימטר אחד מהקצה החד שלו, החזירו את המחט לקטטר. לאחר מכן, תלו את החולדה בשיניה על משטח זוויתי, האירו אור ישירות על צוואר החיה המסודר בין אוזניה.לאחר מכן, הכנס מרית קטנה לתוך האורופרינקס. כשלושה סנטימטרים. יש להרים כלפי מעלה תוך כדי משיכת הלשון בעדינות מהפה.דמיינו את פתח קנה הנשימה כחור קטן שנפתח ונסגר. בכל נשימה, הכניסו בעדינות את הקטטר לתוך החור, והקפידו לא להכניס אותו בכוח לסחוס של קנה הנשימה הרגיש. הגדר את מכונת ההנשמה לליטר אחד לדקה ו-60 פעימות לדקה ולאחר מכן איזוף פלואור ל-2%לאחר מכן חבר את הקטטר למכונת ההנשמה והדביק את הצינור למשטח ההפעלה.ודא שהחיה מורדמת על ידי ביצוע צביטה בבוהן. אבטח את המסלול על ידי הדבקת כל ארבעת הגפיים בזנב למשטח הניתוח. שפשפו את הצוואר והמפשעה המגולחים בסבון כלורהקסידין שלוש פעמים.ואז לשפשף עם כלורהקסידין. יש לשטוף שלוש פעמים. חבר מזרק פרופופול לסט הארכת IV והתקן את המזרק על משאבת העירוי.לאחר מכן, בעזרת אזמל חתכו את עור הירך המגולחת מבלי לחתוך את השריר. לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי לפתוח את החתך ולאתר את וריד הירך ולמשוך את הרקמה מעל העורק כדי לחשוף את הכלי. הכנס קטטר וטרינרי 26 גרם מונו פליטה לווריד.ברגע שהמחט מנקבת את דופן הווריד, יהיה קל יותר לדחוף אותה. משוך את המחט ודחף את הקטטר לתוך הכלי שלוש עד חמש דקות. לאחר תחילת עירוי הפרופופול, העבר את גז ההרדמה לתערובת של 50% O2 ו-50%N two O וכבה את איזו הפלואור.כדי לחשוף את ההסתעפות של עורק הצוואר המשותף, התחל באמצעות להב אזמל כדי לבצע חתך בקו האמצע בצוואר. חותכים את החזית השטחית לאורך קו האמצע כדי להגיע לשריר ההיואיד החזה מעל קנה הנשימה. הרחיקו את הרקמה לרוחב כדי לדמיין קבוצה של שלושה שרירים, ההיואיד החזה, הקיבה והמסטואיד החזה שיצר את משולש הצוואר של החולדה בעזרת מלקחיים או מספריים.הפרד את הפאשיה בין שרירי משולש הצוואר כדי לחשוף את עורק הצוואר. השתמש בצריבה דו קוטבית כדי לחלק כלי דם קטנים יחד עם גזה וצמר גפן כדי לשלוט בדימום, השתמש במחזירים כדי להפריד את השרירים בעזרת מלקחיים. הרחיקו את הרקמה מהצוואר ומצאו את ההתפצלות.חשוף את העורק העורפי רק דיסטלי להתפצלות. צרבו אותו בין מלקחיים והשתמשו באלקטרו-צריבה כדי להפריד אותו בעזרת מלקחיים. חשוף באופן מלא את התפצלות הצוואר וכמה שיותר מעורק הצוואר החיצוני או ECA.חשוף את עורק בלוטת התריס העליון המסתעף מה-ECA הדיסטלי לעורק העורפי. צרבו אותו בין המלקחיים והפרידו אותו לצנתור ה- ECA. הניחו שני אורכים של ארבעה משי הו מתחתיו.השתמש בהמוסטט ותפס תפר באורך אחד ומשוך את ה-ECA לאחור עם התפר השני. קשרו אותו עם קשר המנתח רחוק ככל האפשר מהגולגולת, דיסטלי להתפצלות ופרוקסימלי לקשירה הקבועה. קשרו קשר רופף של מנתח אחר כדי להרפות את העורק.להשקות אותו עם 1% לידוקאין, למלא את הקטטר במי מלח הפריניזציה. לאחר מכן, הנח קליפ כלי זמני בזווית קרובה ככל האפשר לפיצול. לאחר מכן החלק את הקשר הרופף לכיוון הקליפ בעזרת מספריים מיקרו.בצע חתך קטן ב- ECA ממש קרוב לקשירה. אם הקליפ והקשירה מאובטחים, לא אמור להיות דימום באמצעות מלקחיים. כדי לשלוט בדפנות ה-ECA, הזינו את הקצה המשופע של הקטטר לתוך הכלי עם קשר המנתח הרופף.אבטח את הקטטר. קשרו את העורק סביב הצנתר, ולאחר מכן הסירו את הקליפ והשתמשו במקלון צמר גפן כדי לנקות את האזור. קדם את הקטטר כמילימטר אחד רחוק מההסתעפות.השתמש במלקחיים כדי להחזיק את העורק הפרוקסימלי לקשר כדי להבטיח שהכלי משותק. למתן מניטול. מלאו סט הארכה IV בגודל שמונה אינץ' ומזרק של שישה מיליליטר במניטול מבלי ליצור בועות אוויר.אחסן אותו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס כדי לדמיין את ההפרעה במחסום הדם-מוח, או לתת שני מיליגרם לק"ג של 2% אוונס בלו דרך אתר עירוי חדש ברגל בניגוד לעירוי פרופופול. חבר את ערכת ההארכה למסנן של חמישה מיקרון ומלא אותו במינול כדי להסיר בועות אוויר. לאחר מכן חבר אותו לזין העצירה מבלי ליצור בועות.מתן מניטול במהירות של 0.09 מיליליטר לשנייה במשך 25 שניות, צפה שהמניטול יגיע לשיווי משקל עם הזרימה בצוואר המשותף בנקודה הקרובה לעורק הצוואר הפנימי, הוא אמור להיראות פועם עם קצב הלב של החולדה. ודא שהמניטול אינו זורם לכיוון הלב, מה שמעיד על כך שהזרימה התגברה על לחץ הדם של החולדה ועלולה לגרום לסיבוכים חמורים. שיבוש של מחסום הדם-מוח בצד אחד של המוח מאפשר לכחול של אוון להיכנס ולהכתים את חצי הכדור המשובש בכחול, בעוד שחצי הכדור הלא-מפריע נשאר ללא שינוי.מוצגת כאן דוגמה של מוח ללא הפרעה במחסום דם-מוח או BBBD, והנה דוגמה של מוח צבוע בכחול אחרי BBBD אוסמוטי, שימו לב שההמיספרה הימנית מוכתמת ושחלק מהכחול נכנס להמיספרה השמאלית ליד הסדק האורכי המדיאלי כתוצאה מערבוב של זרימת הדם במעגל וויליס. השיטה הזו סוללת את הדרך לחוקרים לחקור טיפולים שאינם חוצים את מחסום הדם-מוח במודל של חולדות. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להיות מסוגל לשבש את מחסום המוח המטושטש על ידי צנתור עורק הצוואר והחדרת תמיסת מניטול ישירות למוח.

rat-model-blood-brain-barrier-disruption-to-allow-targeted

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Microbubble בתיווך הפרעה אולטרסאונד ממוקד של מחסום דם מוח (BBB) ​​היא טכניקה מבטיחה למסירה פולשני התרופה ממוקדת...

MRI-מודרך שיבוש של מחסום דם מוח באמצעות אולטרסאונד ממוקד Transcranial מודל עכברים

בסרטון זה, אנו מתארים פרוטוקול מקיף לביסוס מודל במבחנה המחקה את מחסום הגידול בדם-מוח. המודל טומן בחובו הבטחה להבין את אספקת החומרים הטיפוליים לטיפול בגידולי מוח.

מחסום גידול דם-מוח או מודל BBTB: התאמה של מחסום הדם-מוח או מודל BBB להערכת מתן טיפולים לגידול

הקמת מודלים האנושיים של מחסום דם המוח (BBB) ​​יכולה להועיל למחקר לתנאי מוח הקשורים לכישלון BBB. אנו מתארים כאן טכניקה משופרת להכנת מודל BBB מגע, המאפשר coculturing של האסטרוציטים אנושיים ותאי האנדותל במוח בצדדים המנוגדים של קרום נקבובי.

שיפר שיטה להכנה מבוססת תאים, דגם מגע אנושי של מחסום דם המוח

מטרת המחקר הנוכחי הייתה לאמת את שחזור של מודל במבחנה BBB מעורב syngeneic חולדה שיתוף תרבות של תאים והאסטרוציטים אנדותל. Monolayer תא אנדותל הציג Teer גבוה וחדירות LY נמוכות. ביטוי של חלבונים ספציפיים TJ, תגובות פונקציונליות לדלקת ופונקציונליות של מובילים וקולטנים הוערכו.

הגדרה למעלה<em&gt; במבחנה</em&gt; דגם של מחסום דם מוח חולדה (BBB): פוקוס על BBB האטים ותחבורה בתיווך קולטן

כאן נציג של assay חדירות כלי דם במוח העכבר באמצעות הזרקה בקרום הבטן של המשדרים פלורסנט ואחריו זלוף הרלוונטיים מודלים חייתיים של תפקוד לקוי של מחסום הדם - מוח. חמי-המוח משמש עבור הערכת חדירות באופן כמותי, והשני עבור מעקב חזותי/immunostaining. התהליך לוקח ב' 5-6-10 עכברים.

In Vivo מחסום הדם - מוח חדירות Assay בעכברים באמצעות Fluorescently עם התווית המשדרים

המטרה הכוללת של נוהל זה היא לספק טכניקה מאוד לשחזור להערכת ויוו של ערעור מחסום הדם - מוח במודלים עכברוש של שבץ איסכמי.

הערכה In Vivo של מחסום הדם - מוח שיבוש במודל של עכברים של שבץ איסכמי

כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר את ההגדרה של cellulo ב BBB (מחסום הדם-מוח)-Minibrain פוליאסטר נקבובי ממברנה תרבות להוסיף מערכת על מנת להעריך את התחבורה של מולקולות או מדבקים BBB האנושית שלהם ההשפעה הפיזיולוגית על תאי המוח שכנות.

מודל ממשק מוח-דם אנושי ללמוד מכשול המעברים על ידי פתוגנים או תרופות והאינטראקציה שלהם עם המוח

סמים המיקוד גידולים במערכת העצבים המרכזית היא אתגר גדול. כאן נתאר פרוטוקול לייצר לחקות במבחנה של דם-מוח הגידול-המכשול באמצעות תאים מאתר ו/או האדם, לדון את הרלוונטיות שלהם עבור מהמכונית של מערכת העצבים המרכזית הגידול מיקוד ויוו.

Predicting ב Vivo מטענים משלוח באמצעות הגידול-מחסום דם-מוח בקערה

מחסום הדם-מוח (BBB) הוא יחידת נוירונימי-דם הדוקה באופן הדוק הומאוסטזיס מוחי. על ידי שילוב האדם iPSCs והעוגב-על-שבב טכנולוגיות, יצרנו שבב BBB אישי, מתאים למידול מחלות ותחזיות החדירה לתרופות של הפונקציה. פרוטוקול מפורט מתואר לדור ותפעול של שבב BBB.

הדור של המוח האנושי מבוסס על-ידי שבב דם-מחסום

פרוטוקול זה מתאר שיטה להקמת מחסום דם-מוח אנושי (BBB) במודל מבחנה . תאי האנדותל והפריציטים נזרעים בכל צד של מסנן הכנסה (תא דם), ואסטרוציטים נזרעים בבאר התחתונה (תא המוח). המודל שאפיין שימש לניסויים בהובלת ננו-חלקיקים.

מערכת תאי תרבית משולשת המדגימה את מחסום הדם-מוח האנושי

למחסום הדם-מוח (BBB) יש תפקיד מכריע בשמירה על סביבת מוח יציבה ובריאה. תפקוד לקוי של BBB קשור למחלות נוירולוגיות רבות. פיתחנו מודל תלת-ממדי, הנגזר מתאי גזע של BBB כדי לחקור פתולוגיה של כלי דם במוח, שלמות BBB, וכיצד BBB משתנה על ידי גנטיקה ומחלות.

שחזור מחסום הדם-מוח במבחנה כדי למדל ולטפל במחלות נוירולוגיות

למדו שיבוש מחסום דם מוח בעכברים באמצעות מניטול תוך עורקי לשיפור אספקת תרופות למוח. שיטה זו מאפשרת מסירת תרופות שאינן חודרות את המחסום בדרך כלל.

מודל עכברים של שיבוש מחסום דם מוח כדי לאפשר ממוקד Therapeutics Neurovascular

גלה סרטונים נוספים